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【摘要】目的调查新疆各地鲜蒜中蒜氨酸含量，评价鲜蒜品质，判断药用大蒜来源。方法对地区多点采样，以微波方式灭酶并采用高效液相色谱内标法进行鲜蒜中蒜氨酸含量测定。结果新疆各地大蒜中蒜氨酸含量范围从0.657%～2.474%。结论新疆大蒜蒜氨酸含量普遍较高，差异较大。
【关键词】 新疆鲜蒜 蒜氨酸
Abstract:ObjectiveTo investigate the alliin content from fresh garlic in Xinjiang and to evaluate the quality of fresh garlic so as to estimate the source of garlic for pharmaceutical application. MethodsTo collect samples from various spots in different areas. After an disposal of microwave for allinase deactivation，alliin in fresh garlic was determined by HPLC with internal standard substance. ResultsThe content range of alliin was 0.657%～2.474%. ConclusionThe contents of alliin in garlic of Xinjiang are universally high, but the differences are relatively remarkable.
Key words:HPLC with internal standard ； Alliin
百合科葱属植物大蒜Allium Sativum Linn为多年生草本植物。大蒜作为药用植物，除抗菌、消炎外，尤其对于几种癌症和心脏血管失调具有特殊预防和治疗作用［1］。中医典藉(唐)《新修本草》、(元)《食物本草》、(明)《本草纲目》等记载，大蒜原名“葫”及“胡蒜”，汉朝时由张骞传入内地。经考证，大蒜的原产地在中亚，包括我国新疆［2，3］。由于气候适宜、光照充分、无工业污染等原因，其医药功效成分含量高， 被国际市场称为“高蒜氨酸大蒜”而成为大宗出口商品。对大蒜及其制品的研究十几年来成为国际研究的热点［4］。对新疆各地大蒜中蒜氨酸含量进行调查，有助于判断优质药用大蒜原料来源。
大蒜对健康有益的功效成分是含硫化合物，特别是蒜氨酸(alliin)和蒜酶(alliinase)的反应产物——蒜辣素(allicin) ［5］。蒜氨酸和蒜酶处于细胞的不同结构部位，蒜氨酸以稳定、无臭的形式在细胞质中，而蒜酶存在于液泡中。当挤压和破碎大蒜鳞茎，细胞被破坏时，蒜酶从隔间释放，便同蒜氨酸接触，发生蒜氨酸的酶解反应，使蒜氨酸转化为有特殊气味的蒜辣素，它非常不稳定，迅速降解为相关的有机硫化物，如（聚）硫化物、乙烯基二硫化物或蒜烯［6］，因此测定其含量条件要求较高，误差较大［7～9］。
有关大蒜品质的评价现在大多由活性成分蒜辣素的前体物质——蒜氨酸含量作为指标，本文报道的方法不需衍生化，采用HPLC内标法定量，操作简单， 较黄雪松［10］、常军民等［11］采用的外标法结果更准确。调查结果发现，各地蒜氨酸含量普遍较高，均远远高于《美国药典》0.5%的标准，新疆地域宽广，具有生态多样性，环境差异很大，即使同一地区生长大蒜的蒜氨酸含量也存在明显差异，大蒜品质主要受生境、气候、土壤及水肥的影响较大。
1 材料与试药
1.1 原料
产自新疆各地大蒜，200511～200607采集。
1.2 仪器
美国Agilent 1100高效液相色谱仪，HP 化学工作站，上海安亭TDL408低速大容量离心机，北京天鹏超声波提取器，德国SartoriusBP211D十万分之一电子天平，广东顺德惠而浦微波炉，上海安亭TGL16G高速台式离心机等。
1.3 试药
蒜氨酸对照品为自制（纯度95%），利巴韦林（常州第三制药厂20050923），液相用甲醇为色谱纯，水经重蒸。
2 方法与结果
2.1 样品的处理
精密称取新鲜去皮大蒜10.0 g，中高火微波（2 450 MHz）1 min，加水30 ml，打浆，将样品糊转移至离心管中，超声10 min后离心（4 000 r/min，10 min），上清液转移至100 ml容量瓶中。沉淀加水30 ml，摇匀，再次超声、离心2次，上清液合并至上述100 ml容量瓶中，用水定容至刻度，成储备液。
2.2 供试液的配制
分别精密量取上述储备液2.0 ml置于25 ml容量瓶中，加入2.0 ml内标液（利巴韦林，0.376 5 mg/ml），水稀释并定容至刻度。
2.3 色谱条件
DIKMA DiamonsilTMC185 μm(250 mm×4.6 mm)；柱温：25℃； 流动相：水100%；检测波长：220 nm； 流速：0.8 ml/min；进样量：20 μl。甲醇为色谱纯,水为高纯水。
2.4 测定方法
精密称取蒜氨酸对照品约20 mg，置50 ml容量瓶中，用水定容刻度。精密量取此液0.5，2.5，5.0，7.5，10.0，12.5 ml分别置于25 ml容量瓶中，各加入2.0 ml利巴韦林内标液（0.376 5 mg/ml），水定容至刻度。在波长220 nm处用测定，校正因子f =内标峰面积（A内）×蒜氨酸对照品的浓度（C对）/ 蒜氨酸对照品峰面积（A对）=0.209 3，RSD=3.8%（n=6），日内精密度为0.6% (n=5)。日间精密度为RSD=1.3% (n=5)。
2.5 回收率实验
精密称取蒜氨酸对照品置于50ml容量瓶中，水稀释至刻度，摇匀得对照品溶液。精密吸取大蒜提取液1.0 ml置于25 ml容量瓶中，按高、中、低3个浓度分别加入对照品溶液2.0，3.0，4.0 ml，用流动相稀释至刻度，得供试品溶液。每个浓度做3份平行样，测得回收率为98.80%，RSD=2.0%（n=9）。
2.6 样品测定
结果见表1及图1。表1 新疆不同产地及制品中蒜氨酸含量测定（略）
3 讨论
3.1 对多地区多点采集的样品调查结果发现，药用大蒜并不局限于新疆任何特定的生长地区，新疆各地蒜氨酸含量普遍较高，均远远高于美国药典标准0.5%的2倍以上；按地区县市划分的每组样品都来源于一个很广泛的生态学环境。尤其是伊犁州巩留县、昌吉州奇台县、和田地区和田县、阿克苏地区沙雅县和库车县、巴音郭楞州和硕县收集的数个样品，其蒜氨酸含量达到美国药典标准的的4～5倍。
3.2 新疆大蒜产地集中在伊犁和昌吉地区，尤其吉木萨尔县白皮大蒜2004年被国家农业部命名为“中国白皮大蒜之乡”，种植基地也已通过了无公害认证。年大蒜种植面积3万亩，年产量在3万吨左右。独特的山区逆温带气候，使该县大蒜蒜头大、皮薄、瓣匀、质地紧密、耐贮易运。但含量测试结果表明，虽然蒜氨酸含量较均一，其药用价值未见特殊优势，提示该地区应重视高含量蒜氨酸品系的选育，考虑GAP规范种植技术。
3.3 研究结果在新疆可以生产高品质大蒜。新疆生长的大蒜有一种固有的优点，光照充足，气候凉爽，因为气候条件会限制大蒜的农学和药学特性。大蒜样品中蒜氨酸含量差异除了品种因素外，农事参数是引起植物药水平变异的主要原因，这与Mayeux等［12］分析一致。种植药用大蒜时对生境、土壤及水肥等的种种影响因素进行优化很重要，因此，使大蒜标准化种植势在必行。
【参考文献】
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［3］Kambiz Baghalian，Seyed Ali Ziai，Mohammad Reza Naghavi，et al. Evaluation of allicin content and botanical traits in Iranian garlic (Allium sativum L.) ecotypes［J］.Scientia Horticulturae 2005 (103)：155.
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［10］黄雪松，温丽儿，宴日安. 反相高压液相色谱法测定鲜蒜中的蒜氨酸［J］.食品与发酵工业，2005(5)：106.
［11］常军民，张丽静，美丽万，等.HPLC测定大蒜中蒜氨酸的含量［J］.中成药，2004，26(12)：1025
［12］Mayeux, P.R.，Agrawal, K.C.，Tou, J.S.H.，et al. The pharmacological effects of allicin, a constituent of garlic oil［J］.Agents Actions 1998(25)：182.