壮医药线点灸对脾虚大鼠垂体β-EP的影响

　　【摘要】 

　　目的  探讨壮医药线点灸对实验性脾虚大鼠垂体β-内啡肽(β-endorphin,β-EP)的影响。

　　方法  用耗气、破气加饥饱失常法建立100只大鼠实验性脾虚模型，用放射免疫分析法检测壮医药线点灸治疗前后大鼠脑垂体及血浆中β-EP的含量，并设立空线点灸对照，中药四君子汤治疗对照、模型自然恢复对照及正常健康对照。

　　结果  脾虚大鼠脑垂体和血浆中的β-EP含量明显低于同期正常健康对照(P＜0.01)。壮医药线点灸治疗后，脑垂体及血浆中的β-EP含量明显增加，治疗前后比较差异有非常显著性(P＜0.01)；治疗后与同期模型组比较差异有非常显著性(P＜0.01)；与空线点灸治疗对照，中药治疗组比较差异无显著性(P＞0.05)。

　　结论  壮医药线点灸对实验性脾虚大鼠垂体β-EP有调整作用。

　　【关键词】  脾虚证；壮医药线点灸；β-内啡肽；垂体

　　Effects of medicated thread moxibustion of Zhuang traditional medicine on β-EP of pituitary in the rat of experimental spleen deficiency

　　LV Lin,CHEN Yong-hong,PANG Sheng-hang,et al.Guangxi Institute of Folk Medicine,Nanning 530001,China

　　【Abstract】 

　　Objective  To explore the effect of medicated thread moxibustion of Zhuang traditional medicine (MTMZ) on β-EP of pituitary in the rat of experimental spleen deficiency.

　　Methods  100 model rats of spleen defficiency were established by exhaustion,dissipating stagnant qi and irregular diet and they were divided into four groups randomly,a model group,a MTMZ group,a non-MTMZ group,a Si Jun Zi decoction (SJZD) group,as compared with the control group.β-EP contents in pituitary,plasma were determined by radioimmunoassay (RIA) before and after treatment.

　　Results  The β-EP levels in pituitary and plasma in the rat of spleen deficieney were lower than those in the health control group (P＜0.01).After treatment of MTMZ,β-EP levels in pituitary and plasma increased significantly,with very significant difference (P＜0.01) as compared with the model group,similar to those in the non-MTMZ,SJZD group (P＞0.05).

　　Conclusion  MTMZ has a regulatory action on β-EP in pituitary of rats with experimental spleen deficiency.

　　【Key words】  spleen deficiency；medicated thread moxibustion of Zhuang；β-endorphin；pituitary

　　随着神经内分泌免疫学科的不断深入研究，β-内啡肽(β-EP)作为一种具有广泛免疫调节作用的活性物质，越来越受到人们的关注。我们曾研究观察到，壮医药线点灸对脾虚大鼠下丘脑、胃、肠组织β-EP有调节作用［1］。垂体为神经内分泌整合机制的重要枢纽，有关壮医药线点灸治疗前后垂体中β-EP的含量变化，目前尚未见有报道。本实验用放射免疫法检测分析壮医药线点灸对脾虚大鼠垂体β-EP的影响，旨在探讨壮医药线点灸治疗脾虚的机制，为临床进一步推广应用这一民族医疗技法提供科学依据。

　　1  材料与方法

　　1.1  主要试剂及器材  β-EP放免药盒购自中国人民解放军第二军医大学神经生物教研室；中药厚朴、枳实、大黄、白术、茯苓、炙甘草购自南宁市医药公司。RIA检测仪为FT-646A型微机单头γ-放免仪(北京核仪器厂生产)。

　　1.2  动物选择及分组  选择健康雄性Ⅰ级Wistar大鼠100只〔广西医科大学医学实验动物中心提供，合格证号为桂动许字(2000)第001号〕，体重(200±20)g。按随机法分为5组：A组为正常对照组(简称正常组，20只)，B组为脾虚模型及自然恢复对照组(简称模型组，20只)，C组为壮医药线点灸治疗组(简称药线组，20只)，D组为无药空线点灸治疗组(简称空线组，20只)，E组为中药四君子汤治疗对照组(简称中药组，20只)。

　　1.3  模型制作及治疗方法

　　1.3.1  模型制作  厚朴、枳实、大黄以3∶3∶2比例常规水煎制成100%煎剂(g/ml)，除A组外，余组大鼠隔日灌胃上述煎剂1次，每次每只按1ml/100g体重给药。同时隔日喂食，连续造模6周。A组正常饲养，隔日灌喂同量饮水。

　　1.3.2  壮医药线点灸治疗方法  选用Ⅱ号药线(广西壮医医院提供)，施灸手法统一采用中手法。施灸的处方用穴为龙氏配方穴：脐周四穴、脾俞、胃俞、下关元、足三里(双)、食背(双)、趾背(双)、四缝(双)。每日治疗1次，连续点灸2周。

　　1.3.3  无药空线点灸治疗对照方法  除使用未经药物处理过的Ⅱ号空线点灸外，余法同壮医药线点灸治疗。

　　1.3.4  四君子汤治疗对照方法  四君子汤由人参、白术、茯苓、炙甘草四味组成。每味按2∶2∶2∶1比例，先经蒸馏水浸泡2h，煎煮2次后，过滤，合并滤液，浓缩至含生药量为2g/ml。按1ml/100g体重，每天经口灌胃口服，每日1次，连续用药2周。

　　1.3.5  脾虚模型自然复健法  模型建立后，B组不施加任何治疗因素，半数动物隔日按1ml/100mg体重口服灌胃正常饮水，自然恢复2周。

　　1.4  观察指标、标本收集及检验方法

　　1.4.1  观察指标  脾虚大鼠的见证：精神、活动动作、眯眼情况、毛发、耳色、体重、食量、粪便、拉尾排便反应。各指标按轻、中、重给予评分［2］，总积分达10分以上(含10分)者，确诊为脾虚证。垂体、血浆β-EP水平。

　　1.4.2  标本收集及检测方法  动物造模6周后各组取半数动物，治疗2周后各组另半数动物，禁食1夜，次日以戊巴比妥钠麻醉。(1)腹腔静脉取血2ml，立即注入预冷的加有0.3M EDTA-2Na 40μl和抑肽酶40μl的塑料试管内，混匀，迅速低温离心，取血浆，-40℃冰箱保存，待测β-EP。(2)大鼠断头处死后立即取垂体，在沸生理盐水中煮5min，滤干水分后，称重，加入1N HAC充分匀浆，1N NaOH中和，低温离心，取上清液，置-40℃冰箱保存，待测β-EP。β-EP测定采用RIA。按药盒说明书操作，测定中自设质量控制管，FT-646A型微机单头γ-放免仪自动检测。

　　2  结果

　　2.1  正常大鼠垂体中β-EP的含量  治疗前10只正常健康大鼠，测得垂体中β-EP的含量为(65.7±7.4)ng/mg(均值±标准误，下同)。血浆中β-EP的含量为(296.4±354)pg/ml。垂体中β-EP含量明显高于血浆中的β-EP含量。

　　2.2  脾虚模型大鼠垂体中β-EP的含量  所有实验组大鼠造模6周后脾虚见证积分值均＞10分，为(14.48±3.59)分。测得脾虚大鼠垂体中的β-EP含量为(50.2±8.1)ng/mg。脾虚大鼠血浆中的β-EP含量为(218.5±30.1)pg/ml。脾虚大鼠垂体与血浆中的β-EP明显低于同期正常健康对照组，差异有非常显著性(P＜0.01)。

　　2.3  壮医药线点灸治疗后脾虚大鼠垂体β-EP的含量  治疗前后各组垂体及血浆中的β-EP的含量变化见表1。

　　表1  治疗前后各组垂体及血浆β-EP的含量

　　注：与同期正常组比较，*P＜0.01；同组治疗前后比较，▲P＜0.01；与同期模型组比较，△P＜0.01

　　表1示：壮医药线点灸治疗脾虚大鼠2周后，大鼠垂体与血浆中的β-EP含量明显增加。药线组垂体β-EP含量由(51.4±7.6)ng/mg上升到(63.1±7.9)ng/mg；血浆β-EP由(229.3±33.6)pg/ml上升到(295.5±37.2)pg/ml。同组治疗前后比较差异有非常显著性(P＜0.01)；且与同期模型组比较差异也有非常显著性(P＜0.01)。与空线点灸治疗对照，中药四君子汤治疗对照组比较差异无显著性(P＞0.05)。

　　3  讨论

　　目前普遍认为中医“脾”的概念除涉及现代医学的消化、内分泌、神经、血液等系统的部分功能外，与免疫系统的功能也有密切联系。已有资料表明脾虚与机体的细胞免疫功能低下有一定的关系［3］。由于胃肠道富含肽能神经和淋巴细胞，肽类和免疫系统之间的相互关系，在消化系统中尤有特殊的意义。在众多的生物活性肽中，β-EP已被公认为具有较强免疫调节作用的活性肽之一，它参与机体的细胞免疫。神经中枢的β-EP因受血脑屏障的阻碍，进入外周循环比较困难，外周循环的β-EP主要来源于垂体和肾上腺［4，5］。本实验观察到脾虚大鼠脑垂体β-EP和外周循环血浆中的β-EP明显低于正常健康鼠。推测脾虚大鼠的一些症状，如：精神萎靡、眯眼、食量减少、体重下降、毛发不荣、溏便等与脾虚鼠垂体、血浆中的β-EP过低不能有效地维持正常的免疫功能有关。

　　壮医药线点灸是千百年来在广西壮族民间广为流传应用的一种特色疗法。该疗法对脾虚证有良好的疗效。已有研究资料证明：壮医药线点灸能提高脾虚患者的唾液淀粉酶负荷分泌水平，提高T淋巴细胞百分率、淋巴细胞转化率，增加脾脏指数和改善血象［2，6］。壮医治疗脾虚，着重强调“气”，即着重强调调动人体的气血使之趋于平衡。本研究在原有工作的基础上，进一步采用RIA探讨壮医药线点灸对脾虚大鼠神经内分泌免疫网络中(垂体)β-EP的影响。研究结果显示，壮医药线点灸治疗脾虚大鼠2周后，垂体组织内β-EP含量明显增加，血浆中的β-EP也随之明显上升，说明壮医药线点灸可以显著地促进垂体的β-EP的合成或分泌活动，对大鼠体内β-EP的水平有调节或调整作用。

　　本实验发现在相同治疗手法、相同处方用穴的情况下，壮医药线点灸与空线点灸对脾虚大鼠脑垂体β-EP的影响结果相似，两组治疗后的β-EP水平差异无显著性(P＞005)。提示手法和处方用穴在壮医线点灸治疗中起比较重要的作用。但在临床与本实验中，我们注意观察到，药线治疗操作比空线操作易于规范，药线燃点均匀、集中，火花较小，不伤皮肤；空线火花大，燃点散，燃线快，耗线多，易伤皮肤。因此，综合比较我们认为有药的点线比无药的点线好，药线更易于推广及规范。

　　【参考文献】

　　1  吕琳，陈永红，李延，等.壮医药线点灸对脾虚大鼠脑—肠轴β-内啡肽的影响.现代中西医结合杂志，2001，10(22)：5.

　　2  吕琳，韦金育，陈永红，等.壮医药线点灸不同手法对实验性脾虚证的影响.辽宁中医杂志，1997，24(8)：379.

　　3  Blaock JE,Smith EM.The immune system:our mobile brain.Immund Today,1985,5(6):115.

　　4  Genazzani AR.Evidence for a dopamineregulated peripheral source of circulatingendorphin.J Clin Endocrinol metab,1988,66:279.

　　5  王洪蓓，董晓彤，王双坤，等.不同频率电针对急性佐剂性关节炎大鼠痛反应和组织中β-内啡肽含量的影响.中国针灸，1998，18(3)：163.

　　6  吕琳，韦金育，陈永红，等.壮医药线点灸对脾虚患者唾液负荷分泌的影响.中国针灸，1998，18(7)：391.

　　作者单位：

　　1 530001 广西南宁，广西民族医药研究所

　　2 广西南宁，广西江滨医院

　　3 广西南宁，广西肿瘤防治研究所

　　(编辑：晓  青)