2,6-二氯嘌呤中杂质的LC-MS鉴定色谱论文 | 39康复网

2,6-二氯嘌呤的高效液相色谱分析及杂质的液质联用鉴定

2,6-二氯嘌呤中杂质的LC-MS鉴定

施超欧¹ 陶萍² 谢小波¹ 朱瑞瑞¹

1 华东理工大学分析测试中心上海 2002372 上海交通大学分析测试中心上海 200030

摘要： 采用液质联用(LC-MS)，鉴定了2,6-二氯嘌呤中的三个主要杂质，其中二个分别为2－氯－6－羟基嘌呤和6－氯嘌呤，另一种推测为一种未曾报道的新化合物，其可能的分子式为C₅HClN₄O₂。

关键词 液质联用 2,6-二氯嘌呤 2－氯－6－羟基嘌呤 6－氯嘌呤

1 前言

2，6－二氯嘌呤(化学文摘号:5451-40-1)现作为合成嘌呤类抗癌药物的一种原料,其有关2，6－二氯嘌呤中杂质的LC－MS分析未见报道。本文采用LC－MS确定了2，6－二氯嘌呤中主要杂质的化学结构，并推测了一新化合物的化学结构。

2 实验部分

2.1 仪器和试剂

仪器 HP1100 LC/MSD 液质联用仪 APCI质谱检测器。

试剂甲醇 HPLC级；醋酸铵为分析纯；

标准品2,6-二氯嘌呤实验室精制(>99.5％)。

2.2 色谱条件

色谱柱 diamonsil C18 150*4.6mm，5μm

流动相 A：甲醇 HPLC级

B：0.1％(W/V)NH4Ac

A：B＝50：50

流速 0.8ml/min

锥孔电压 50v

离子化方式 [M+H]⁺

3 结果与讨论

将批号990301的一次精制品进行LC－MS分析，其检测波长254nm、277nm及总离子流图见图1，主要组分的质谱图见图2，其紫外吸收谱图见图3。

从总离子流图看，2,6-二氯嘌呤出二个峰表明，说明其存在异构现象。质谱图显示，除主峰外，主要三个杂质分子都含有一个氯，分子量为偶数，因此含偶数个氮，其分子的基本母体应为嘌呤环结构。根据反应路线及机理，杂质鉴定的结构见表1。保留时间表1 LC－MS 的鉴定结果

Table 1 The results of identification by LC－MS

保留时间(min)	分子量	含氯个数	鉴定的化合物	分子式
2.4	170	1	2-氯-6-羟基嘌呤	C₅H₃ClN₄O
3.3	154	1	6-氯嘌呤	C₅H₃ClN₄
5.6	188	2	2,6-二氯嘌呤	C₅H₂Cl₂N₄
6.3	184	1		C₅HClN₄O₂

6.3分钟的杂质，应其紫外吸收特别强，推测其分子形成结构稳定的大π共轭体系；分子式C₅HClN₄O₂（MW＝184），经CA检索，未发现其化学检索号，因此推测此化合物应为一种未曾报道的新化合物，其化学结构可能如下：

图5 杂质(保留时间6.3min)可能的结构

Fig5 The probably structure of impurity (retention time 6.3min)

Identification of impurity in 2,6-Dichloropurine by LC-MS

Shi chaoou¹, Tao ping² Xie xiaobo¹ Zhu ruirui¹

1 Center of Analysis and Research

East China University of Science and Technology Shanghai 200237

2 Center of Analysis and Research Shanghai Jiaotong University Shanghai 200030

Abstract A LC-MS method has been developed for identification of impurities in 2,6-dichloropurine.The result indicated that the impurities were 2-chloro-6-hydroxylpurine, 6-chloropuine and an unreported new compound which the most probable chemical formulae is C₅HClN₄O₂.

Keywords LC－MS 2,6-dichloropurine 2-chloro-6-hydroxylpurine 6-chloropuine

作者：施超欧，陶萍，谢小波，朱瑞瑞 2007-5-18