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【摘要】 目的：探讨嗅鞘细胞（Olfactory esheating cells OECs）移植部位与剂量治疗陈旧性脊髓损伤疗效的影响。方法：应用我院实验室由人胚胎的颅脑嗅球提取、纯化，培养1～2周的OECs，常规脊椎后入路切开硬脊膜借助手术显微镜将50 ul OECs悬液单点移植于受损脊髓上段与正常脊髓交界处（共30例 A组）。用同样方法将50 ul×2（最多可达50 ul×4）OECs分多点移植于损伤脊髓上下端，即损伤脊髓与正常脊髓的交界靠近正常一侧（共30例 B组）。结果：在我院自愿接受OECs移植的106例陈旧性脊髓损伤患者在术后2～4周内均应用美国脊柱脊髓损伤学会（ASIA）标准进行评价。患者在感觉、运动、大小便及植物神经功能方面均有不同程度的改善。其中B组病人较A组病人恢复更为明显。结论：手术将50 ul×2（最多可达50 ul×4）OECs分多点移植于损伤脊髓上下端优于将50 ul OECs单点移植于损伤脊髓上端的治疗方法。
【关键词】 陈旧性脊髓损伤 移植 嗅鞘细胞 剂量 部位
The effect of sites and dosage in olfactory ensheathing cells (OECs) transplantation on curing dated spinal cord injury
ZHANG Lei, ZHENG Zun-cheng, LIU Chao, et al
The neurosurgery department of Taian Rongjun hospital, Shandong 271000, China
【Abstract】 Objective：To explore the effect of sites and dosage in olfactory ensheathing cells (OECs) transplantation on curing dated spinal cord injury. Methods:OECs were purified from human olfactory bulb and cultured for 1 or 2 weeks in the laboratory of our hospital. The spinal dural mater was conventionally cut through the dorsal approach of vertebrae .50ul OECs suspension were transplanted under microscope to one sites in the border of the superior part of the injured spinal cord and the normal spinal cord (30 cases in Group A). To transplant 50ul×2 OECs (at most 50ul×4) to several sites in the either side of the injured spinal cord (the border of injured spinal cord and normal spinal cord that approach to the normal spinal cord) with the same method (30 cases in Group B).Results: To evaluate the 106 cases of injured spinal cord who accepted the OECs transplantation in our hospital in 2～4 weeks after the operation with ASIA. The cases have different improvements in sense, movement, defecating, urinating and function of vegetative nerve. The improvements of the cases in Group B are more obvious than Group A.Conclusions: Transplanting 50ul×2 OECs (at most 50ul×4) to several sites in the either side of the injured spinal cord is superior to the therapy that transplanting 50 ul OECs to one sites in the superior part of the injured spinal cord.
【Key words】Dated spinal cord injury; Transplantation; Olfactory ensheathing cells; Dosage; Sites
陈旧性脊髓损伤是目前人类面临的最严重的致残性损伤之一。传统观点认为哺乳动物中枢神经没有再生能力。近十几年来大量的研究证实：OECs是能促使已损伤的中枢神经重新恢复功能最有效的细胞之一［1-6］。近几年来已有学者将OECs移植到中枢神经损伤的患者，取得了较好的疗效［5-7］。我科自2004年6月以来利用OECs移植治疗陈旧性脊髓损伤取得了较好的疗效，报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
我科2004年6月至2006年12月用不同的细胞量和方法治疗的106例患者分为A、B两组，从A、B两组中随机各抽取30例作对照。A组中，男27例，女3例。年龄5～20 岁2例，21～30岁9例，31～40岁10例，41～50岁7例，50岁以上2例。病程6～12个月10例，1～3年13例，4～10年6例，10年以上1例。完全性损伤病例20例，不完全性损伤10例。脊髓损伤部位：颈段11例，胸段6例，腰段13例。B组中，男26例，女4例。年龄0～20 岁1例，21～30岁8例，31～40岁15例，41～50岁6例。病程6～12个月11例，1～3年13例，4～10年5例，10年以上1例。完全性损伤病例21例，不完全性损伤9例。脊髓损伤部位：颈段7例，胸段8例，腰段15例。
1.2 方法
患者在气管插管全麻下取俯卧位，标准后入路，去除内固定物（存在内固定物者），切开硬脊膜暴露已损伤脊髓上下端，借助显微镜A组将已培养好的OECs悬液50 ul单点移植于受损脊髓与正常脊髓交界处。B组将OECs悬液（50 ul×2，最多可达50 ul×4）分多点注射于损伤脊髓的上下两端的正常和异常脊髓之间。
1.3 神经功能评定
我们应用美国脊柱脊髓损伤学会（ASIA）提出的标准对患者术前（入院时）和术后（2～4周）进行分析，以便了解OECs移植不同部位与剂量对不同年龄组、不同部位和伤后不同时间的疗效进行分析。表1 A组患者手术前后功能平均分数 n=30（略）表2 B组患者手术前后功能平均分数 n=30（略）
2 结果
3 讨论
3.1 脊髓损伤后，因神经束路的中断，而上神经元释放的5-羟色胺能和去甲肾上腺素等递质在早期可能通过物理扩散和体液循环促使靶细胞发挥生理作用，恢复部分神经功能。另外已有实验证明脊髓损伤后期远端的靶神经元及其表面受体数目增加［9］，这样OECs移植后其释放的和细胞混悬液中的递质和激素扩散到靶细胞，足以引发它们的神经冲动。
3.2 大量实验证实OECs作为特殊类型的胶质细胞，其生物学作用极其广泛，不但能够支持和促进神经元的生长、存活，桥接损伤脊髓的两断端轴突再生连接并髓鞘化，同时还可以分泌许多对神经元有促进作用的营养因子、细胞外基质和黏附因子FN、LI、Tenacisn、laminin等，促进轴突的生长和抑制胶质瘢痕的形成［9-12］。损伤脊髓以上为正常脊髓，损伤平面以下为失功能性脊髓，但其结构除少部分变性液化外大部分尚属正常。单纯将OECs悬液移植于受损脊髓上端神经恢复当然慢。我们将OECs分多点移植于上下端交界处，发挥OECs对已损伤脊髓的桥连接再生和再髓鞘化，从而加大OECs分泌的对神经元有促进作用的营养因子、细胞外基质和黏附因子的数量与浓度，OECs桥接损伤脊髓的两断端轴突再生连接再髓鞘化的能力也相应增加。这样使得局部神经功能的恢复得到更多的帮助。这可能是B组的临床效果优于A组的主要原因（见表1、表2）。
3.3 虽然理论上移植越多的OECs对神经功能恢复的帮助也越大，但是毕竟脊髓内的空间是有限的，我们认为过量的OECs移植到脊髓内亦可能造成对脊髓的再次损伤。所以我们根据患者损伤节段的长度及损伤的严重程度，针对性的选择移植的部位与剂量应是可取的。
4 结论
在黄红云教授的指导下结合我们不断地探索、研究，在我们治疗的106例陈旧性脊髓损伤患者中，患者术后均较术前脊髓神经功能均有不同程度的改善。对于OECs移植部位与剂量的探讨，我们仍然在不断地进行中，但目前来说，依据我们治疗陈旧性脊髓损伤患者106例的临床效果来看，将OECs悬液（50 ul×2，最多可达50 ul×4）分多点移植于损伤脊髓的上下两端的正常和异常脊髓之间是目前最为有效可行的方式。
陈旧性脊髓损伤的治疗是世界性的难题，我们在这一领域虽然做了一些工作，已取得了一定的成绩，但仍有很多的问题有待进一步发现和研究。
【参考文献】
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作者单位：山东省泰安荣军医院神经外科，山东 泰安 271000