点击显示 收起
细菌防护液对60Co γ射线照射小鼠免疫功能的影响
免疫学杂志 2000年第5期第16卷 短篇报道
作者：徐书显 张凤云 王常有 王忠海 赵进沛 赵娟
单位：徐书显（北京军区联勤部军事医学研究所，河北 石家庄 050081）；张凤云（河北医科大学生物学教研室，河北 石家庄 050017）；王常有（北京军区联勤部军事医学研究所，河北 石家庄 050081）；王忠海（河北医科大学生物学教研室，河北 石家庄 050017）；赵进沛（北京军区联勤部军事医学研究所，河北 石家庄 050081）；赵娟（河北医科大学生物学教研室，河北 石家庄 050017）
关键词：细菌防护液；γ-射线照射；免疫功能
［中图分类号］ R392.11 ［文献标识码］ B
［文章编号］1000-8861（2000）05-0396-01
Effect of bacterial protective liquid on immune function in 60Co γ-ray irradiated mice
免疫系统对电离辐射高度敏感，经中等以上剂量的全身照射，可抑制机体的免疫功能，诱发和加重急性放射损伤引起的感染。如何进行防护，已日益受到各界的普遍重视［1，2］。我们研制的细菌防护液（简称BPL）就是其中的一种，初步证明：它能延长小鼠的存活率，对肠道正常菌群有保护作用［3］。该项研究主要是采用流式细胞术（FCM）观察对受照小鼠免疫功能表达的影响。
1 材料和方法
1．1 BPL的制备 在普通培养基中加入0.1％的稀土半胱氨酸化合物，再接种一定量的蕈状芽胞杆菌，经37 °C培养，菌量达到1×108／ml的浓度，备用。
1．2 动物 昆明种小鼠，体重20±1．5 g，雌性，由河北省实验动物中心提供，达一级实验动物卫生标准。
1．3 分组及给药方式 随机分为正常对照组、单纯照射对照组，实验组（BPL＋照射），每组6只。采取灌胃法，两个对照组分别给0.5 ml的生理盐水，实验组给0.5 ml的BPL，每天1次，照射前后各服药8 d。
1．4 照射条件 60Co γ射线照射，剂量率为0.794 Gy／min，总剂量3．5 Gy，全身一次性照射。
1．5 骨髓和脾脏细胞的制备 将小鼠断颈处死。先剥取双侧股骨，冲出全部骨髓细胞滴入含肝素（1 000 u／ml）的PBS液中，总量2．0 ml，再用PBS液离心、洗涤；然后取出脾脏，放入平皿中，加入少量PBS液用剪刀将组织剪至匀浆状，再加入10 ml的PBS，取匀浆通过100目网过滤，洗涤3次，去除细胞碎片。再通过300目网过滤，去除细胞团块。最后将上述骨髓和脾脏细胞以70％乙醇固定，即可进行免疫荧光染色，见文献［4］。
1．6 流式细胞仪检测方法［4］ 应用FACS-420型流式细胞仪（美国BD公司）进行检测，数据和图像输入HP-300 Consort 30计算机，应用相应的程序软件分别进行资料处理。测定前以鸡红细胞作为标准样品调整仪器的变异系数（CV）在5％以内，确保仪器的精度。上机后每份标本检测10 000个细胞，所得数据采用t检验进行统计学处理。
2 结果
2.1 BPL对脾脏细胞中NK、CD4＋和CD8＋表达量的影响 单纯照射组中NK，CD4＋和CD8＋的表达量分别是4．13±0.29，4．49±0.51，4．61±0.38，明显低于正常对照组（P＜0.001），而BPL实验组能显著的提高NK和CD4＋的表达量（P＜0.05）。另外，实验组中CD4＋／CD8＋的比值也有所增大，这表明免疫活性增强，但差异不显著。
2.2 BPL对骨髓细胞中NK、CD4＋和CD8＋表达的影响 单纯照射组中NK、CD4＋和CD8＋的表达量分别是4.24±0.07，4.40±0.18，4．20±0.10，明显低于正常对照组（P＜0.01），而BPL实验组能显著的提高它们的表达量（P＜0.01）。
3 讨论
骨髓和脾脏是放射敏感性较高的器官之一。它们含有一定数量的T淋巴细胞和NK细胞，这些细胞在体内主要承担细胞免疫功能，同时协助和参与机体的体液免疫及免疫调节。在抗感染，抗肿瘤，抗辐射和抗衰老等生命过程中发挥着十分重要的作用。据文献报道，机体经中等以上剂量全身照射，可引起免疫功能抑制。本项实验采用目前较先进的FCM技术，对小鼠的脾脏和骨髓中的NK细胞和CD4＋及CD8＋T细胞的表达量进行了测定。结果显示：射线对测定的细胞参数有明显的抑制作用。而BPL能提高它们的表达量。从而提高了机体免疫能力和增强了免疫调节功能。本结果初步显示：BPL对辐射小鼠的免疫功能有一定的保护作用，但对人体的免疫功能是否有保护作用有待研究。
［作者简介］ 徐书显（1954－），男，河北河间县人，副研究员，大学，主要从事生物医学防护方面的研究。
［参考文献］
［1］ 江幼岷．辐射防护剂研究的进展及现状［J］．中华放射医学与防护杂志，1995，15（3）：197－198．
［2］ 徐书显，时华富，张凤云．中药防治放射损伤的动物实验研究［J］．河北中西医结合杂志，1998，7（1）：9－10.
［3］ 徐书显，张凤云，时华富，等．蕈状芽胞杆菌的特性及在辐射防护中的应用［J］．中国微生态学杂志，1998，10（3）：155－156．
［4］ 左连富．流式细胞术与生物学［M］．沈阳：辽宁科学技术出版社，1996.68－248．
［收稿日期］ 1999-12-29； ［修回日期］ 2000-03-21