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摘要：目的：建立利胆溶石软胶囊的含量测定方法。方法：采用GC法检测利胆溶石软胶中薄荷脑的含量，FID检测器，程序升温，内标法计算。结果：利胆溶石软胶囊中薄荷脑与其它成分分离良好，薄荷脑浓度在0．302～4．858mg／mL范围之间呈良好的线性关系；平均加样回收率101．2％ ，RSD分别为2．3％ 。结论：本法操作简便，重现性好，可作为利胆溶石软胶囊的质量控制指标。
关键词：利胆溶石软胶囊 薄荷脑 GC法
利胆溶石软胶囊由金钱草、香茅油、薄荷油等药味组成，具有清热利湿、利胆排石之功效，临床用于胆道结石、胆道感染等病症。其中薄荷脑为方中有效成分之一，具芳香化湿的功效，考虑其具有易挥散的物理特性，将薄荷脑定为本制剂含量测定的指标成分。应用GC法，使用毛细管色谱柱测定制剂中薄荷脑的含量，方法灵敏、快速、可靠。
1 实验材料
1．1 仪器与试剂：Agilen公司气相色谱仪GC6890(美国)；微量进样器(上海医用光学仪器厂)。
1．2 对照品：薄荷脑(中国药品生物制品检定所含量测定用，批号为728—200005)；其它试剂均为分析纯。
1．3 样品：利胆溶石软胶囊，由江苏康缘药业股份有限公司研制与生产。
2 方法与结果
2．1 色谱条件色谱柱：5％二苯基-95％二甲基硅烷共聚物为固定相(30m×0．32mm×0．25μm)；进样口温度：240℃；检测器温度(m )：240℃ ；柱温：起始80℃(维持2min)，8℃／min升至170℃(维持3min)；载气：N2载气流速1．5ml／min；进样量：1 ；分流比：50：1。
2．2 标准曲线的制备
2．2．1 内标溶液的制备：取正十五烷适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每lml含2．5mg的溶液，作为内标溶液。
2．2．2 对照品溶液的制备：取薄荷脑对照品适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每lml含6mg的溶液，作为对照品溶液。
2．3 系统适用性实验：按本法测定，理论塔板数以薄荷脑计应不低于25000。
2．4 线性关系考察：精密量取对照品溶液0．5，1，2，4，8mL，分别置l0ml量瓶中，再分别精密加入内标溶液2ml，加醋酸乙酯至刻度，摇匀，分别取1μL注入气相色谱仪，测定。以薄荷脑峰面积与内标峰面积之比(Y)对浓度(C)进行回归计算，结果表明薄荷脑在0．302mg／mL～4．858mg／mL范围内线性良好，回归方程：Y=1．6475X一0．0061，R=0．9999(n=5)。见表1。
2．5 空白对照试验：精密量取缺薄荷油的阴性样品，依法测定，结果在薄荷脑峰处无杂质峰出现，表明空白对照试验无干扰。
2．6 稳定性试验：取样品40mg，精密称定，置10ml容量瓶中，精密加入内标溶液2ml，再加醋乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，取1μL注入气相色谱仪，测定。考察供试品溶液48小时内的稳定性。结果表明供试品溶液在48小时内稳定，见表2。
2．7 精密度试验配制薄荷脑对照品溶液，取1μL注入气相色谱仪，测定。连续进样5次，考察精密度，结果见表3。
2．8 重现性试验：对同一批号样品，依法测定5次，结果见表4。
2．9 加样回收率试验：取薄荷脑对照品适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每lml含薄荷脑6mg的溶液，作为对照品溶液。分别取已知含量的样品6份，精密称定，置lOml量瓶中，加入内标溶液2ml，再分别精密加入薄荷脑对照品溶液1，1，2，2，3，3ml，加醋酸乙酯至刻度，摇匀，分别取1 注入气相色谱仪，测定。计算回收率，结果见表5。
2．10 样品测定：取本品50mg，精密称定，至l0ml量瓶中，精密加入内标溶液2ml，加醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，吸取1μL，注入气相色谱仪测定含量，结果见表6。
表6 样品中薄荷脑含量测定
批号 含量(nlg，粒)
0l0806
0l09l9
0l092l
86．9
87．2
86．6
3 讨论
本品内容物主要为挥发油，易溶于醋酸乙酯，所以采用醋酸乙酯作溶媒直接溶解样品的方法制备供试品溶液。
由于样品中组分较多，摸索了以下几种程序升温条件：(1)起始70℃(维持2min)，3℃／min升至170℃(维持3min)；(2)起始80℃(维持lmin)，5℃／min升至ll0℃(维持lmin)，20℃／min升至180℃；(3)起始80℃(维持2min)，5℃／min升至170℃(维持3min)；(4)起始80℃(维持2min)，8℃／min升至170℃(维持3min)；(5)起始80℃ (维持2min)，10℃／min升至170℃(维持3min)等。
实验结果表明：在起始80℃(维持2min)，8℃／min升至170℃(维持3min)的程序升温条件下，色谱峰的分离度、拖尾因子均符合规定。理论塔板数以薄荷脑计应不低于25000。
4 参考文献
1 国家药典委员会．中国药典2000年版一部．北京：化学工业出版社，2000：310
2 王宝琴，主编．中成药质量标准与标准物质研究．北京：中国医药科技出版社，2000：608
3 肖崇厚，主编．中药化学．上海：上海科学技术出版社，1997：50l