中药复方对脑源性神经营养因子的影响

  脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)是神经营养因子(neurotrophic factors，NTFs)家族成员之一，由Brade等于1982年从猪脑分离出来的一种碱性蛋白质。BDNF是在脑内合成的一种蛋白质，它广泛分布于中枢神经系统，对神经元的存活、分化、生长发育起着重要作用，并能防止神经元受损后死亡、改善神经元的病理状态、促进受损伤神经元再生及分化等生物效应；也是成熟的中枢及周围神经系统的神经元维持生存及正常生理功能所必需。中药复方是中药用药的主要形式。它基于辩证的思想观点，按照君臣佐使的组方原则，选择恰当的药物定量配伍而成，是中医辨证论治理论的的具体体现。虽然复方理论上可以从不同层面分解为明确的组成部分，即单味药及其化学成分，但复方却不是这些组成部分的机械组合，而是一个复杂的有机体系，中药复方在成分与药效上都不等于单味药的机械总和  。目前中药复方对BDNF影响的研究主要集中在以下几个方面。
    对抗抑郁症
    抑郁症是一种长期慢性疾病，是精神科常见的疾病之一。是一种常见的、以持久的心境低落状态为特征的心境障碍，常伴有焦虑、躯体不适感和睡眠障碍。该病具有发病率高、复发率高、自杀率高等特点，逐渐引起了人们的关注。中医古代文献中虽然没有抑郁症之病名，但对其的认识有着悠久的历史，在中医文献中的多种病名，如“郁证”、“百合病”、“脏躁”、“梅核气”、“癫病”、“卑牒”、“奔豚”、“失志”、“脱营失精”等都与其相关。中医对抑郁症的认识亦在不断地发展，下文就中药复方对抑郁症的研究情况进行综述。半夏厚朴汤(半夏、厚朴、茯苓、生姜、苏叶)出于张仲景的《金匮要略》，是治疗痰气郁结型郁证(梅核气)的经典名方，临床上常用以治疗抑郁症等精神性疾病，相关研究在探讨半夏厚朴汤抗抑郁作用的机理时发现半夏厚朴汤能够明显促进BDNF阳性细胞的表达，说明半夏厚朴汤的抗抑郁作用可能与增加BDNF表达有关，从而促进神经元存活  。张伟骏   等研究活血祛瘀解郁法对卒中后抑郁症(Post-stroke depression，PSD)大鼠海马基因的BDNF表达情况，表明中药活血祛瘀解郁方(半夏、胆南星、石菖蒲、远志、丹参、川芎、赤芍、郁金)治疗PSD能增强BDNF的表达，进一步保护受损的5-羟色胺(5-hydroxytryptamine，5一HT)、去甲肾上腺素(norepinephrine，NE)等神经元，促进神经元的再生，增加递质浓度，改善其活性，促进功能恢复，从而达到改善神经损伤和抗抑郁的作用。严余明  观察加味甘麦大枣汤(小麦、甘草、大枣、石菖蒲、姜半夏、郁金、远志)对抑郁症大鼠海马区BDNF表达的影响时，发现加味甘麦大枣汤具有较好的治疗抑郁症的作用，其作用机理可能与通过增加BDNF表达有关。相关研究提示解忧方(柴胡、郁金、白芍、百合等)可能通过上调慢性应激抑郁模型大鼠海马BDNF及酪氨酸激酶B(tropomysin receptor kinase B，TrkB)的表达，促进5一HT、NE能神经元修复及生长，逐步产生临床抗抑郁作用   。相关研究在探讨枳菊解郁汤(勾藤、菊花、胆星、石菖蒲、郁金、夜交藤、炒枣仁、柏仁、枳实)对慢性应激抑郁模型小鼠的影响时发现，枳菊解郁汤能明显改善海马各区及前脑皮层BDNF的表达，说明枳菊解郁汤具有一定的抗抑郁作用，其机制可能是通过上调BDNF的表达，影响海马及前脑皮层神经细胞再生及突出可塑性，保护慢性应激引起的海马和前脑皮层神经元的损伤 。周志华  等观察柴郁温胆汤(柴胡、郁金、半夏、陈皮、竹茹、枳实、人参、茯苓、炙甘草、生姜、大枣)及其不同配伍组合对抑郁模型大鼠海马环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP-responseelementbinding protein，CREB)和BDNF表达的影响，研究表明，柴郁温胆汤能够明显上抑郁大鼠海马CREB和BDNF表达，与四环类抗抑郁剂马普替林作用相类似，提示该方抗抑郁机理之一可能是参与了细胞信号通路的调节，起作用的主要是化痰组药物，其次是养心脾药物，调气血组药物作用不明显，但3组配伍合用后的全方作用最显著，表明中药复方配伍具有多途径、多靶点的整体调节优势，也提示化痰中药在抑郁症治疗中具有重要意义。此外，复方组能够改善抑郁模型大鼠大便颗粒数的改变，一定程度显示了柴郁温胆汤抗抑郁的优越性，即改善抑郁症患者便秘的并发症。黄泉智  等观察舒郁宁心汤(柴胡、郁金、栀子、茯神、酸枣仁 等)对慢性应激抑郁模型大鼠海马区BDNF和TrkB表达的影响，提示舒郁宁心汤可能是通过提高海马组织BDNF和TrkB的表达来发挥治疗抑郁症的作用。田旭升   等观察酸枣仁汤(酸枣 仁、川芎、茯苓、知母、甘草)对抑郁模型大鼠海马BDNF和TrkB表达的影响，表明酸枣仁汤高剂量组可能是提高了海马的BDNF及其特异性受体TrKB的表达，促进神经元的生存，从而达到抗抑郁的作用。
    治疗血管性痴呆
    血管性痴呆(vascular dementia，VD)是脑血管疾病导致的认知功能障碍临床综合征，是我国主要的致残疾病之一，发病率为1．0％一8．8％，每年有(1～3)／1000人发病  。VD是目前老年期痴呆中可预防和有希望治疗的痴呆之一．随着人口的老龄化，VD发病渐有上升趋势，这不仅严重影响患者的生存质量，也给病员家庭、社会及国家增添了沉重的负担。中医对VD早有认识，它属于中医的“呆病”范畴，其病位在脑，涉及心脾肝 肾，基本病机是虚痰瘀毒交织痼结。即病位在脑，肾虚为本；血阻脑络，血瘀为标；肾虚血瘀，互为因果  。中医从脏腑虚衰、肾心亏虚为本，痰浊血瘀为标的病因病机人手，采用补肾益心、健脾益气、祛痰活血通络等方药治疗VD。郑里翔  等探讨补骨脂汤(人参、补骨脂、益智仁、苁蓉、熟地、远志、大枣、当归、丹参等)改善血管痴呆大鼠学习记忆的作用靶点，该研究表明补骨脂汤可能通过提高BDNF／TrkB、生长相关蛋白-43(growth associ．ated protein-43，GAP-43)基因的表达水平，改善和治疗血管性痴呆者学习记忆能力。相关研究在探讨补肾强肝活血法治则指导下研制的脑力苏胶囊(人参、熟地、枸杞、灵芝、川芎、胆南星、冰片、陈皮、三七粉等)对血管性痴呆小鼠BD—NF表达的影响时，表明脑力苏胶囊在血管性痴呆神经再生过程，可能通过促进BDNF的分泌达到神经再生的作用，其中以脑力苏胶囊低剂量组作用明显，初步证实补肾强肝活血法可明显提高VD小鼠颅内BDNF的表达   。李子清  等研究四物汤(川芎、熟地、白芍、当归)对血管性痴呆大鼠脑组织中BDNF和表皮生长因子(epidermal growth fac．tor，EGF)表达的影响，发现四物汤能提高血管性痴呆鼠的学习记忆能力，使血管性痴呆大鼠脑组织中EGF和BDNF的表达升高，可能是其治疗作用的分子机制之一。
    提高学习记忆能力
    学习记忆是指人或者动物通过神经系统接受外界环境信息，并将所获取的信息在脑内储存再现的神经活动过程，这一过程的实现离不开中枢神经系统及一些神经递质参与。神经营养因子是脑内神经元赖以存活的重要因素，与学习记忆能力有密切的关系。BDNF参与短时和长时记忆过程，在长时程增强(10ng-term potentiation，LTP)的诱导和维持以及海马依赖性学习中起关键作用  ，而且BDNF基因启动子的组蛋白修饰与恐惧记忆的消退密切相关  。学习记忆减退属于中医“健忘”、”善忘”范畴，病位在脑。魏海峰  等研究安神补脑液(何首乌、淫羊藿、鹿茸等)对睡眠剥夺大鼠的学习记忆能力影响，并从BDNF角度探讨
其机理。安神补脑液能提高睡眠剥夺鼠的学习记忆能力，其机理之一可能与提高海马BDNF含量有关。睡眠剥夺能造成加重脑损伤、学习记忆能力减退以及BDNF表达的减少，而相关研究表明疏肝补肾法(疏肝补肾治疗组采用四逆散和生慧汤的1：1合方。四逆散：由柴胡、枳实、赤芍、炙甘草组成；生慧汤：由熟地黄、远志、山茱萸、柏子仁、石菖蒲、炒枣仁、茯苓、红参、白芥组成)能改善学习记忆和脑损伤，可能是通过上调BDNF蛋白的表达以及相关通路蛋白所致  。老年大鼠的学习记忆功能退化，与学习记忆忆相关的基因BDNF及其受体TrkB表达异常有关，相关研究在探讨左归丸(熟地、山药、枸杞、山茱萸、菟丝子、鹿角胶、龟胶等)、右归丸(熟地、制附子、肉桂、山药、山茱萸、菟丝子、枸杞、鹿角胶、杜仲、当归等)对衰老大鼠海马学习记忆相关基因BDNF mRNA及其受体TrkB表达的影响时，发现滋补肾阴方药左归丸、温补肾阳方药右归丸能通过提高BDNF、TrkB基因的表达，进而改善老年大鼠的学习记忆功能，延缓机体衰老   。
    改善脑缺血症状
    缺血性脑血管病严重威胁人类健康，其病死率和致残率较高，给社会和家庭带来沉重的负担。缺血损伤的神经元死亡方式，不仅仅是坏死，还存在凋亡。BDNF属碱性蛋白质，唯一不断在中枢神经系统和周围神经组织中表达，能促进神经元生存、延缓变性的自然死亡，参与脑缺血损伤的保护过程  。中医学对脑缺血辨证清楚，认为脑缺血的发生主要与风、火、痰、瘀、虚等因素有关。中医学认为“肾主骨生髓，通于脑”，补肾法、补肾中药对于改善中枢神经系统的功能将具有明显优势，为此相关研究采用中医药联合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells．BM．SCs)移植治疗脑缺血损伤，结果表明不同补肾法方药(左归丸’、右归丸、地黄饮子)血清孵育BMSCs均可促进脑缺血损伤大鼠脑组织匀浆上清液中神经生长因子(nerve growthfactor，NGF)、BDNF、血管内皮细胞生长因子(vascular endo—thelial growth factor，VEGF)的表达，且补阴和阴阳双补方药诱导BMSCs组中表达的NGF、BDNF作用优于补阳类方药  。江爱娟  等探讨益气活血方(黄芪、三七粉、川芎、蜈蚣等)和补肾生髓方(龟板胶、鹿角胶、金毛狗脊、杜仲、淮牛膝等)对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠恢复期缺血半暗带BDNF和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast
growth factor，bFGF)表达的影响，研究表明益气活血方、补肾生髓方能通过促进缺血半暗带BDNF和bFGF的表达，抗脑缺血后损伤，有利于脑缺血后神经功能的恢复。相关研究在探讨益气活血治法与其中药复方脑络欣通及其拆方(益气方、活血方)对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠神经干细胞及相关调节因子的影响，本实验发现，脑缺血再灌注后不同时间点，脑络欣通组、益气药组、活血药组均能不同程度地促进脑缺血损伤后BDNF、EGF的表达增加，即脑络欣通组、益气药组、活血药组均可能通过影响神经营养因子的表达，促进中枢神经系统神经干细胞的增殖，从而促进脑内受损神经元的存活与修复  。脑溢安(钩藤、生地、丹皮、三七、地龙等)是在总结前人对中风病因病机的认识和治疗经验的基础上，从风、火、痰、瘀人手，创立功能平肝息风、凉血泻火、行血化痰之方，相关研究发现脑溢安能上调脑出血后BDNF mRNA的表达水平，从而促进BDNF的合成与分泌。改变脑出血后血肿区及血肿周围局部营养因子低下的微环境状态，从而发挥其抗缺血缺氧损害的脑保护用  。于莉   等察醒脑解毒汤(石菖蒲、冰片、栀子、大黄、黄连、水蛭、泽泻)对大鼠局灶性脑缺血再灌注模型脑组织中BDNF、胶质细胞源性神经营养因子(Glialcellline-derived—
neurotrophicfactor，GDNF)mRNA表达的影响时，阐明了醒脑解毒汤能够上调BDNF mRNA和GDNF mRNA的表达，从而促进新生血管的生成，促进侧支循环的建立，进而改善脑血供。相关研究还表明清热化瘀方(牛角、丹参、赤芍、地龙、石菖蒲、郁金、川芎、酒大黄、天竺黄、生牡蛎等)能上调脑缺血后BDNF mRNA及蛋白的表达水平，减少神经元凋亡．表明该方可能通过促进BDNF合成和分泌，保护受损神经元 。
    迄今为止，对于BDNF的认识仍然处于基础理论研究阶段，很多机制还未完全明确，但由于BDNF对神经元的发育、神经元保护效应和促进神经纤维再生等多方面有着重要作用，所以，BDNF的研究有很大的潜在应用价值，有望为神经系统疾病提供有效的治疗手段。继承与创新是辨证的统一，在中医药对BDNF影响的研究中，必须充分遵循中医药自身的特点和发展规律，既不能排斥现代科技和方法，也不能舍弃中医药的科学内涵和学术本质。综上可知，中医
药的研究与现代科技方法的结合已取得很大进展，但在BDNF的研究中，中药复方制剂能否有效地应用于临床，用现代科学研究方法对其验证如中医药对BDNF研究将对疾病防治工作产生巨大推动作用；相信随着中医药研究深入和方法规范，中医药在对BDNF影响的详细机制将得以阐明，传统医药治疗相关疾病的作用得以认可和广泛应用。