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建立了一种用HPLC-蒸发激光散射检测器（ELSD）对4种肌肉松弛剂进行
快速分析的方法，并将ELSD与UV-VIS和RI检测法对这些肌肉松弛剂的检出限
进行比较。
HPLC系统由Alltech（Deerfild，Illinois，USA）525型二元泵，Alltech570型
自动进样器配20μL定量环，Alltech
500 ELSD，Linear
205 UV-VIS 检测器
（Thermal Separation Products，San Jose，California）检测波长设为210nm，
Waters 610示差折光检测器（Mlford，Massachusetts，USA）。色谱柱为Alltech
Adsorbsphere UHS C18柱（5μm，150mm×2.1mm）。试验方法时曾用过几种梯
度组成，最终选用的梯度组成分离度好且分离时间小于11min。其组成为：溶
剂A：0.1％三氟醋酸/水，溶剂B：0.1％三氟醋酸/甲醇。梯度程序（时间，％ B）
为：（0，35）、（2，35）、（12，57）、（15，57），流速：0.2mL/min。
三氟醋酸（TFA）购自Sigma（St Lois，Missouri，USA）。肌肉松弛剂标
准品维库溴铵（Vecuronium
bromide）、罗库溴铵（Rocuronium bromide）和哌库
溴铵（Pipecuronium bromide）由Organon公司（West Orange，Newjersey，USA）
提供，泮库溴铵（Pancuronium bromide）由Gensia制药公司（Irivine，California，
USA）提供。所有标准品均用0.1％三氟醋酸的水溶液稀释。
图1 应用不同检测器的色谱图
A.UV检测器 B.ELSD检测器 C.RI检测器 D.ELSD用作细内径柱的检测器
1.柠檬酸、磷酸钠、醋酸钠、甘露醇
2.罗库溴铵 3.绊库溴铵 4.哌库溴铵
5.维库溴铵
图1-A所示为4种肌肉松弛剂用UV检测器在210nm波长检测下的分离图。
虽然所有成分的浓度相同，罗库溴胺的紫外响应比其余的肌肉松弛剂较小，
其原因是罗库溴胺的发色性差。图1-B所示为用ELSD检测同一分离时的情况。
由于ELSD的响应值不依赖于样品的光学特性，所给出的信号更接近于样品的
组成，ELSD以几乎一致的响应因子检测具有发色基团和不具发色基团的样品。
因为ELSD在检测之前即将流动相蒸发掉，故可提供更稳定的基线。与RI
检测器不同，ELSD的响应不随环境稳定的变化而改变。当用RI检测器时，即
使采用恒比例低流速分析，也难以得到稳定的基线，如图1-C所示。用UV-VIS
检测所产生的基线漂移是由于当流动相中甲醇浓度增加而使三氟醋酸摩尔吸
收系数改变所致。这使得难以对这些肌肉松弛剂准确定量。而在用ELSD检测
的色谱图中则无基线漂移。
在本分析中采用细内径柱可使检测灵敏度增至最大。这是由于降低了样
品分析物在柱内径向稀释，使样品分析物在2.1mm ID柱后流出浓度高于4.6
mm ID柱。因此，在检测器上可产生更大的响应。而ELSD也有利于作细内径
柱的检测器，因为流动相的流速较低可降低气流而使灵敏度提高。最小检出
限（LOD）可检至柱上9ng肌肉松弛剂（图1-D）。这是由1.56ng/μL罗库溴
胺进样20μL所得到的峰，按能生产三倍信噪比峰的被分析物量计算得出的。
蒸发激光散射检测器与反相HPLC柱联用可提供一种快速而定量的测定肌
肉松弛剂的方法。用上述仪器和方法，肌肉松弛剂可检测低至ng级水平。
对肌肉松弛剂的分析，ELSD可提供稳定的基线，且比UV-VIS和RI更
精确的测定。