点击显示 收起
高效液相色谱的特点如下:
高压——压力可达150~300 kg/cm2。色谱柱每米降压为75 kg/cm2以上。
高速——流速为0.1~10.0 mL/min。
高效——塔板数可达5000/米。在一根柱中同时分离成份可达100种。
高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。
HPLC与经典液相色谱相比有以下优点:
速度快——通常分析一个样品在15~30 min,有些样品甚至在5 min内即可完成。
分辨率高——可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。
灵敏度高——紫外检测器可达0.01ng,荧光和电化学检测器可达0.1pg。
色谱柱可反复使用——用一根色谱柱可分离不同的化合物。
样品量少,容易回收——样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。
TLC与液相色谱都是很重要的方法,TLC简便快捷,成本低,有些是液相色谱不可替代的,比如说展开剂就可以用任何性质强烈的试剂进行分离以便达到预期目的,这些是主要是由于色谱柱的限制的HPLC所不能比拟的,所以TLC在中间体控制,中药材鉴别和某些中药材含量测定,以及在合成工艺中的反应程度控制等等都占有不可替代的作用。液相色谱专属性和准确性要高,在某些TLC转化成液相色谱是一种趋势,从国家的现行标准同以前的标准上就可看出,HPLC的方法应用有很大比例的提高。在一次检查中液相色谱只能做一个样,TLC上可以同时展开很多。TLC的成本也较低。由于二者的不同特点,通常在实验中,先进行TLC,展开后挖出所需部分(带有硅胶)进行液相色谱。或者先用纸层析,之后将纸粉碎,再进液相色谱。