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【摘要】 目的 探讨梅毒酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）、快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）对梅毒病人诊断的敏感性和特异性。 方法 使用目前最为常用的TP-ELISA、RPR和TPPA法对129份梅毒检测呈阳性的血清标本及30份正常对照血清进行检测。 结果 TP-ELISA、RPR及TPPA法的阳性率分别是78.29%、61.24%、77.52%，特异性分别是95.24%、79.22%、100%。 结论 TPPA是一种高特异性、敏感性较好的梅毒血清学诊断检测方法。
【关键词】 梅毒血清学诊断；梅毒酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）；环状卡片血浆反应素试验（RPR）；螺旋体明胶颗粒凝集试验
梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种慢性的、系统性的传染病，对梅毒的早期诊断和及时治疗，减少患者痛苦和控制其蔓延至关重要。梅毒螺旋体一旦侵入人体后，血清中可产生非特异反应素抗体和梅毒螺旋体抗原的特异抗体。目前用于梅毒血清学的检验方法主要有：非梅毒螺旋体血清试验和梅毒螺旋体血清试验，检测感染者血清梅毒螺旋体抗体是诊断毒螺旋体感染的主要办法。不同的检测方法都有其特殊的临床应用价值，实验室如何更合理地选用检测方法，避免错误、误诊、漏诊而产生医患纠纷等问题是非常必要的。为此，本研究就如何合理地利用TP-ELISA、RPR和TPPA3种方法进行了探讨，现报告如下。
1 材料和方法
1.1 材料
2007年4～6月住院及门诊患者，根据梅毒诊断标准确定一期梅毒血清样本26份，二期梅毒血清样本36份，三期梅毒血清样本21份，临床治愈后梅毒复查血清样本18份。其他经临床确定为类风湿性关节炎血清样本6份，系统性红斑狼疮患者血清样本2份，妊娠血清样本7份，乙型肝炎患者13份，健康体检者血清样本30份。
1.2 试剂和仪器
RPR、TP-ELISA试剂盒（上海科华生物技术有限公司），TPPA试剂盒（日本富士瑞必欧株式会社）。TP-ELISA使用仪器：日本生产的KYOWA全自动加样仪和AP-960全自动酶联免疫分析仪。RPR使用仪器：江苏省姜堰市康健医疗器械厂XK95-I型多用振荡器。
1.3 方法
采用TP-ELISA、RPR和TPPA3种方法分别对159份标本按照试剂盒的说明书操作方法进行平行检测。
2 结果
159份血清标本分别采用TP-ELISA、RPR和TPPP法检测结果,见表1。3种方法检测用于梅毒检测阳性率、灵敏度和特异性结果,见表2。表1 159份血清样本3种方法检测结果（略）表2 3种方法检测用于梅毒检测阳性率、灵敏度和特异性结果比较方法（略）注：1、总阳性率不包括 “健康体检者”， （分159-30=129）;2、特异性不包括“临床治愈后复查”（如：22+35+4=61，79-2=77，23+36+21=80，23+36+21+2+2=84，25+36+21=82）。
3 讨论
梅毒（TP）是由梅毒螺旋体感染引起的性传染病，感染后产生非特异性抗体类脂质抗体和特异性抗螺旋体抗体（TP-Ab）。梅毒按病程分为三期，一期梅毒抗体主要是IgM型，二期梅毒抗体有IgM、IgG型，三期梅毒抗体主要是IgG型。患者在不同分期梅毒抗体出现早晚有差异，故临床应同时检测梅毒非特异性抗体与特异性抗体，以防止梅毒患者的漏诊。临床实验室对梅毒的血清学检查包括非梅毒螺旋体血清学试验和梅毒螺旋体血清学试验。前者常用于临床筛选及判断治疗的效果，后者则主要是确认试验，但它不能判定治疗效果，因为一旦患有梅毒，即便经过正规抗梅毒治疗，仍可检出其特异性抗体，甚至可终生检出阳性。实验室选用了3种不同检测方法诊断梅毒：①RPR检测梅毒非特异性抗体，用于过筛实验及疗效观察。②TP-ELISA检测梅毒特异性抗体。③TPPA用于梅毒的确认实验。RPR试验检查的是人体内的反应素，它是人体感染梅毒螺旋体后组织受到破坏裂解出来的一种类脂成分，这种成分与梅毒螺旋体的蛋白质结合成为抗原，刺激机体产生抗类脂质抗体即反应素。梅毒螺旋体破坏组织可使机体产生反应素，而其他破坏机体的过程也可产生反应素，所以梅毒患者RPR试验阳性，但RPR阳性者并不一定感染梅毒螺旋体。怀孕、风疹、水痘、病毒肝炎、亚急性细菌性心内膜炎、类风湿性关节炎、SLE、干燥综合征等，RPR同样可以呈假阳性。因此，不能单独根据RPR阳性诊断梅毒，而应对患者进行全面检查。
梅毒血清学检测，对感染时间不长的一期梅毒，由于血清内还未产生抗体或抗体的量还不够多，血清学检查则可能为阴性［1］。硬下疳出现1～2wk后，RPR试验才转为阳性。RPR试验与TPPA试验相比，前者阴转阳的时间约晚1wk左右。当RPR有反应者应加做TPPA，才能确定是否感染梅毒。TPPA的灵敏度和特异性比前两种方法都高，是临床常用的梅毒确认试验，也可以进行效果测定，但试剂成本高，操作烦琐，耗时较长，不适合大量标本的筛查，适合于前两种方法测定阳性后的确认试验。感染梅毒经治疗后RPR可能较为阴性，但TPPA仍会维持阳性。梅毒晚期时会有皮肤黏膜、骨、眼等梅毒、心血管梅毒、神经梅毒等，但RPR阴性且无传染性［2］，故临床对多器官表现也需注意，及时进行梅毒确证实验。TP-ELISA是利用梅毒螺旋体基因工程混合抗原包被在微孔滴定板上，检测血清中的梅毒特异性抗体，是诊断梅毒螺旋体感染的依据之一。ELISA还具有简单、快速和高质量的优点，应是梅毒血清学诊断试验的首先方法［3］。但其检测的是梅毒IgM和IgG的混合抗体，梅毒IgG抗体治愈后相当长的时间内仍然存在较高的阳性率，甚至终身阳性，因此，TP-ELISA阳性只能说明正处于感染期或曾经感染过，不能判断梅毒疾病活动与否，所以不能作为疗效监测手段［1］。
本文选用129份样本，30份正常对照；129份阳性结果标本中，一期梅毒26例，RPR阳性率84.62%，TP-ELISA阳性率88.46%,TPPA阳性率96.15%；二期梅毒36例，RPR阳性率97.22%，TP-ELISA阳性率100%,TPPA阳性率100%；三期梅毒21例，RPR阳性率19.05%，TP-ELISA及TPPA阳性率100%；临床治愈复查，RPR阳性率19.05%、TP-ELISA及TPPA阳性率100%；另外16例为其他疾病所至RPR试剂假阳性。通过实验数据和结果证实：如RPR（-）、TP-ELISA（-）、TPPA（-）可排除梅毒或初期感染潜伏期；RPR（+）、TP-ELISA（-）、TPPA（-）为假阳性或初期感染；RPR（+）、TP-ELISA（+）、TPPA（+）为梅毒感染，RPR（-）、TP-ELISA（+）、TPPA（+）为晚期梅毒或梅毒既往感染。
综上所述，临床应该同时检测非特异性抗类脂质抗体和特异性抗螺旋体抗体（TP-Ab）来确认梅毒。梅毒血清学检查是诊断梅毒的重要依据，但并非唯一依据，临床应综合分析梅毒血清学检测结果，排除假阳性、假阴性情况，才能做出正确的诊断。通过本实验统计数据及结果表明，实验室合理地选用3种不同检测方法进行梅毒检测，将减少漏诊、误诊，提高诊断率，为临床梅毒分期的确诊提供全面的参考依据，并且对判定梅毒的发展和痊愈、判断药物的疗效和防治性传播疾病起到积极作用。
【参考文献】
［1］邢培清，刘振玉. 实用输血检验［M］.郑州:郑州大学出版社，2001，212.
［2］国娟，倪蓝.748例梅毒患者血清学试验结果分析［J］.中华现代临床医学杂志，2004，10B.
［3］李金明.临床酶免疫检测定技术［M］.北京:人民军医出版社，2005.
［4］宋继权，盛晚香，冯谊，等.ELISA在梅毒血清学诊断中的应用［J］.中国皮肤性病学杂志，2000，14：258～259.
作者单位：湛江中心人民医院，广东 湛江 524037.