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【摘要】 目的 建立高效液相色谱（HPLC）法测定脑络通胶囊中丹参酮Ⅱ A 含量的方法。方法 采用Shim-Pack LC-ODS（150mm×4.6mm，5μm）为色谱柱，以甲醇:水（80:20）为流动相，流速为1ml/min，紫外检测器波长于270nm测定，用回流法提取脑络通胶囊中的丹参酮Ⅱ A 。结果 丹参酮Ⅱ A 的浓度在0.2344～1.4064μg/ml（r=0.999960，n=6）范围内线性关系良好，回收率为97.80%。结论 本方法操作简便、精密度好，适用于脑络通胶囊的质量控制。
关键词 高效液相色谱 脑络通胶囊 丹参酮ⅡA
Determination of the contents of tanshinoneⅡ A in Naoluotong capsule with HPLC Tu Wensheng Guangxi Institute of Oncology，Nanning530021.
【Abstract】 Objective To establish the HPLC method for determination of tanshinoneⅡ A in Nao luotong capsule.Methods HPLC was performed on Shim-pack CLC-ODS（150mm×4.6mm，5μm）with methanol-water（80:20）as mobile phase.Flow rate was1ml/min and detecting wavelength was270nm.TanshinoneⅡ A in Nao luoˉtong capsule was extracted by reflux method.Results The calibration curve was linear in the concentration range of0.2344～1.4064μg/ml（r=0.999960，n=6）.Conclusion This method is simple，accurate，repeatable and effecˉtive for quality control of Naoluotong capsule.
Key words HPLC naonuotong capsule tanshinoneⅡ A 脑络通胶囊由丹参、盐酸托哌酮、川芎、甲基橙皮甙、黄芪、维生素B 6 组成。有补气活血、通经活络之功。具有扩张血管、增加脑血流量作用。用于脑血栓、脑动脉硬化、中风后遗症等治疗。本文用高效液相色谱（HPLC）法对脑络通胶囊中的丹参酮Ⅱ A 含量进行测定，方法操作简便、精密度好、结果可靠。
1 仪器与试药
1.1 仪器 10A高效液相色谱仪（日本岛津）:SPD-10A紫外检测器、CTO-10AS柱温箱;威玛通用多媒体色谱数据工作站（深圳深软电子有限公司）。
1.2 药品与试剂 脑络通胶囊（广西XX药业有限公司生产，批号:20031001;20031008;20031017），丹参酮Ⅱ A 标准品（中国药品生物制品检定所生产，批号:110766-200314），甲醇（色谱纯），高效蒸馏水。
2 色谱条件
色谱柱:Shim-Pack CLC-ODS（150mm×4.6mm，5μm）;柱温:40℃;流动相:甲醇:水（80:20V/V）;检测波长:270nm;流速:1ml/min。在上述色谱条件下，丹参酮Ⅱ A 的保留时间大约为11min;理论塔板数为7702，分离度大于1.5。
3 溶液制备
3.1 对照品溶液的制备 精密称取丹参酮Ⅱ A 标准品2.93 mg，置于50ml棕色容量瓶中，加甲醇溶解并定容到50ml，摇匀，即得58.6μg/ml的丹参酮Ⅱ A 对照品储备液。再精密吸取此储备液4.0ml置于100ml棕色容量瓶中，定容到刻度，即得2.344μg/ml的丹参酮Ⅱ A 对照品储备液供HPLC分析。
3.2 供试品溶液的制备 ［1，2］ 取不同批号的脑络通胶囊各20粒（0.5g/粒），去外壳后研磨，精密称取一定量，置于具塞锥形瓶中，精密加入50ml甲醇，密塞，称定质量，加热回流60min，放冷，密塞，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取中间续滤液约1.0ml，离心（15000r/min）10min，上清液供HPLC测定。
4 方法与结果
4.1 标准曲线及线性关系 分别精密量取丹参酮Ⅱ A 对照品储备液（2.344μg/ml）2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0ml置于20ml量瓶中，加甲醇定容到刻度，摇匀，各进样10μl，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，进行回归，得回归方程:Y=10513.223x+2659.99（r=0.999960，n=6）。结果表明，丹参酮Ⅱ A 在0.2334～1.4064μg/ml范围内线性关系良好。图谱见图1、2。
图1 对照品色谱 a:丹参酮Ⅱ A
图2 丹参酮Ⅱ A 标准曲线
4.2 精密度考察 丹参酮Ⅱ A 对照品溶液（2.344μg/ml）连续进样5次，每次进样量为5.0μl，峰面积积分值的RSD为1.35%。
4.3 精密度测定 取标准品溶液（2.344μg/ml），连续进样5次，每次进样量为5.0μl，测定丹参酮Ⅱ A 的含量，测定结果的RSD为1.14%。
4.4 加样回收率试验 取已测定含量（批号20031001，0.5g/粒）的脑络通胶囊，研磨，称取5份各2g左右，加入45.0ml甲醇和丹参酮Ⅱ A 对照品溶液（2.344μg/ml）3.0ml;其余制备步骤按“3.2”项，进样量为10μl，试验结果见表1。
表1 加样回收试验结 （略）
4.6 样品含量测定 取样品3批，分别按“3.2”项下操作，HPLC测定，各进样10μl，结果见图3、表2。
图3 样品色谱图 a:丹参酮Ⅱ A
表2 样品含量测定结果（略）
5 讨论
参照《中国药典》2000年版（一部） ［3］ 丹参项下丹参酮Ⅱ A 含量测定的方法，用甲醇作为溶剂，做索氏提取1h，置室温后，称重，用甲醇补足减失的重量，取续滤液1ml离心（15000r/min）10min，上清液作为高效液相色谱的样液。从图3中可见杂质峰对丹参酮Ⅱ A 主峰没有影响，此方法操作简单，重复性好，分离度能达到药典的要求，可作为脑络通胶囊的一个质控指标。
参考文献
1 滕桂珍，仲崇林，杨美林，等.HPLC法测定降脂益肝胶囊中丹参酮Ⅱ A 的含量.中国药房，2003，14（9）:558.
2 涂文升，梁佐力，刘宗河，等.HPLC法测定复方金蒲片中丹参酮Ⅱ A 的含量.中国药房，2003，14（11）:689.
3 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部），北京:化学工业出版社，2000，57.
作者单位:530021广西肿瘤防治研究所