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胸腺因子D对白血病IL-6和TNF的调控作用
免疫学杂志 1999年第3期第15卷 临床免疫学
作者：陈紫榕 刘小朋 张国安 温云海 施水兰 彭小斌 魏国志
单位：空军福州肝病研究所 福州350002
关键词：胸腺因子D 白细胞介素6 肿瘤坏死因子 白血病
摘 要 探讨胸腺因子D（TFD）对白血病患者白介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子（TNF）的调控作用，以便在白血病治疗中正确使用TFD。在白血病化疗同时，加用TFD 50mg＋10％葡萄糖注射液500ml，VD，qd×3mon，检测治疗前后IL-6活性和TNF水平。结果：急性淋巴细胞性白血病（ALL）和急性非淋巴细胞白血病（ANLL）的IL-6和TNF均比正常对照组高（P＜0．01）。化疗加用TFD治疗后，ALL的IL-6和TNF及ANLL的TNF均比治疗前和化疗组显著降低。TFD加化疗药物联合应用，可能是白血病的有效治疗方法。
中图号 R967，R557
THYMIC FACTOR D REGUALTES THE IL-6 AND TNF IN
ACUTE LEUKEMIA
Chen Zirong， Liu Xiaopeng， Zhang Guoan， Wen Yunhai，Shi Shuilan，Peng Xiaobin，Wei Guozhi
（Institute of Hepatology， Air Force Fuzhou Hospital， PLA， Fuzhou 350002）
Abstract To explore the regulatory effects of thymic factor D（TFD） on the interleukin 6（IL-6） and tumour necrosis factor （TNF）． IL-6 and TNF level was determined in 42 patients with various type of acute leukemia． When TFD 50mg＋10％ glucose solution 500ml， iv．gtt， gd×3mo． to combine with chemotherapy treatment， compared with chemotherapy alone． In comparison with normal subjects， IL-6 activity and TNF level were significantly elevated in patients with acute lymphocytes leukemia（ALL） and non-acute lymphocytes leukemia（NALL） （P＜0．01）． IL-6 activity and TNF level in ALL and TNF in NALL were significantly decreased with TFD combined treatment compared with chemotherapy alone．These suggest that TFD combined with chemotherapy treatment can be favored of acute leukemia．
Keywords Thymic factor D， Tumour necrosis factor， Interleukin-6， Leukemia
胸腺激素对造血细胞的调控作用日益受到重视。胸腺因子D（TFD）是一种富含胸腺激素多种成份的生物反应调节剂，临床上已广泛用于治疗白血病［1］。有研究表明肿瘤坏死因子（TNF）和白介素-6（IL-6）对急性白血病细胞生长有调节作用，既可表现为生长抑制或杀伤，又可促进其生长、增殖［2］。胸腺激素与白介素同为胸腺上皮细胞产生，与TNF一起共同调节T细胞生长［3］。白血病治疗过程中如何合理应用胸腺激素以辅佐化疗药物发挥最大作用是人们关心的问题。因为它不仅涉及对胸腺激素作用的评价，更关系到白血病治疗方案的选择。因此，确切地分析研究胸腺因子D与化疗药物联合诱导白血病细胞死亡的关系，对设计白血病治疗方案具有重要意义。鉴于此，我们在验证大剂量胸腺因子D静脉滴注联合化疗药物治疗白血病的同时，研究了胸腺因子D对急性白血病TNF和IL-6的调控作用，为临床正确使用TFD提供依据。
1 材料和方法
1.1 对象 未经治疗的急性淋巴细胞白血病（ALL）26例，急性非淋巴细胞白血病（ANLL）16例，均经骨髓形态学确诊（按白血病国内诊断标准）。正常对照组32例，均为本院中心血库供血员。空腹静脉采血，分离血清，置－20°C备用。
1.2 治疗方法 试验组23例，其中ALL 14例，ANLL 9例；在化疗同时用胸腺因子D注射液50mg加入10％葡萄糖注射液50ml中，静脉滴注，每日一次，连续3个月。对照组19例，其中ALL 12例，ANLL 7例，化疗方法同试验组，但不加胸腺因子D。
1.3 IL-6活性检测 采用改良的IL-6依赖细胞株B增殖反应的MTT检测法。步骤如下：样品和基因重组IL-6（日本大阪大学工学部提供）倍比稀释，每个样品3个复孔，每孔50μl，加洗过的B细胞（由荷兰医学工程院提供）悬液3×105／ml，每孔50μl，并设对照。置37°C 5％CO2培养48h，取出，每孔加5mg／ml的MTT 10μl，于振荡器上振荡1min，置37°C5％ CO2温育4h，取出反应物，每孔加100μl 50％ SDS-50％二甲基甲酰胺振荡溶解后，在酶联仪上测OD值，与IL-6标准品比较后得出IL-6活性。
1.4 TNF含量测定 放射免疫法。TNF测定盒购自上海长征医学科学有限公司，按说明书操作。
2 结果
如表1所示，急性淋巴细胞性白血病和急性非淋巴细胞白血病的IL-6和TNF均比正常对照组高（P＜0．01）。TFD治疗后，ALL组的IL-6和TNF以及ANLL组的TNF均比治疗前和化疗组有显著意义降低（P＜0．05）。
表1 化疗／TFD治疗对IL-6和TNF影响
Tab 1 Influence of chemical treatment／TFD on IL-6 and TNF
| Group | Cases | IL-6（U／ml） | TNF（μg／L） | |||
| Before | After | Before | After | |||
| Chemical treat- | ALL | 14 | 59．5±24．9a | 41．3±21．6bc | 2．7±2．1a | 0．5±0．3bc |
| ment＋TFD | ANLL | 9 | 52．1±22．3a | 46．5±22．9 | 3．7±2．8a | 0．6±0．3bc |
| Chemical | ALL | 12 | 58．3±21．2a | 59．4±18．1 | 2．9±1．9a | 2．1±1．6 |
| treatment | ANLL | 7 | 55．2±20．3a | 52．9±19．8 | 3．7±2．3a | 3．0±2．1 |
| Control | 32 | 26．1±4．8 | 0．2±0．1 | |||
aCompare with control P＜0．01； bCompare with before treatment P＜0．05； cCompare with chemical treatment P＜0．05
3 讨论
IL-6和TNF是重要的造血调控因子，参与并维护造血干细胞的正常生长。近年研究表明：IL-6和TNF对某些白细胞也有着明显的生长调节作用。急性白血病细胞均可自发分泌IL-6和TNF［4］。本组检测ALL和ANLL患者的IL-6和TNF均比正常对照组明显升高，也说明急性白血病患者有这两种因子自分泌的可能。其意义可能与肿瘤细胞过度增殖有关［4］。因此，设法控制其自分泌，抑制其对白血病细胞的过度增殖，在白血病治疗上是一值得探讨的问题。
胸腺表皮细胞层一方面产生胸腺细胞，另一方面又产生白介素1（IL-1）和IL-2，后两种IL混合物又成为调节T细胞生长的信使［3］。胸腺因子D（TFD）是由猪胸腺提取的生物反应调节剂，富含多种胸腺激素成份［1］，可促使活化的细胞表面表达IL-2受体，促进激活的淋巴细胞自分泌更多的内源性IL-2［5］，明显降低老化的IL-6诱生水平［6］，调节TNF的分泌和释放，减轻TNF过量产生造成的损害［7］。本组急性白血病患者，在化疗同时，加用大剂量胸腺因子D静滴3个月后，ALL患者的IL-6活性和TNF水平以及ANLL的TNF均有显著意义下降，与上述观点一致。化疗药物与降低细胞因子水平或活性的药物联合应用，有可能成为一种有效的白血病治疗方法［8，9］。TFD能降低急性白血病患者的IL-6活性和TNF水平，除ANLL的IL-6活性无显著差异外（可能与例数少有关），其余均有显著性降低。这提示，胸腺因子D加化疗药物联合应用，可能是白血病的有效治疗方法。但因本组病例数尚少，需进一步研究。
第一作者：男，61岁，大学，教授，主任医师
参考文献
1 周金黄，陈紫榕，刑善田.胸腺激素（胸腺因子D）的免疫调节作用与临床应用.见：周金黄，主编.中药免疫药理学.北京：人民军医出版社，1994，206
2 罗云萍，黄宗干.IL-6和TNF对白血病细胞的调控作用及意义.上海免疫学杂志，1996，16：169
3 陈紫榕，陈 菁，刘小朋.胸腺因子D的理化性质、药理作用与临床应用.见：周金黄，荣康泰，李晓玉，主编.免疫药理学进展：基础与临床.北京：中国科技出版社，1993.228
4 罗云萍，黄宗干，钱惠君，等.急性白血病患者IL-6和TNF水平改变及意义.中华内科杂志，1993，32（2）：85
5 张国安，刘小朋，陈紫榕.胸腺因子D对LAK细胞活性诱导的影响.中华微生物学和免疫学杂志，1994，14：172
6 张国安，刘小朋，陈紫榕，等.胸腺因子D对健康老年人IL-6诱生水平的影响.中国人兽共患病杂志，1996，12（3）：103
7 陈紫榕，刘小朋，张国安，等.乙型肝炎、肝癌患者中肿瘤坏死因子的检测.上海免疫学杂志，1994，14：98
8 李小宁，李崇渔，邹 萍，等.粒一巨噬细胞集落刺激因子对Vp16诱导白血病细胞凋亡的调控作用.中华血液学杂志，1997，18：299
9 Sachs L， Lotem J． Control of programmed cell death in normal and leukemic cell new implications for therapy． Blood， 1993，82：15
（1998-11-24收稿；1999-04-01修回）