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【摘要】 目的 了解海口市犬狂犬病毒携带和接种疫苗后的免疫状况。 方法 采集本市动物门诊、养犬场等犬只的唾液和血清样品各226份，用ELISA方法检测唾液中狂犬病带毒率和血清中的抗体阳性率。 结果 犬唾液的带毒率为0，血清抗体阳性率为71.68％，且进口疫苗免疫后的抗体阳性率为91.59%,明显高于国产疫苗的53.78%。 结论 海口市未发现带狂犬病毒犬只，接种进口狂犬疫苗的免疫效果比国产狂犬疫苗好。
【关键词】 狂犬病;狂犬病毒;抗体
狂犬病（Rabies）是由狂犬病毒（Rabies virus, RV）引起的急性中枢神经系统表现的人兽共患传染病。狂犬病毒主要通过破损的皮肤或黏膜侵入人体，经神经末梢上行进入中枢神经系统，临床表现主要为急性、进行性、几乎不可逆转的脑脊髓炎，以狂燥不安、行为反常、攻击行为、进行性麻痹和最终死亡为特点。
狂犬病属于自然疫源性疾病，病死率高居各传染病之首，感染出现症状后其致死率为100％。犬是狂犬病毒最主要的宿主，在人狂犬病的所有病例中，99％以上是由犬传播病毒引起的。我国狂犬病主要分布在广西、广东、贵州、湖南、河南、四川等省份，相对而言南方城市多发。狂犬病的发生以犬为主，也有牛、马、猪以及人类发生狂犬病的死亡病例。近几年狂犬病的发病人数呈现上升趋势，每年的发生人数在2 000人以上。
据统计，截止2006年底，海口市养犬数达到6万只。尽管近些年来，有关部门和主流媒体加强了狂犬病的宣传力度，养犬者也积极为犬只接种疫苗，但海口市犬的免疫效果和犬只带毒情况还不清楚。本次调查范围主要是对海口地区3个动物门诊和2个犬养殖场犬只狂犬病病毒携带情况及抗体水平进行调查，现报告如下。
1 材料和方法
1.1 样品来源 2006年2～10月，采集海口市区的3个动物门诊及海口市郊的2个犬养殖场的犬的唾液棉拭子和血清样品各226份。唾液样品保存于-70℃，血清样品保存于-20℃。
1.2 检测方法
1.2.1 犬唾液中狂犬病毒ELISA检测试剂盒 采用卫生部武汉生物制品研究所生产的狂犬病抗原检测试剂盒，批号为20060820。
1.2.2 狂犬病病毒抗体ELISA检测试剂盒 采用深圳康百得生物科技有限公司的狂犬病毒抗体诊检测剂盒，批号为20060620。
2 结果
2.1 犬唾液中带毒情况 经检测的226份唾液样品中，带毒率为0，其中动物门诊样品数为185份，养犬场41份。
2.2 犬血清中狂犬病毒抗体检测情况 经检测的血清中，阳性样品162份，阳性率为71.68%，详见表1。
表1 接种国产苗狂犬病毒抗体检测结果（略）
3 讨论
3.1 本次调查中，对海口市区的3家动物医院和2个养犬场采集犬唾液和血清样品，各226份。犬只唾液带毒率为0％，血清抗狂犬病毒抗体阳性率为71.68％，其中注射进口疫苗的犬只抗体阳性率为91.59％，注射国产疫苗的犬只抗体阳性率为53.78%。这个结果从一定程度上反映了海口市犬只的带毒情况和狂犬病免疫的抗体水平，且注射进口疫苗所取得的免疫抗体水平较高。
3.2 徐葛林［1］等对广西地区健康犬带狂犬病毒的调查，得出ELISA试验与免疫荧光、免疫荧光阻断试验、动物实验的病毒检出率吻合的结论。为此，采用ELISA方法对犬唾液中带毒情况的调查是可行的，且唾液样品易于采集。但犬唾液中的病毒为间断出现，所以本次调查只能说明在采样当时被检测犬只唾液中不排毒，不能作为被检犬不带毒的最后结论。
3.3 狂犬病的诊断方法很多，它们各有其优缺点，且特异性和敏感性也不同。分子生物学诊断方法虽然敏感和特异，但需要一定的仪器设备，成本较高，而直接免疫荧光抗体实验虽然是“金标准”，但其准确度依赖于一定的专业经验，难以推广。免疫学诊断方法因其具有简易、快速等优点，是目前进行狂犬病感染调查、临床狂犬病初步诊断的常用方法，在兽医领域得到了广泛的应用。
3.4 通过本次调查，对于海口市即将出台的《养犬管理办法》有着重要的实验室参数依据，在制定相关方针和政策时能采取相应的措施，特别是在采用进口或国产疫苗方面有个相对客观的了解，对防控狂犬病起到积极作用。
3.5 为确保狂犬病检测实验室的生物安全，操作所有潜在狂犬病毒感染的材料均应在P2生物安全实验室内进行，实验室应当具有严格的安全管理规定，工作人员必须经过生物安全培训，皮肤裸露或有开放性伤口时，不能进行本实验。检测人员必须进行暴露前免疫和血清抗狂犬病毒中和抗体水平的检测，否则不得进入狂犬病实验室。
【参考文献】
［1］ 徐葛林. 多种方法对广西地区健康犬带狂犬病毒的调查［J］. 中国畜牧兽医杂志，1999，（15）3：108～109.
［2］ N.Tordo. Characteristics and molecular biology of rabies virus. Laboratory techniques in rabies［M］. Fourth Edition, 28～51. WHO, Geneva 1996.
［3］ F.X. Meslin, M.M. Kaplan，H. Koprowski. Laboratory techniques in rabies［M］. Fourth Edition, 105～112. WHO Geneva 1996.
［4］ The programme on human rabies surveilliance and control［M］. World Health Organization Report, 2002.
作者单位：海南省动物疫病预防控制中心，海南 海口 570203; 海南大学生命科学与农学院04级动物科学专业，海南 海口 570228.