抗类风湿性关节炎54 kD和36 kD自身抗体在类风湿性关节炎诊断中的意义

抗类风湿性关节炎54 kD和36 kD自身抗体在类风湿性关节炎诊断中的意义

中国免疫学杂志 1999年第4期第15卷 临床免疫学

作者：周嘉陵　钟丽民　许　荣　朱　琦　雷　鸣

单位：上海市光华中西医结合医院，上海200052

关键词：自身抗体；类风湿性关节炎；免疫印迹法

　　中国图书分类号　R593.22

　　摘　要　目的：研究类风湿性关节炎(RA)中抗类风湿性关节炎54 kD和36 kD自身抗体(抗RA54和抗RA36)的情况。方法：应用免疫印迹技术(IBT)，在过筛和检测盐水可提取核抗原(ENA)的自身抗体谱过程中，发现不仅可检测到抗RA54，还可检测到抗RA36自身抗体，并对169例各种不同风湿性疾病患者测定ENA。结果：抗RA54和抗RA36自身抗体均仅见于类风湿性关节炎(RA)组(n=80)，阳性率分别为15.00%和6.25%。结论：抗RA54和抗RA36对RA的诊断有高度特异性，P＜0.005和P＜0.01。

A study of anti-RA54 and anti-RA36 autoantibodies in the diagnosis of rheumatoid arthritis

ZHOU Jia-Ling,ZHONG Li-Min,XU Rong et al. Shanghai Guanghua Hospital,Shanghai 200052

　　Abstract Objective:To study anti-RA54 and anti-RA36 autoantibodies in rheumatoid arthritis(RA).Methods:In the process of screening and detecting profiles of autoantibodies against lineage of extraetable nuclear antigen(ENA).Observed that not only anti-RA54 but also anti-RA36 autoantibodies could be detected by immunoblotting(IBT).The samples from 169 patients of variant rheumatism were detected by IBT.Results:Both anti-RA54 and anti-RA36 autoantibodies were found only in RA patients. The positive rate for anti-RA54 and anti-RA36 in RA group (n=80) were 15.00% and 6.25% respectively.Conclusion:The two autoantibodies appear to be highly specific for RA (P＜0.005 and P＜0.01).

　　Key words Autoantibody Rheumatoid arthritis Immunoblotting

　　近年来在类风湿性关节炎(RA)的自身抗体研究中， 许以华和周志杰等分别报道了抗类风湿关节炎54 kD(抗RA54)和36 kD(抗RA36)自身抗体对RA 的诊断有一定的特异性，由于在抗原来源与抽提方法上存在差别， 文献中尚无同时过筛和检测这两种自身抗体的报道^［1，2］。本文在应用免疫印迹技术(IBT)过筛和检测盐水可提取核抗原(ENA)的自身抗体谱过程中，同时发现抗 RA54 和抗RA36自身抗体，因而对这两种抗体在RA诊断上的意义作了进一步的研究^［3］。

　　1　对象与方法

　　1.1　受检对象　各种风湿性疾病169例，由我院类风湿性关节炎专科按国际公认标准诊断，其中包括RA 80例、系统性红斑狼疮(SLE)25例、混合性结缔组织病(MCTD)9例、干燥综合征(SS)15例、强直性脊柱炎(AS)20例、骨关节炎(OA)20例，对照组为30

　　作者简介：周嘉陵，女，56岁，副主任医师，主要从事类风湿性关节炎和强直性脊柱炎的临床研究

　　例均做过IBT、RF、X光检测，并在病史中无自身免疫性疾病及关节炎症状的健康人。

　　1.2　检测方法　患者血清均随机收集，保存于-20℃。ENA自身抗体谱的检测采用华南理工大学万学生物技术公司提供的ENA试验盒，该试验盒以兔胸腺丙酮粉的盐水提取物为抗原，由于在抗原抽提、蛋白质分离及电转移印迹等技术上已作了进一步的改进， 因此不仅可检测抗SM、抗U1RNP、抗SS-A、抗SS-B、抗核糖体核糖核蛋白(抗r-RNP)、抗Scl-70及抗JO-1 等自身抗体，还可识别并检测抗RA54、抗RA36、抗DE自身抗体。

　　按检测操作说明进行：(1)待测血清与印迹在硝酸纤维膜上的蛋白质抗原反应；(2)辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG抗体识别结合在抗原上的IgG 并与之反应；(3)底物显色使硝酸纤维膜上结合自身抗体的部位显色区带。

　　1.3　阳性参考血清　抗RA54、抗RA36和抗DE阳性参考血清取自RA和MCTD患者，由许以华医师提供^［4］。

　　2　结果

　　在各种风湿病中应用免疫印迹法测定ENA自身抗体，不仅可检测到抗RA54抗体，还可测得抗RA36抗体，这二种抗体仅见于RA组，阳性率分别为15.00％(12/80)和6.25％(5/80)，对RA的诊断有高度特异性，χ²分别为16.44和5.29，P＜0.005和P＜0.01，见表1。具有上述两种抗体中的任何一种的阳性率为18.75％(15/80)。

表1　各种风湿病中ENA自身抗体检测情况

　　Tab.1　The positivities for ENA autoantibodies were detected by immunoblotting in patients with various kinds of rheumatic disease

Group	No.of patients	Anti 52 kD	Anti RA		Anti U1RNP	Anti SM	Anti r-RNP	Anti SS 　　A and B
			54 kD	36 kD
R A	80	13	12	5	0	0	0	1
SLE	25	6	0	0	4	8	2	1
MCTD	9	2	0	0	8	0	0	0
S S	15	2	0	0	0	0	0	7
O A	20	1	0	0	0	0	0	0
A S	20	1	0	0	0	0	0	0
Normal control	30	2	0	0	0	0	0	0

　　3　讨论

　　近年来应用IBT能检测自身抗体谱，主要包括抗SM、抗U1RNP、抗SS-A、抗SS-B、抗r-RNP、抗Scl-70及抗JO-1这7种特异性自身抗体，有助于提高对SLE、MCTD、SS、系统性硬皮病(PSS)及多发性肌炎或皮肌炎(PM/DM) 等疾病的诊断与鉴别诊断，本文的结果表明在169例风湿病患者中抗RA54和抗RA36自身抗体仅见于RA组，阳性率为15.00％和6.25％，对RA的诊断具有高度特异性(P＜0.01)， 因此提高试剂盒质量后，应用IBT测定的ENA抗体谱中增加2种自身抗体，有助于RA 的诊断和鉴别诊断。

　　本文RA患者中虽然只有2例同时存在抗RA54和抗RA36抗体，但该2例发病过程相似，均儿童时起病，并从下肢开始逐步发展到上肢，多关节累及，均诊断为幼年性RA(多关节型)，到成人时，均有明显关节破坏，因此进一步研究抗 RA54和抗RA36阳性患者的临床特点有助于RA中不同临床亚型的研究。

　　本文9例MCTD患者中有1例抗DE自身抗体阳性，由于试剂盒质量提高后，该患者血清与抗DE阳性参考血清识别的不仅是ENA中13.4 kD和11.5 kD 蛋白多肽，而是一组蛋白质，其分子量分别为28.5、20.0、18.5、13.4和11.5 kD，在硝酸纤维膜上形成一种显色区带分布较为特殊的类型，非常容易识别，因此将该抗体命名为抗DE抗体，因不能反映该抗体的作用和抗原分子特征，征求许以华医师的意见， 认为该抗体首先从姓刘的MCTD患者血清中发现，按国际自身抗体命名原则， 将该抗体命名为抗Liu抗体更为妥当。

　　4　参考文献

　　[1]　许以华，周嘉陵，顾越英 et al.抗RA54 kD自身抗体的识别及其临床意义.标记免疫分析与临床，1995;2(4):197

　　[2]　周志杰,蒋　明,宋琴芳 et al.抗类风湿关节炎36 kD和33 kD 抗体对类风湿关节炎诊断意义的研究.中华内科杂志，1994;33(4):251

　　[3]　许以华,顾越英,叶　萍 et al.可提取核抗原多肽抗体谱的测定方法及临床意义.中华医学杂志,1992;72(9):541

　　[4]　许以华,顾越英,杨虎天 et al.抗DE多肽抗体在混合性结缔组织病上的意义.中华内科杂志，1995;33(8):525

〔收稿1998-04-12　修回1998-07-16〕