乙肝病毒前S1抗原检测的分析及临床意义

【摘要】  目的 探讨乙型肝炎(乙肝)病毒前S1抗原（HBV Pre-S1）与乙型肝炎病毒（HBV）的感染、复制关系，阐述检测乙型肝炎病毒前S1抗原（HBV Pre-S1）对乙型肝炎的实验室检测的分析及临床意义。 方法 收集乙型肝炎病毒感染者5 201例和HBV-M阴性1 840例,检测其Pre-S1蛋白、HBV标志物与HBV DNA。 结果 HBsAg、HBeAg和抗-HBc阳性者1 280例，HBV DNA与Pre-S1蛋白的检出率分别为87.5%和87.0%。HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性者3 582例，HBV DNA与Pre-S1蛋白的检出率分别为41.0%和36.0%，HBsAg和抗-HBc阳性者339例，HBV DNA与Pre-S1蛋白的检出率分别为32.2%和29.2%，说明部分HBeAg阴性而抗-HBe阳性/阴性的患者仍存在着病毒复制。HBV DNA定量>1 000拷贝/ML为诊断标准。经卡方检验，HBV DNA与Pre-S1蛋白检出率差异无显著性。 结论 Pre-S1蛋白较HBeAg更敏感的反映了HBV复制的情况。

　　

【关键词】  前S1蛋白 乙型肝 乙型 病毒复制

　　乙型肝炎病毒具有传染性强、传播途径复杂、流行广泛、发病率较高、易于慢性化、重症化等特点，是目前世界性的主要公共卫生问题，也是我国现在今后危害最严重的传染病之一，且近年来其感染率有明显上升趋势。随着对乙型肝炎病毒前S1抗原在乙型肝炎病毒感染、复制及刺激机体产生免疫应答等方面起着重要作用。前S1抗原是乙肝的S区基因编码产生的一种蛋白，是较新能准确可靠反映病毒感染和复制的指标［1］。作为一项新的检测乙型肝炎病毒的血清学指标，乙型肝炎病毒前S1抗原的检测已经普遍应用于乙型肝炎的临床实验室诊断和疗效观察［2］。

　　1  材料与方法

　　1．1  标本来源  所有标本均来自于2003年2月～2006年8月来我院肝炎门诊就诊的患者及住院患者,乙型肝炎病毒感染者5 201例，HBV-M全阴2 840例。所有患者符合2000年中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会联合修订的“病毒性肝炎防治方案”中的病毒性肝炎诊断标准做出临床诊断。晨空腹肘静脉血5ml，分离血清-20℃冻存待检。

　　1. 2  检测方法  (1)Pre-S1蛋白采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法（ELISA）测定，测定试剂盒购于上海阿尔法生物技术有限公司;(2)HBV-DNA采用核酸扩增（PCR）荧光定量检测法检测，试剂盒购于中山大学达安基因股份有限公司。(3) 乙型肝炎血清标志物（HBV-M）检测试剂盒购于英科新创（厦门）科技有限公司。

　　2  结果
   
　　检测慢性乙型肝炎病毒患者共5 201例，结果见表1。携带不同模式乙肝病毒标志物的患者中， HBsAg、HBeAg、抗HBc(简称“135”)阳性组1 280例，HBV-DNA及前S1抗原的检出率分别为87.5%和87.0%，这组患者存在病毒的高度复制，三者间差异无显著意义(P>0.05)。HBsAg、抗-HBe、抗-HBc(简称“145”)阳性者3 582例，HBV DNA与Pre-S1蛋白的检出率分别为41.0%和36.0%。HBsAg和抗-HBc(简称“15”)阳性者339例，HBV DNA与Pre-S1蛋白的检出率分别为32.2%和29.2%，说明部分HBeAg阴性而抗-HBe阳性/阴性的患者仍存在着病毒复制。还对1 840例HBV-M阴性血清未检测出Pre-S1和HBV-DNA，表明试验的特异性是好的。见表1。

　　表1  Pre-S1、HBV-M和HBV-DNA测定结果（略）

　　3  讨论
   
　　乙型肝炎病毒前S1抗原经常存在于乙肝复制标志物中,如：HBeAg、HBV DNAP或HBV-DNA阳性血清中，故认为前S抗原特别是前S1抗原是病毒复制的标志物之一［3］。HBV-DNA阳性检出通常被当作乙肝病毒感染及复制的金标准［2］。本课题对5 201例、乙型肝炎病毒患者血清同时作了HBV-DNA及乙肝前S1抗原检测，两种检测结果具有较好的一致性，血清标志物模式“135”阳性组中HBV-DNA和PreS1阳性率分别为87.5%和87.0%，这说明HBeAg、HBV-DNA及前S1抗原之间有着密切的相关性，均可作乙肝存在及乙型肝炎病毒复制的重要标志。Petit等［4］和Yuki等［5］又从定性和定量的角度作了进一步的研究，认为前S1抗原与乙肝的复制指标有良好的一致性；慢性乙型肝炎患者和无症状表面抗原携带者血清前S1抗原滴度、HBV-DNA含量、HBeAg滴度、HBV DNAP活性均显正相关。由此可见在反映病毒复制方面，Pre-S1是一个较好的指标。以往认为，HBeAg转化为抗HBe，预示病毒复制终止，疾病开始缓慢。单一HBeAg作为判断乙型肝炎病毒复制活跃与否的指标是不够的［3］。血清标志物模式中“145” 阳性患者，HBV-DNA和PreS1阳性率分别为41.0%和36.0%，临床实践证明，抗HBe阳转后，部分患者病毒仍在体内持续复制，病情继续恶化。说明PreS1检测在抗HBe阳性、慢性乙型肝炎患者中,可以起到准确反映病毒在体内是否继续复制的重要作用，弥补了因HBeAg的缺失而造成的诊断和治疗的困难。血清标志物模式中“15”阳性患者，HBV-DNA和PreS1阳性率分别为32.2%和29.2%，说明部分HBeAg阴性和抗-HBe阴性的患者仍存在着病毒复制，HBV-DNA与PreS1两者检出率差异无显著性。同时本实验对1 840例HBV-M阴性血清未检测出PreS1和HBV-DNA，表明试验的特异性是好的。在我国近3千万人的慢性乙型肝炎患者中约有30%左右的患者抗HBe阳转后病毒仍在体内继续复制，病情较重，其中部分可以演变为肝硬化或肝癌，自然好转率非常低。同样，HBeAb阳性的HBV无症状携带者也占有一定的比例。这一部分HBeAb阳性的慢性肝炎和乙肝无症状病毒携带者往往是因为病毒基因变异所致，其所携带的HBV变异毒株大多数表现为在病毒基因组前C区末端1896位发生G-A点突变，产生一个新的终止密码子（TAG），阻断了HBeAg的形成，导致在临床上出现HBeAg缺陷和HBV血清型。因HBeAg的缺失造成诊断和治疗的困难。此时，检测前S1抗原既能较为准确的检测病毒在机体内复制状况，又能诊断疾病的转归和了解是否携带HBV变异毒株，充分显示了前S1抗原的临床价值，所以乙肝病毒携带者中，加查前S1抗原是非常必要的。
   
　　传统乙肝病毒血清标志物是目前我国用于乙肝检测与筛查最普及的指标。前S1抗原作为一种新的检测指标，较HBeAg更准确的反映了乙肝病毒的复制情况，是传统乙肝病毒血清标志物有益的必要的补充。HBV-DNA是衡量乙肝病毒复制最灵敏、最精确的证据。在临床上应将这些指标综合分析，才能真正了解患者的病情，指导治疗。

【参考文献】
  　　［1］ 黄元桐.现代各种病毒性肝炎的检测与分析判断［J］.山西医药杂志，2002，29（6）：451.

　　［2］ 夏邦世，沈患海.慢性乙型肝炎患者HBV前S1抗原及HBV-M和HBV-DNA与肝功能的关系［J］.中华检验医学杂志，2004，27（9）：575～576.

　　［3］ 王健,闵福援.乙型病毒血清标志物的检测方法及其临床意义［J］.中华检验医学杂志，2005，28（1）：113～115.

　　［4］ Petit MA, Zoulim F, Capel F, et al.Pre-S Variable expression of Pre-S antigen in seram during chronic hepatitis B virus infection:an accurate marker for the level of hepatitis B virus replication［J］.Hepatology,1990,11:809～814.

作者单位：海口市人民医院检验科，海南 海口 570208.