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【摘要】 目的 研究补肾疏肝复方乳康舒对实验性大鼠乳腺增生的治疗作用及抗氧化作用。方法 采用肌肉注射雌二醇和黄体酮法造成大鼠乳腺增生模型。乳康舒灌胃治疗4周后采用生物显微镜观察乳腺组织形态、采用全血检测血清SOD、GSH-Px活力和MDA含量。结果 乳康舒治疗组组织形态较模型对照组有明显差异；乳康舒大、中剂量组血清SOD活力比模型对照组均有显著增加，大剂量组血清GSH-Px活力比模型对照组显著增加，MDA含量显著减少。结论 本品对大鼠乳腺增生模型有明显治疗作用，具有一定的抗氧化作用。
【关键词】 乳康舒；乳腺增生；大鼠
乳腺增生病是一种好发于中青年女性的常见病，乳腺增生病有一定的癌变几率。中医药对乳腺增生的治疗具有独特的优势，本实验研究补肾疏肝复方乳康舒（RKS）对乳腺增生的治疗作用及抗氧化作用，为补肾疏肝中药治疗乳腺增生病、预防乳腺癌的发生提供实验依据。
1 实验材料
1.1 实验动物 健康SD大鼠，清洁级，体重120～220g，购于中科院上海实验动物中心，合格证号；中科（沪）动管第99004号。
1.2 实验药物 乳康舒（干粉）：8.5g生药/g干粉，批号20020114，本院药物分析室提供；乳增宁片：0.6g干浸膏/片，批号20011006，深圳三顺制药有限公司生产；苯甲酸雌二醇注射液：2mg/ml，批号20020101，上海通用药业股份有限公司生产；黄体酮注射液：20mg/ml，批号20011102；上海通用药业股份有限公司生产。
1.3 试剂盒 SOD试剂盒批号：20020603，GSH-Px试剂盒批号：20020605，MDA试剂盒批号：20020523，购于南京建成生物工程研究所。
1.4 主要仪器 贝克曼DU-640紫外分光光度计：美国产；Axioskop 2 plus高级生物显微镜及Axiovision图像分析处理系统：德国ZEISS公司产。
2 实验方法
2.1 造模方法 取雌性大鼠60只，随机分为6组，每组10只，分别为正常对照组、模型对照组、阳性药（乳增宁）组和RKS大、中、小剂量组。除正常对照组外，其余各组每鼠肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg/kg，每日1次，连续40天，继而改用肌肉注射黄体酮4mg/kg，每日1次，连续10天，此时大鼠乳头出现红、肿和增大，并有部分乳晕出现，大鼠乳腺增生模型形成［1，2］。注射完苯甲酸雌二醇后各组分别静滴给药，剂量见表1。正常对照组和模型对照组灌服蒸馏水，给药量均为10ml/kg，每日1次，连续给药4周。
2.2 实验及观测指标
2.2.1 乳康舒对乳腺增生大鼠病理组织变化的影响 给药4周后，取大鼠乳腺，10%中性甲醛溶液固定6~8h，3μm连续切片，HE染色，用ZEISS公司生产的Axioskop 2 plus高级生物显微镜观察，计数每视野的平均小叶数、导管数、每小叶的平均腺泡数及导管的平均直径。并用Axiovision图像分析处理系统采集、记录和分析图像（分辨率1300×1030），根据腺腔内分泌物的多少及范围分为（-）、（+）、（++）、（+++）、（++++），对应取值1、2、3、4、5计分。
2.2.2 乳康舒对乳腺增生大鼠血清SOD、GSH-Px活力和MDA含量的影响 给药4周后，大鼠摘眼球采血，按试剂盒说明书测定血清SOD活力、GSH-Px活力和MDA含量。
2.3 统计学方法 实验结果采用组间t检验统计处理。
3 结果
乳康舒对乳腺增生大鼠病理组织变化的影响，见表1。造模组大鼠乳腺腺体明显增大，颜色稍红，镜下观察：乳腺小叶数目略增多，腺泡数明显增多，腺腔明显扩张呈囊状，少数分支增多呈扭曲状，部分腺上皮细胞增生呈假复层排列，细胞约2~4层，腺腔内可见大量均质红染的分泌物，小叶的平均腺泡数、腺腔的平均直径及腺腔内分泌物比正常对照组均有显著增加（P<0.001）。给大鼠灌胃大、中、小剂量的乳康舒4周后，与模型组相比，大、中剂量组大鼠小叶中的平均腺泡数、腺腔的平均直径及腺腔内分泌物明显减小［P<（0.001~0.05）］，小剂量组大鼠的腺腔内分泌物也有明显减小（P<0.05）。表明本品对大鼠乳腺增生模型有明显治疗作用。表1 对乳腺增生大鼠病理组织变化的影响 注：与模型对照组比较（t检验），*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001
4 讨论
乳腺增生病属于祖国医学“乳癖”范畴，早在宋代《圣济总录》就认识到本病的发生与“冲任不和”有关，提出“妇人以冲任为本，若失于将理，冲任不和……则气壅不散，结聚乳间，或硬或肿，疼痛有核”。明代陈实功认为：“多由思虑伤脾，恼怒伤肝，郁结而成”。清代余听鸿《外科医案汇编》云：“乳中结核，虽云肝病，其本在肾”。“冲任之气血上行为乳，下行为经”，“冲任无本脏”，“冲任二脉隶属于肝肾”。肝藏血，主疏泄亦主乎冲任之气血；肝藏血及主疏泄的功能有赖于肾气的温煦资助，肾气不足，则肝失所养，肝气郁结，肝失疏泄，经前之气血聚于冲任，经脉壅阻，故疼痛加剧，乳块增大；经后血海空虚，乳痛稍减，但血脉凝滞，久而不散致结块不消而成乳癖。基于这一认识，笔者认为乳腺增生病肾气不足是病之本，气滞血瘀是病之标，肝气郁结是病之因，冲任失调是病之机；治当补肾疏肝。
乳康舒由鹿角片、淫羊藿、白芍、郁金、丹参、王不留行组成。方中鹿角片益肾补肝，调摄冲任，活血消瘀；淫羊藿温补肾阳，白芍养血和血，敛阴柔肝，缓急止痛；淫羊藿、白芍同用，温肾阳补肝体助肝用；“一味丹参功同四物”，重用丹参养血活血调经；郁金为血分之气药，行气活血止痛，解郁清心；丹参、郁金同用，疏肝行气活血，调理冲任；王不留行“能走血分，乃阳明冲任之药……性行而不住也”。诸药合用，共奏补肾疏肝，行气活血，调理冲任，止痛散结之功。本实验采用肌肉注射雌二醇和黄体酮法造成大鼠乳腺增生模型，使用补肾疏肝复方治疗，结果显示补肾疏肝复方对大鼠乳腺增生有显著治疗作用。
乳腺增生病可增加乳腺癌发生的危险性。明·龚居中《外科活人定本》有云：“何为之癖，若硬而不痛，如玩核之类，过久成毒”。流行病及病因学，以及病理学研究表明乳腺增生病与乳腺癌具有相同的发病因子。20世纪末，人们对乳腺癌的发生机制提出了多阶段发展模式的假说，认为正常乳腺上皮向恶性转化经历一个由增生到不典型增生到原位癌再到浸润癌的渐进过程。氧自由基在致癌过程中扮演重要角色，本实验表明补肾疏肝复方可显著提高乳腺增生大鼠血清SOD、GSH-Px活力，减少MDA含量，具有一定的抗氧化作用，其对乳腺癌的发生具有潜在的干预作用，值得进一步研究。
【参考文献】
1 孙勤国，安炳仁，王建久，等.乳复康片治疗乳腺增生病的实验研究.中国实验方剂学杂志，2000，6（1）：40.
2 饶金才，李兰珍，陈云生，等.乳腺增生病动物模型的复制与病理类型.中国病理生理杂志社，1992，8（6）：671.
*基金项目：江苏省科技厅社会发展资助课题（编号：BS2000075）
作者单位： 210028 江苏南京，江苏省中医药研究院
（编辑：田 雨）