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近年来,exosome这种小囊泡正得到广泛的关注。exosome天然存在于体液中,且携带了一些重要的信号分子,有望在多种疾病的早期诊断中发挥作用,这使得exosome的市场也在快速扩展。最近,GEN发布了有关exosome市场的分析报告,对其现状和前景做了分析。这份报告由生物技术分析师Enal Razvi撰写。
exosome是直径约为30-150 nm的小囊泡,在30年前被人们所发现。早期的研究认为,exosome执行蛋白运输功能,特异靶定受体细胞,交换蛋白和脂类或引发下游信号事件。直到2007年,研究人员发现exosome也运输核酸,参与细胞间通讯。至此,这种小囊泡才被人重视,并成为热门的研究对象。
exosome天然存在于所有体液中,包括血液、唾液、尿液和母乳,且其蛋白、RNA和脂肪成分特异,因此,exosome有望在多种疾病的早期诊断中发挥作用。今年8月,美国NIH为24个细胞外(exRNA)通讯方面的研究项目提供1700万美元的资助,主要关注exRNA作为潜在的生物标志物和疗法的临床实用性。
具体来说,exosome的研究方式是分离/捕获小囊泡,并拷问它所携带的货物。就目前而言,人们多采用超速离心、磁珠免疫捕获、沉淀或过滤的方法,对exosome进行前期的分离。之后利用电镜来分析其大小和形态,利用流式细胞仪来分析细胞表面标记,通过Western blot和ELISA等方法对蛋白进行分析,或通过qPCR和新一代测序(NGS)来分析RNA。
调查发现,在分离exosome时,约有56%的人采用超速离心法,说明这种方法仍是目前的金标准方法。不过,生物通之前也介绍过,这种方法缺点也不少:耗时耗力,往往需要8-30个小时;每次最多只能处理6个样品;需要大量的起始材料;产量不高。商业化的exosome提取试剂盒已经上市,更为简单省事。
在下游分析方面,36%的研究人员通过Western blot或其他方法来鉴定蛋白,29%的人员利用qPCR对microRNA表达谱进行分析,9%利用芯片进行microRNA表达谱分析。同时,新一代测序的用户也不少,13%的人员利用NGS开展microRNA/小RNA研究,9% 开展mRNA研究。
此外,目前的大部分工作还是停留在科研阶段,后续的生物标志物开发和验证不多,而诊断和疗法的开发就更少。
Razvi认为,exosome的定性和定量研究是个快速发展的市场。同时,循环生物标志物的市场也存在着机遇和挑战。不过,无创产前检测技术的成功让人们相信,循环生物标志物有望在肿瘤及其他疾病的诊断上发挥作用。(生物通 薄荷)