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老龄男性血浆性激素与T淋巴细胞功能的关系
免疫学杂志 1999年第1期第0卷 临床免疫学
作者：刘睿智1 李晓萌1 杨广民2 李 杨1 赵雪俭1 张 羽3 陈善明3 全邦兴3
单位：刘睿智 李晓萌 李 杨 赵雪俭 白求恩医科大学生殖病理生理研究室 长春130021； 杨广民 吉林省检验中心 长春 130021； 张 羽 陈善明 全邦兴 中国第一汽车厂职工医院 长春 130011
关键词：老龄男性人群 雌二醇 睾酮 丝裂原反应性 白细胞介素2
摘 要 为探讨老年男性人群血浆雌二醇及睾酮含量与T淋巴细胞功能的相关性，以50岁以上男性为研究对象，应用放射免疫法和生物测定法分别检测了血浆睾酮、雌二醇含量和T淋巴细胞功能。①随增龄血浆雌二醇（E2）含量明显升高，睾酮（T）含量显著降低，二者呈明显的负相关关系，E2／T比值随增龄明显增大；②外周血淋巴细胞丝裂原反应性和血浆IL-2活性随增龄而下降；③E2／T比值与外周血淋巴细胞丝裂原反应性和血浆IL-2活性均呈明显的负相关关系（r＝－0．3017，P＜0．0001；r＝－0．1478，P＜0．01）。E2／T比值失衡可能是老龄男性人群T淋巴细胞功能下降的原因之一。
中图号 R392.6
RELATIONSHIP BETWEEN SEXUAL HORMONE AND FUNCTIONS OF PERIPHERAL T LYMPHOCYTE IN AGED MAN
Liu Ruizhi，Li Xiaomeng，Yang Guangmin，Li Yang，Zhao Xuejian，Zhang Yu，Chen Shanming，
Quan Bangxing
（Departement of Pathophysiology，Norman Bethune University of Medical Sciences，Changchun 130021）
Abstract In order to investigate the relationship between cell immunologic function and hormonal levels of elderly，we studied the mitogenesis of peripheral T lymphocyte and IL-2 activities using bioassay technique，and plasma testosterone（T） and estradiol（E2） levels using radio immunoassay techniques．The results showed：（1）Plasma testosterone levels decreased and plasma estradiol levels increased with aging，presenting remarkable negative correlation between contents of testosterone and estradiol（r＝－0．1974， P＜0．0001）；（2）Mitogenesis of peripheral T lymphocyte and IL-2 activities decreased with aging．（3）Mitogenesis of T lymphocyte and IL-2 activities presented negative correlation certain correlation with E2／T（r＝－0．3017，P＜0．0001；r＝－0．1478，P＜0．01）．These results indicated that alteration of T lymphocyte function in aged men might be correlated with alteration of in vivo testosterone and corticosteroid level，and might supply experimental basis for further study of mechanism of decreased immunologic function in aged men．
Key words Aged man，Mitogenesis，Testosterone，Estradiol，Interleukin-2
机体伴随老化常涉及机体的机能、代谢、形态结构等各个方面的变化，其中神经内分泌、免疫系统的变化最为明显。研究表明，老化过程细胞免疫功能下降，性腺功能降低［1，2］。性激素对机体免疫功能的影响已引起关注，文献报道，雌激素在体内抑制T细胞的活性［3］，而睾酮对免疫功能有保护作用［4］。但迄今为止，对于衰老过程中，性激素与T淋巴细胞免疫功能相关性的研究未见报道。本文检测了老龄男性血浆雌二醇和睾酮及其外周血淋巴细胞丝裂原反应性和血浆IL-2活性，探讨其随龄变化及其相关性，为老化机理的研究提供试验依据。
1 材料与方法
1.1 研究对象 620例离退休及在职男性职工为研究对象，20～39岁组为101人 ，40～49岁组为16人，50～59岁组为218人，60～69岁组为222人，70岁以上有63人。受检者均经详细问诊，排除严重内科疾病和内分泌系统疾病患者，且受检前一个月未接受过激素类药物治疗。
1.2 主要试剂 IMDM培养基为美国Gibco公司产品；小牛血清由大连生物制品研究所提供；PHA为上海医学化验所产品；3H-TdR购自中国科学院上海原子核研究所。
1.3 主要方法
1.3.1 静脉血制备：采静脉血5ml，肝素抗凝，无菌分离血浆，－30°C冻存待检测。
1.3.2 血浆睾酮和雌二醇含量测定：应用北京北方生物技术研究所放免试剂盒提供的方法测定，参照标准曲线，分别计算睾酮和雌二醇含量，结果均以平行双管的均值表示。
1.3.3 外周血淋巴细胞丝裂原反应性和IL-2活性测定：采用微量全血培养法［5］测定。每份样本3复孔，淋巴细胞增殖反应性用淋巴细胞转化刺激指数（SI）表示：SI＝（实验孔cpm－对照孔 cpm）／对照孔cmp。采用淋巴母细胞化法［6］测定。每份样品3复孔，以每分钟脉冲数（cpm）表示，结果均以3复孔cpm的平均值表示。
1.3.4 资料统计分析：实验数据均以平均值±标准差（
2 结果
2.1 血浆睾酮、雌二醇含量 如表1，血浆睾酮含量随增龄下降，年轻对照组血浆睾酮含量为8.67±3．25nmol／L，40岁以上各组与之比较均明显降低。相关检验表明，血浆睾酮含量与年龄间呈极为显著的负相关关系（r＝－0．45，P＜0．0001）；而血浆雌二醇含量，40岁组增高最为明显，其他各组与年轻 对照组相比也有不同程度的增高。但是，在50岁以上人群中均波动于同一水平。对于雌二醇／睾酮（E2／T）比值，40岁以上各组与年轻对照组比较均有明显增高（P＜0.001）。相关检验表明，血浆睾酮和雌二醇含量呈明显的负相关关系（r＝－0．1974，P＜0.0001），见图1。
2.2 外周血淋巴细胞丝裂原反应性和血浆IL-2活性 表2所示，20～39岁组外周血丝裂原反应性（用刺激指数表示）为27．19±7．72，40岁以上各组与之
表1 血浆睾酮、雌二醇含量的组间比较
Tab 1 Content of testosterone，estrogen and E2／T in plasma among different groups（
| Gruop | n | T
（nmol／L） |
E2
（nmol／L） |
E2／T |
| 20～39a | 92 | 8.67±3.25 | 55.45±35.31 | 29.93±36.93 |
| 40～49a | 15 | 4.64±3.84** | 221.20±414.43* | 72.40±36.68** |
| 50～59a | 228 | 5.07±4.60** | 126.08±166.45＃ | 70.15±87.55** |
| 60～69a | 232 | 4.52±3.28** | 115.77±210.75* | 89.10±90.66** |
| ＞70a | 64 | 3.11±2.34** | 100.93±133.65* | 122.20±101.14** |
*P＜0．05，**P＜0．001，＃P＜0．005，Compare with ＜40a group
图1 睾酮和雌二醇含量的相关关系
Fig 1 Correlation between concentration of testosterone and estradiol in healthy older men
表2 T淋巴细胞丝裂原反应性和IL-2活性的组间比较
Tab 2 The mitogenesis of peripheral T lymphocyte and interlukin-2 activities among different groups（
| Group | SI（n） | IL-2（cpm）（n） |
| 20～39 | 27．19±7．72（101） | 5439．52±2043．40（89） |
| 40～49a | 17．97±7．07（16）** | 3293．00±2246．20（4）* |
| 50～59a | 18．40±6．73（218）** | 2848．55±1443．70（115）** |
| 60～69a | 16．75±7．46（222）** | 2681．48±1397．10（143）** |
| ＞70a | 9．48±4．50（63）** | 2027．04±1473．10（24）** |
*P＜0.05， **P＜0.001，Compare with＜40 a group
比较均明显降低。IL-2活性：20～39岁组中，IL-2活性为5439.52±2043.40cpm，其他各组与之比较均明显降低，分别有统计学意义。
2.3 雌二醇／睾酮比值与T淋巴细胞丝裂原反应性和IL-2活性的相关检验 以雌二醇／睾酮比值为自变量，以T淋巴细胞丝裂原反应性和IL-2活性为因变量，分别作直线相关分析，二者均明显的负相关关系（r＝－0．3017，P＜0．0001；r＝－0．1478，P＜0．01），如图2，图3。
图2 E2／T与T淋巴细胞丝裂原反应性的相关关系
Fig 2 Correlation between E2／T and mitogenesis of peripheral T lymphocyte in healthy odler men
图3 E2／T与IL-2活性的相关关系
Fig 3 Correlation between E2／T and IL-2 activities in healthy older men
6 讨论
本实验结果表明，50岁以上老龄男性人群，随年龄增长，血浆睾酮水平进行性下降，血浆雌二醇含量随增龄而增加，E2／T比值失衡，可见随增龄老年男性征明显衰退，机体老化。
研究表明［7］，老年雄鼠LHRH感受器数目显著减少，垂体缺乏对下丘脑促性腺激素释放激素的充分应答及Leydig细胞对LH反应性下降，从而抑制睾酮生物合成过程。老龄鼠Leydig细胞平均体积减小，单个细胞产生睾酮量下降，也证实了这一推断。与睾酮变化相反，本研究发现随增龄血浆E2含量升高，可能是由于外周芳香化作用增强，使得肾上腺来源的雄激素转化为雌激素，最终E2／T比值失衡。老年男性人群E2／T比值升高的原因，可能与睾酮向雌二醇的外周转化率增加，睾酮的睾丸内生成率减少而代谢清除率增加有关。结果表明：血浆睾酮和雌二醇含量呈明显的负相关关系，但是否与雌二醇对睾酮分泌的反馈调节作用有关，尚有待作进一步的研究。
随年龄增长，机体在结构与功能上出现了退化过程。如胸腺萎缩、胸腺细胞数逐渐减少等。研究表明［8］ ，老龄鼠T细胞表面标志的密度降低，T细胞数目减少，T淋巴细胞分泌的IL-2随增龄减少［9］。本实验在男性40岁以上的人群中研究发现，ConA诱导的外周血T淋巴细胞增殖反应性和IL-2活性随增龄明显降低。这进一步证明，老化过程T细胞功能确有明显下降。为探讨老化过程中T细胞免疫功能变化与性激素含量变化的关系，以雌二醇／睾酮比值为自变量，以T淋巴细胞丝裂原反应性和IL-2活性为因变量，分别作直线相关分析，二者均呈明显的负相关关系。
研究表明［10］ ，睾酮可促进T细胞杂交瘤细胞株IL-2，3，5mRNA表达，可提高IL-2介导的CD4＋细胞功能，并使CD4＋／CD8＋比值增高，认为睾酮对T淋巴细胞功能是上调节作用。雌二醇可通过抑制巨噬细胞（Mφ）产生白细胞介素-1和淋巴细胞表面IL-2受体的表达，及改变OKT4／OKT8比值等途径使体内T淋巴细胞的活性下降［3］。提示老化过程中细胞免疫功能低下至少可以部分归因于老化过程中性腺功能的异常。睾酮和雌二醇对免疫系统发挥的调节作用机制还不清楚。目前认为胸腺内和外周血单个核细胞上均有睾酮和雌二醇受体，睾酮和雌二醇通过其受体而发挥调节作用［11］。
综上所述，增龄有明显的负向免疫状态，且这种免疫状态与性腺轴功能受抑有关。
第一作者：女，33岁，博士
参考文献
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（1998-03-11收稿；1998-09-23修回）