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冰冻切片目前已成为大多数病理科的常规工作，随着临床诊断要求的不断提高，尤其对术中快速冰冻切片的诊断准确性的要求越来越高，这就更需要提高冰冻切片的质量。我们科室在制作冰冻切片过程中，也摸索到一些提高切片质量的可行方法，现和同行交流，报告如下。
1 材料与方法
1.1 标本 江苏省南通瑞慈医院手术室(2004年11月)送检的术中冰冻标本100余例。
1.2 固定液 A.A.F固定液(40%福尔马林液10ml，70%酒精液85ml，冰醋酸液5ml)。
1.3 染色液 Harris苏木精液、乙醇溶性伊红液。
1.4 恒冷箱冰冻切片机 LEICA CM1900，购自上海莱卡仪器公司。
1.5 方法与步骤 将术中送检组织取材后，置于恒冷箱冰冻切片机切片架上，待组织块冷冻变硬后切片，厚度为5～7μm。将切片贴附在载玻片上，空气中稍风干(1～2min)，后放入A.A.F固定液(≥2min)，梯度酒精液浸洗，水洗，1%铁明矾液中浸2～5次，充分水洗后苏木精染色1min(最好在50℃左右恒温箱内进行)，水洗，盐酸酒精液分化，水洗，PBS(pH 7.4)液复蓝，入乙醇溶性伊红染液染色10s(新配置的时间可缩短，陈旧者适当延长染色时间)，梯度酒精液逐级脱水，石炭酸、二甲苯液(1∶3)透明，中性树胶封片。
1.6 对照 另切取完全相同的切片，不采用铁明矾媒染处理，余步骤同前。
2 结果
2.1 未采用铁明矾处理的标本 结构欠清，细胞核浆不鲜明，对比度差，诊断困难。
2.2 采用铁明矾处理的标本 组织和细胞结构清晰，染色鲜艳，对比度高。
3 讨论
术中快速冰冻切片的诊断在一定程度上决定了临床上对患者采取何种手术方式，所以，病理诊断医生对切片的质量要求也不断提高。经过长时间的摸索我科积累了一些小经验：(1)采用梯度酒精，既可以延长固定时间，还可以防止脱片；(2)采用铁明矾，用1%浓度的铁明矾媒染后，核的颜色更深更鲜明，与胞浆对比度大。但媒染时间不能太长(不超过2min)，否则核发黑。但也要注意以下几点：(1)要求临床送检时，速度要快，组织袋中不要加任何固定液或生理盐水及不能用湿纱布包裹。(2)取材时刀片要锋利，应从刀柄处拉切到刀尖，忌采用切割式切取，镊取组织块要用无齿镊、动作轻柔、避免挤压等。(3)快速冰冻过程中的组织固定都不充分，复蓝不能用温热水，组织细胞核易膨胀，影响诊断。
作者单位： 226010 江苏南通，南通瑞慈医院病理科
(编辑：乔 晓)