HPLC测定白加黑中盐酸伪麻黄碱和氢溴酸右美沙芬的含量

　　摘要　目的:测定白加黑中盐酸伪麻黄碱和氢溴酸右美沙的含量。方法：采用苯基键合硅胶柱；流动相为乙腈-水-磷酸(40∶60∶0.1)，其中每1000ml该溶液中加入十二烷基硫酸钠(SDS)4.0g；以盐酸萘甲唑啉为内标；检测波长为224nm；流速为1.0ml^.min^-1。结果：盐酸伪麻黄碱线性范围0.225～1.125mg^.ml^-1，平均回收率为100.23%，RSD＝0.69%(n＝7)；氢溴酸右美沙芬线性范围0.112～0.560mg^.ml^-1，平均回收率为99.81%，RSD=0.95%,(n=7)。结论：方法简便，结果准确。

Determination of pseudoephedrine hydrochloride and dextromethorphan hydrobromide in baijiahei by HPLC

Fan Biya (Fan BY),Zhang Yunyu (Zhang YY),(Jiangsu Qidong Gaitianli Pharmaceutical,Qidong226200)

　　ABSTRACT　OBJECTIVE:To develope a HPLC method for determination of pseudoephedrine hydrochloride and dextromethorphan hydrobromide in Baijiahei.METHODS:Chromatographic conditions included Nova-pak Phenyl column and the mobile phase consisting of a minxture of acetomitrile-water-phosphoric acid (40∶60∶0.1).There are four grams dodecylsulfate Na per litre of the mobile phase.Naphazoline hydrochloride was selected as the internal standard.Detection wavelength was at 224nm.The flow rate was 1ml^.min^-1.RESULTS:The standard curve of Pseudoephedrine hydrochloride was linear ever the range of 0.225～1.125mg^.ml^-1.The average recovery was 100.23% with RSD＝0.69%(n＝7).The standard curve of dextromethorphan hydrobromide was linear over the range of 0.112～0.560mg^.ml^-1.The average recovery was 99.81% with RSD＝0.95% (n＝7).CONCLUSION:This method was found to be simple and accurate.

　　KEY　WORDS　Baijiahei,HPLC,pseudoephedrine hydrochloride,dextromethorphan hydrobromide

　　白加黑主要成分为对乙酰氨基酚、盐酸伪麻黄碱、氢溴酸右美沙芬和盐酸苯海拉明。治疗由感冒引起的鼻塞、鼻粘膜充血、发热、咳嗽、头痛等症状。本实验采用HPLC测定其白片中盐酸伪麻黄碱和氢溴酸右美沙芬的含量，方法简便，结果准确。

1　仪器与试药

　　SP-8800泵，SP-100紫外检测器，SP积分仪，均为美国光谱物理公司产品。
盐酸伪麻黄碱对照品(新疆哈密制药厂，含量为100.06%)，氢溴酸右美沙芬对照品(瑞士Lonza公司，含量为100.12%)，盐酸萘甲唑啉内标(江苏金坛制药厂，含量99.97%)，白加黑(盖天力制药公司)。
十二烷基硫酸钠(SDS)，磷酸均为分析纯，乙腈为色谱纯，水为二次重蒸馏水。

2　色谱条件

　　色谱柱：苯基键合硅胶柱，Water 3.9mm×150mm；流动相:乙腈-水-磷酸(40∶60∶0.1)其中每1000ml该溶液中加SDS4.0g(微孔滤膜过滤，超声波脱气)；流速为1.0ml^.min^-1；检测波长为224nm；柱温为室温；注入量为10μl，记录纸速0.1cm^.min^-1。样品与对照图的色谱图见图1。

图1　样品色谱图
1-盐酸伪麻黄碱；2-盐酸萘甲唑啉(内标)；3-氢溴酸右美沙芬；4-对乙酰氨基酚

3　溶液的配制

3.1　标准贮备液的配制　分别精密称取经105℃干燥至恒重的盐酸伪麻黄碱0.45g，氢溴酸右美沙芬0.225g，置于100ml量瓶中，用水溶解并稀释至刻度摇匀，用微孔滤膜过滤，取滤液备用。

3.2　内标液的配制　精密称取盐酸萘甲唑啉0.045g，置100ml量瓶中，用水溶解稀释至刻度，摇匀，微孔滤膜滤过，取滤液备用。

3.3　校正因子对照品溶液的配制　精密吸取标准贮备液10ml与内标液2ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，备用。

4　结果与讨论

4.1　系统适应性试验^［1］　在上述色谱条件下，以盐酸萘甲唑啉为标准，按n=5.54(t_R/W_1/2)²计算色谱柱的理论塔板数为1.48×10⁴；按R＝2(t_R2-t_R1)/(W₁+W₂)计算分离度，盐酸伪麻黄碱，氢溴酸右美沙芬，盐酸萘甲唑啉以及对乙酰氨基酚均分别大于1.5。

4.2　标准曲线及线性试验^［2］　照校正因子测定法，在100ml量瓶中，加入2ml内标溶液，再分别加入标准贮备液5，10，15，20，25ml，加水稀释至刻度，摇匀，用已建立的色谱条件进样10μl，每个样品进样5次。以峰面积为纵坐标，以进样量为横坐标，作标准曲线，回归处理结果：盐酸伪麻黄碱进样量在2.25～11.25μg范围内，响应值与浓度成线性关系。方程为Y＝3.503×10³X+2.291×10³，γ＝0.9999；氢溴酸右美沙芬进样量在1.12～5.60μg范围内，响应值与浓度呈线性关系，方程为Y＝2.486×10⁵X+2.121×10³，γ＝0.99998。同理，以各组分与内标进样之比为横坐标，以峰面积之比为纵坐标，盐酸伪 麻黄碱标准曲线Y＝1.641×10^-3X+6.81×10^-3，γ＝0.9999；氢嗅酸右美沙芬标准曲线Y＝0.1094X+0.01038，γ＝0.9999。

4.3　制剂回收率试验　吸取备用校正因子对照品溶液10μl进样，计算校正因子。
取按处方量配制的空白片(取其赋形剂压成片)，置于研钵中研细，取1.5片量于100ml量瓶中，精密加入盐酸伪麻黄碱45mg，氢溴酸右美沙芬22.5mg，对乙酰氨基酚487.5mg，用水溶解，加内标溶液2ml,用水稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜过滤，取滤液10μl进样，按内标法计算。结果见表1。

表1　制剂回收率

5　讨　论

　　由样品色谱图可以看出，在本色谱条件下，对乙酰氨基酚也可感峰，且与其它各组分也能得到很好的分离，只是保留时间很短，且峰面积很大，在同一张色谱图上，若要兼顾其它各组分的图谱情况，有一定难度。在实际生产检验中，则是通过另外的色谱条件加以检测。

作者单位：樊碧亚　张蕴玉 (启东226200启东盖天力制药公司)

参考文献
[1]　中国药典1995年版.二部.1995：附录25.
[2]　郭平，项进.用HPLC测定复方感冒片中伪麻黄碱、扑热息痛、美沙芬和扑尔敏的含量.中国新药杂志，1995，4(2)：51.

(收稿：1997-12-05)