正交试验优选舒冠胶囊提取工艺中药制剂 | 39康复网

摘要：采用薄层扫描、高效液相色谱法分析，应用正交试验优选舒冠胶囊提取工艺。结果发现，最佳提取工艺为药材加6倍量70%乙醇，回流提取3次，3 h/次。
关键词：薄层扫描；　高效液相色谱；　川芎；　黄芪；　阿魏酸；　黄芪甲甙；　正交试验
中图分类号：R284.2　　文献标识码：A　　文章编号：1008-0805(2000)10-0883-01Orthogonal Optimization of Extracting Technology for Shuguan CapsulesZHOU Qin-wen, SUN Xiao-fang
(Tongrentang Chinese Medicine Factory, Nanjing 210012, China)TLCS and HPLC methods are used in orthogonal optimization of Shuguan Capsules extraction. The results show that the best condition is adding 6 times of 70% alcohol, reflux-extracting for 3 times and 3 hours per pass.
Key words:TLCS;　HPLC;　Rhizoma Chuanxiong;　Radix Astragali;　Ferulic acid;　Astragaloside I;　Orthogonal design2　实验方法
2.1　正交试验设计：根据预试验，川芎、黄芪等系醇回流方法提取，考虑到醇回流工艺与醇浓度，加醇数量，提取时间，提取次数等因素有关，设计了四因素三水平正交试验(表1，表2)。

Abstract:

　　舒冠胶囊由川芎等数味中药组成，具有益气活血，行气止痛功效，临床用于治疗冠心病，心绞痛等疾病，疗效显著。根据预试验，方中川芎、黄芪采用醇回流提取，本文用正交试验法优选醇回流的工艺参数。
1　仪器与试药
　　Waters 996型高效液相色谱仪；510泵，996型二级管阵列检测器；Millennium 2010色谱管理系统；岛津Cs-9000型双波长薄层扫描仪。
　　对照品：黄芪甲甙、阿魏酸，由中国药品生物制品检定所提供；试剂均为分析纯。

表1　因素水平表

水平	乙醇浓度A(%)	加乙醇B倍数	时间C/h	提取次数D
1	50	4	1	1
2	70	6	2	2
3	90	8	3	3

2.2　样品制备：根据处方量取药材，分别按表2所列相应条件提取制备样品溶液，并浓缩至每1 ml相当于生药1.0 g，备用。
2.3　样品测定
2.3.1　黄芪甲甙的含量测定：精密吸取样品溶液20 ml，挥去乙醇，加水溶解，用水饱和的正丁醇萃取，合并正丁醇液，以3倍量按试液洗涤，回收正丁醇，残渣加甲醇2 ml溶解，作为供试品溶液。取黄芪甲甙对照品，加甲醇配制成每1 ml含1 mg的对照品溶液，分别精密吸取对照品4.8 μl与供试品4 μl，点于硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水(65∶35∶10)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，加热至颜色清晰，覆盖一同样大小玻璃板，以λ_S=510 nm，λ_R=610 nm扫描，计算含量，结果列于表2。
2.3.2　阿魏酸的测定：参照文献^［1］测定，结果列于表2。
2.3.3　川芎中荧光成分的测定：取川芎对照药材0.5 g，用乙醇回流提取定容至5 ml，精密吸取正交试验样品溶液与川芎药材液各1 μl，点样于硅胶G板上，以正己烷-醋酸乙酯(4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365 nm)下检视(图1)，以λ_S=335 nm，λ_R=200 nm扫描，计算荧光斑点面积，结果列于表2。

表2　正交试验优选工艺条件

序号		因素				川芎荧光成分面积 A/×10⁴mm²	阿魏酸 C/μg*ml^-1	黄芪甲甙含量(%)
序号		A	B	C	D	川芎荧光成分面积 A/×10⁴mm²	阿魏酸 C/μg*ml^-1	黄芪甲甙含量(%)
1		1	1	1	1	1.60	105	1.49
2		1	2	2	2	3.25	140	3.20
3		1	3	3	3	3.48	154	3.83
4		2	1	2	3	3.06	181	4.46
5		2	2	3	1	2.71	165	3.52
6		2	3	1	2	3.78	179	3.19
7		3	1	3	2	3.91	182	4.12
8		3	2	1	3	4.08	139	4.68
9		3	3	2	1	2.42	123	3.96
川芎荧光成分	K₁	8.33	9.47	9.46	6.73
	K₂	10.45	10.04	9.63	10.94
	K₃	10.41	9.68	10.12	11.52
	R_X3	2.12	0.57	0.64	4.79
阿魏酸	K₁	399	468	423	393
	K₂	525	444	444	501
	K₃	444	456	501	474
	R_X3	126	24	88	108
黄芪甲甙	K₁	8.52	10.07	9.36	8.97
	K₂	11.17	11.40	11.62	10.35
	K₃	12.76	10.98	11.47	12.97
	R_X3	4.24	1.33	2.26	4.00

2.4　正交试验结果直观分析：试验结果表明：影响川芎荧光成分的因素为D＞A＞C＞B；最佳组合为A₂B₂C₃D₃。影响阿魏酸的因素为A＞D＞C＞B；最佳组合为A₂B₁C₃D₂，影响黄芪甲甙的因素为A＞D＞C＞B，最佳组合为A₃B₂C₂D₃。以上分析表明，A和D为主要因素，B和C为次要因素。
2.5　正交试验结果的综合分析：根据直观分析结果，A和D为主要因素，B和C为次要因素，但就不同成分而言，最佳组合不一样，分别将川芎荧光成分面积、阿魏酸含量、黄芪甲甙最大值量化为100，其它以此折算计分，合并综合评价，结果列于表3。

表3　正交试验结果综合分析

序号	因素				川芎荧光成分	阿魏酸	黄芪甲甙	综合分
序号	A	B	C	D	川芎荧光成分	阿魏酸	黄芪甲甙	综合分
1					39.2	57.7	31.8	128.7
2					79.6	76.9	68.4	224.9
3					85.2	84.6	81.9	251.7
4					97.0	99.4	95.2	291.6
5					66.4	90.6	75.1	232.1
6					92.6	98.3	68.1	259.0
7					95.8	100.0	88.0	283.8
8					100.0	76.3	100.0	276.3
9					59.3	67.5	84.7	211.5
K₁	605.3	704.1	664.0	572.3
K₂	782.7	733.3	728.0	767.7	∑　Y=2 159.6
K₃	771.6	722.2	767.6	819.6
R_X3	177.4	29.2	103.6	247.3

　　综合分析结果表明，影响因素为D＞A＞C＞B，最佳组合为A₂B₂C₃D₃。
2.6　正交试验综合结果的方差分析：以S最小者作为误差(S_c)，计算F。计算结果列于表4。

表4　方差分析表

方差来源	偏差平方和	自由度	均方	F_ee	显著性
A	6 583.3	2	3 291.6	45.46	*
C	1 821.9	2	910.9	12.58
D	11 336.9	2	5 668.4	78.29	*
误差	144.8	2	72.4

　*表示显著性，F_0.05(2，2)=19.00，F_0.01(2，2)=99.00

　　根据方差分析，A因素和D因素有显著影响。
3　结论与讨论
　　结合各项指标，提取工艺选择为药材加6倍量70%乙醇回流提取3次，3 h/次。

图1 川芎薄层
1-9号为正交试验样口 ,0号为川芎对照药材

作者简介：周勤文(1966-)，男(汉族)，南京人，现任南京同仁堂制药厂工程师，学士学位，从事中成药技术、质量及工艺的研究.

周勤文（南京同仁堂制药厂　210012）
孙晓芳（南京同仁堂制药厂　210012）

参考文献：

［1］　贾晓斌，施亚芳，黄一平，等.当归和川芎中阿魏酸高效液相色谱测定方法的改进［J］.中成药，1998，20(6)∶37.

收稿日期：2000-04-10；　修订日期：2000-05-22

作者：周勤文孙晓芳 2007-5-18

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