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摘要 目的：为红花药材的质量评价提供依据。方法：采用UV，HPLC分析不同产地红花的化学成分含量(黄色素、多糖、腺苷)。结果：不同产地红花黄色素含量在24.90%～40.34%的范围内，多糖含量在5.62%～10.22%的范围内，腺苷含量在38.7～392.7μg*g-1的范围内。结论：不同产地红花化学成分含量存在差异(P＜0.01)，巍山红花黄色素含量最高，新乡红花多糖含量最高；吉木萨尔红花腺苷含量最高。
Determination of safflower yellow,polysaccharide
and adenosine in Carthamus tinctorius by UV and HPLC Guo Meili (Guo ML),Fu Libo (Fu LB),Zhang Zhiyu (Zhang
ZY),et al (College of Pharmacy,Second Military Medical University,Shanghai
200433) ABSTRACT OBJECTIVE:To provide the
quatity basis for the crude drug of safflower.METHODS:Analysed the
contents of components of safflower crude drug from different sources by UV and
HPLC,respectively.RESULTS:The content of safflower yellow was 24.90%～40.34%
from different sources,the content of polysaccharide was 5.62%～10.22%,and the content of
adenosine was 38.7～392.7μg.g-1.CONCLUSION:The
contents of the components in Safflower varied significantly (P＜0.01) with the
sources.The content of safflower yellow was the highest in Weishan,the content of
polysaccharide was the highest in Xinxiang,and the content of adenosine was the highest in
Jimusaer.
KEY WORDS Safflower (Carthamus tinctorius L.)source safflower
yellow,Polysaccharide,Adenosine 红花(Carthamus tinctorius L.)为菊科植物红花的干燥花，在我国属单一栽培引进种，已有2100多年的栽培与用药历史［1］。据我们调查，新疆吉木萨尔、河南新乡、四川简阳、云南巍山是我国红花的四个主要产地。而红花中黄色素、多糖、腺苷是红花扩张血管、延长凝血时间、抑制血小板聚集的主要成分［2～4］。本研究采用UV，HPLC比较了上述4个产地红花的主要化学成分，旨在为红花药材的质量评价提供依据。 1 材料和方法
1.1 材料
原药材于1994年6～7月底分别采自新疆吉木萨尔、河南新乡、四川简阳、云南巍山红花的盛花期，农家称吉木萨尔无刺红花、河南无刺大红袍、简阳红花、巍山红花。经张芝玉研究员鉴定为Carthamus
tinctorius L.。
1.2 仪器和试剂
UV-256型紫外分光光度计(日本岛津)；Waters-486型高效液相色谱仪(美国Waters)。
黄色素对照品(日本和光纯药工业株式会社)；红花多糖(自提)；腺苷标准品(上海丽珠东风生物技术有限公司)；甲醇(AR)；无水葡萄糖(AR)；浓硫酸(AR)；红花多糖(自提)；5%苯酚溶液(苯酚经蒸馏后新鲜配制)；冰醋酸(AR)；乙腈(色谱纯)；重蒸馏水。
1.3 黄色素含量测定
1.3.1 样品处理 精密称取不同产地红花粉末各200mg，加50ml体积分数为70%的甲醇溶液浸泡过夜，滤过，残渣加20ml体积分数为70%的甲醇溶液浸泡2h，滤过。用体积分数为70%的甲醇溶液洗涤3次(每次5ml)，滤液合并，定容至100ml，得母液A。精密吸取10ml母液A，定容至100ml，用UV-265在403nm处测定吸光度。根据标准曲线计算百分含量。
1.3.2 标准曲线的制备 精密称取黄色素对照品103.8mg，置100ml量瓶中，加入体积分数为70%的甲醇溶液溶解至刻度，摇匀。从制成的溶液中精密吸取1.5，3,4.5,6，7.5,9,10.5ml分别至50ml量瓶中，分别加体积分数为70%的甲醇溶液至刻度，摇匀。在403nm处测定吸光度，以黄色素浓度为自变量，吸收值为因变量，求得回归方程：Y=-0.0020+0.0501X，r=0.9999。
1.3.3 回收率测定 精密吸取吉木萨尔红花母液10ml，加入黄色素标准液1ml，定容至100ml，测定吸收值，计算回收率为98.12%±0.73%(n=4,RSD=0.75%)
1.4 多糖含量测定
1.4.1 标准曲线制备 精密称取经80℃干燥至恒重的无水葡萄糖36.0mg，加水溶解，并稀释定容至100ml，精密吸取1.0,3.0,5.0,7.0,9.0,11.0,13.0ml分别置50ml量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度。各精密吸取2.0ml于具塞试管中，加入1.0ml苯酚溶液，再垂直加入5.0ml浓硫酸，静置5min，振摇，置沸水浴中保温15min，冷却，在490nm波长处测吸光度。以葡萄糖量为横坐标(X)，吸光度为纵坐标(Y)，得回归方程：Y=0.0472+0.06135X,r=0.9997。
1.4.2 换算因子测定 精密称取红花多糖10.00mg，溶解并稀释至100ml，摇匀，吸取2.0ml于具塞试管中，按标准曲线的制备方法进行操作，测吸光度，从回归方程中求出供试液中葡萄糖量后，并计算出换算因子为：2.309(n＝4,RSD=1.3%)。
1.4.3 样品测定 精密称取不同产地红花粉末100mg，于100ml平底烧瓶中，加入体积分数为80%的乙醇50ml，回流1h，趁热过滤，滤渣以体积分数为80%的乙醇洗涤3次，每次50ml。药渣置平底烧杯中，加蒸馏水50ml，回流1h，滤过，用蒸馏水洗涤3次，每次5ml，转移滤液于100ml量瓶中，冷却后定容。精密吸取2.0ml置具塞试管中，按标准曲线的制备方法进行操作，测吸光度，计算多糖含量。
1.4.4 回收率测定 精密称取吉木萨尔红花粉末100mg，加入20mg红花多糖，按样品测定方法进行操作，测定吸收度，计算回收率为：105.79%±2.87%(n=4,RSD=2.71%)。
1.5 腺苷含量测定
1.5.1 色谱条件 色谱柱为Sumlichuosorbrp-18(20cm×0.5cm)；检测波长254nm；流动相HAc-CH3CN-H2O=0.1∶6∶93.9；流速0.6ml.min-1；室温18℃。
1.5.2 标准曲线制备 精密称取腺苷标准品100.0mg，定容至100ml，得母液A，精密吸取母液A10ml，定容至100ml，得母液B；精密吸取母液B0.5,3.5,6.5,9.5,12.5,15.5ml，分别定容至50ml。用微量进样器分别吸取10μl进入HPLC色谱仪。以腺苷进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，得回归方程：Y=9882.3+4903570X,r=0.9997。
1.5.3 样品测定 精密称定红花样品约1g，加入20ml水，70℃保温2h，提取2次，合并滤液，定容至50ml。吸取10μl进样。根据标准曲线计算腺苷含量(μg.g-1)。
1.5.4 回收率测定 精密称定腺苷标准品9.1mg，70℃溶解，待冷，定容至25ml。吸取0.5ml，加入吉木萨尔红花经两次提取的水提液中，定容至50ml，吸取20μl，进入HPLC，测定峰面积，计算回收率为：90.57%±2.74%(n=3,RSD=3.02%)。 2 结 果
2.1 黄色素含量
不同产地红花黄色素含量存在差异(P＜0.01)，巍山红花高于其它产地红花(P＜0.01)，简阳红花高于吉木萨尔红花和新乡红花(P＜0.01)，吉木萨尔红花和新乡红花间无显著差异(P＞0.05)，结果见表1。 表1 不同产地红花化学成分的含量 |
