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摘要:目的 分析献血者血清抗-HCV抗体及丙型肝炎病毒核酸（HCV RNA）含量与ALT的关系。 方法 采用ELISA法检测抗-HCV抗体，阳性标本用荧光PCR试剂盒测定HCV RNA，分析ALT活性与HCV RNA水平的关系。 结果 83份抗-HCV抗体阳性标本经PCR检测后有37份标本含HCV RNA，HCV RNA拷贝量与ALT活性呈正相关，且标本的HCV RNA含量越多，ALT活性也越高（P<0.01）。 结论 献血者中筛查ALT并结合PCR技术，能减少HCV经血传播的危险。
关键词:抗-HCV;丙型肝炎病毒核酸;丙氨酸氨基转移酶
The relationship between anti-HCV positive and the activity of ALT in serum of blood donors.
ZHONG Tu-quan，ZHANG Xiao-yun.
（Zhanjiang Municipal Central Blood Station，Zhanjiang524002，Guangdong，P.R.China）
Abstract:Objective To investigate the relationship betweem serum virus RNA and ALT levels in anti-HCV positive samples of donors. Methods Hepatitis C virus fluorescence PCR diagnostic kitwas carried out on the anti-HCV positive samples in order to reveal any possible relationship between HCV RNA and ALT levels. Results 37samples were tested positive for HCV RNA a-mong83anti-HCV positive samples.The more copies of HCV RNA in the blood samples，the higher the ALT levels（P<0.01）. Conclusion The combination of ALT testing with HCV RNA PCR for screening donors'blood can reduce the risk of transmission of HCV through blood transfusion.
Key words:Anti-HCV;HCV RNA;Alanine aminotransferase
丙氨酸氨基转移酶（Alanine aminotransferase，ALT）是目前肝脏疾病诊断和健康体检应用最多的酶类测定项目，也是判断肝细胞损伤的敏感指标，已被卫生部指定为采供血机构对供血者初筛和血液复检的常规检验项目之一。随着HBsAg、抗-HCV和抗-HIV等项目引入血液筛查，ALT检测的重要性也逐渐下降。为研究抗-HCV阳性献血者血液丙型肝炎病毒核酸（HCV RNA）含量与ALT活性间关系，现对2003～2004年8月份48500份初、复检血液中因抗-HCV阳性而报废的血液进行回顾性调查，从243份报废血液中随机抽取83份标本进行检测，现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 试剂和仪器 初、复检ELISA法抗-HCV试剂盒分别由北京万泰生物药业有限公司和厦门新创科技有限公司提供;丙型肝炎病毒核酸扩增荧光检测试剂盒由广州中山医科大学达尔安基因诊断中心提供，ALT速率法试剂盒由北京澳斯邦生物有限公司提供，均在有效期内使用。帝肯公司的TECAN.GENESIS RSP150样本处理机、FAME全自动酶标分析系统，美国PE公司的9600核酸扩增仪，瑞士Anthos HTⅢ酶标仪。
1.2 标本 2003～2004年8月份来湛江市中心血站无偿献血的标本，经初、复检后抗-HCV阳性标本243份，随机抽取83份，贮存于-70°C冰箱。
1.3 方法 ELISA法测定抗-HCV，严格按试剂操作说明书进行，带有室内质控物。丙型肝炎核酸荧光检测法:提取血清（血浆）中核酸，加入HCV反应液及逆转录酶系，经转录后的产物加入荧光素定量，放入PCR扩增仪内扩增，分别测定10个循环和30个循环后的荧光读数，即可计算出标本中HCV RNA的含量，带有空白、阴性、阳性梯度（1～10 6 ）对照，结果以拷贝/毫升（cp/ml）表示。
1.4 统计学处理 采用直线相关分析和t检验。
2 结果
83份抗-HCV阳性标本，经PCR检测后37份合有HCV RNA，HCV RNA水平与ALT活性存在显著的关联（r=0.96，P<0.05），即HCV RNA阳性与代表肝脏损害标志的ALT活性间存在正相关。将HCV RNA阳性的37份标本按拷贝量划分，结果拷贝量在（100～3200）×10 3 cp/ml组的ALT为（139±23.5）活性单位;拷贝量在（2.7～52）×10 3 cp/ml组的ALT为（48.80±6.52）活性单位，两组间ALT活性的差异有显著性（t=4.23，P<0.01）。表明献血者体内HCV RNA含量越高，肝细胞破坏越严重，其ALT活性就越高。
3 讨论
自20世纪80年代初，包括我国在内的许多国家对献血者进行ALT活性检测，作为筛查非甲非乙型肝炎的替代试验，并一直是血站筛查献血者的必检指标 ［1］ 。然而影响ALT活性的因素较多，尤其是随着ELISA法抗-HCV试剂敏感度和特异度的提高，抗-HCV阳性检测时间与ALT检测首次异常时间已接近，而非特异性的单纯ALT异常致血液报废现象日益增多。因此，对于ALT活性检测的利弊出现了不同的观点 ［2，3］ 。我们对抗-HCV阳性献血者标本中HCV RNA水平与ALT活性关系的研究发现，两者具有一定的正相关，即HCV感染者的ALT活性可能增高（主要针对初次发现的患者）。同时，体内含有HCV RNA的献血者ALT阳性率为59.4%（22/37，ALT活性>50IU/L时为阳性），与文献报道的丙型肝炎患者的ALT阳性预测值60%相符 ［4～6］ 。研究结果亦显示，拷贝量在（104～3200）×10 3 cp/ml组的ALT活性显著高于拷贝量（2.7～52）×10 3 cp/ml组，表明献血者体内HCV复制增快时，肝细胞破坏就增加，释放入血的HCV RNA量也相应增多，而体现肝细胞损害程度的ALT活性就越高。因此，为保障血液质量，防止输血性传播疾病的发生，ALT活性仍应作为献血者筛查的一个指标。
由于本研究资料有限，更深入的研究还有待今后进一步开展。同时我们建议在有条件的情况下，实行血液检测的集中化（即将各血站血液标本集中到指定的实验室），把ALT检测结合HCV RNA PCR技术用于献血者筛查，以进一步减少HCV经血传播的危险性，保障血液质量。
参考文献:
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［3］张洋，任爱民，朱家明，等.对献血者AlT初步研究［J］.中国输血杂志，1999，13（3）:164.
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作者单位:湛江中心人民医院，广东湛江 524000.
收稿日期:2005-04-15