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【摘要】 目的 研究中药复方制剂三拗芎葶合剂对低氧性肺动脉高压大鼠血浆C型利钠肽（CNP）和心钠肽（ANP）的影响，并初步探讨其作用机制。方法 利用常压缺氧的方法复制低氧性肺动脉高压大鼠模型。雄性SD大鼠50只，随机分为5组：空白对照组、模型组、三拗芎葶合剂中剂量组、三拗芎葶合剂高剂量组及卡托普利组，每组10只。测定各组平均肺动脉压（mPAP），右室肥厚指数（RVHI），放免法测定血浆CNP和ANP水平。结果 三拗芎葶合剂及卡托普利均能明显降低模型大鼠的mPAP、RV／LV+S；三拗芎葶合剂各剂量组与卡托普利组疗效相当；三拗芎葶合剂及卡托普利均能部分逆转模型大鼠的肺血管重构，降低血浆CNP/ANP水平。但治疗组的上述各指标仍未完全恢复到空白对照组水平。结论 三拗芎葶合剂能有效降低肺心病模型大鼠的肺动脉高压，部分逆转肺血管结构重建，改善右心功能，可显著降低大鼠血浆C型利钠肽和心钠肽水平。
【关键词】 三拗芎葶合剂；低氧性肺动脉高压；C型利钠肽；心钠肽
Effect of SanAoXiongTing mixture on dosage-dependence to big rat's CNP，ANP suffered from hypoxic pulmonary hypertension
YANG Ren -xu，CHANG Sheng-jie，LU Xiao-long.Chengdu University of TCM，Chengdu 610072，China
［Abstract］ Objective To study the influences of SanAoXiongTing mixture on dosage-dependence to big rat's CNP，ANP that has been suffered from HPH and probe into its function mechanism tentatively.Methods We Utilized the method which was short of oxygen of the atmosphere to duplicate hypoxie big mouse's model of high pressure of lung artery.Fifty big mice of male SD were divided into 5 groups at random: contrast group，model group，while captopril solution group，big-dosage group of Chinese Medicine，mid-dosage group，10 in every group.Respectively examining mPAP，calculating the plump index（RV/LV+S）of right heart，and examining CNP，ANP with the method of radiation and immunity.Results SanAoXiongTing mixture on dosage-dependence and captopril solution group can reduce mPAP，RV/LV+S of mouse obviously，SanAoXiongTing mixture on dosage-dependence group is equivalent to captopril solution group.SanAoXiongTing mixture on dosage-dependence group and captopril solution group can reverse model lung blood vessel of mouse construction again obviously，reduce CNP，ANP level.But every index above-mentioned in treatment the group can not totally resume to contrasting group's level normally yet.Conclusion SanAoXiongTing mixture on dosage-dependence can reduce pulmonary arterial hypertension of model mouse effectively，the lung blood vessel structure is rebuilt to reverse partly，improve the right heart function，it can reduce plasma CNP，ANP notably.
［Key words］ SanAoXiongTing mixture on dosage-dependence；hypoxic pulmonary hypertention;CNP；ANP
缺氧性肺动脉高压（HPH）是肺源性心脏病发病过程中的中心环节，HPH的产生及严重程度明显影响着肺心病的病程及预后，因此有关发病机制及治疗的研究一直是国内外研究的重点和热点。缺氧引起肺动脉高压时，心房扩张及心房压力增加可刺激心房利钠肽（ANP）的释放，同时血浆中的C型利钠肽（CNP）分泌增加［1］。近几年来，笔者在开展三拗芎葶合剂治疗慢性阻塞性肺疾病［2］取得较好疗效，在此基础上进行三拗芎葶合剂对低氧性肺动脉高压大鼠血浆C型利钠肽和心房利钠肽分泌的影响，并初步探讨其作用机制的实验研究，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 实验动物与分组 健康成年雄性SD大鼠（雄性）50只，体重192.3～237.8 g，由四川省中医研究院实验动物中心提供［实验动物合格证：scxk（111）2004-15］。随机分为空白对照组、模型组、中药中高量组、中药中剂量组、卡托普利组，每组10只，分笼饲养，自由饮水和摄食（全价颗粒饲料）。
1.2 实验药物及试剂 三拗芎葶合剂（由麻黄、杏仁、葶苈子、川芎等药物组成）：由四川中药材公司提供合格药材，经成都中医药大学附属医院药剂加工厂煎煮、回收挥发性成分、浓缩制成浓度为100%的药液（每1 ml药液含生药1 g）。给药剂量：大高剂量相当于生药11 g/L，中剂量相当于生药5.5 g/L。卡托普利：安徽仁济制药有限公司生产，批号：060412；给药剂量为5 mg/kg。ANP、CNP放免试剂盒：由解放军总医院科技开发中心免疫所提供。氮气：四川拓展特种气体有限责任公司提供。
1.3 实验方法 除空白对照组外，将各组大鼠采用国内外普遍使用的常压缺氧法制造HPH模型，参考郭胜祥及梁国容的方法［3，4］，制造低氧箱每天缺氧6～7 h，每周缺氧6天，氧浓度控制在（10±0.5）％。连续造模3周后，2～5组大鼠在入舱前1 h分别以生理盐水、三拗芎葶合剂高剂量、三拗芎葶合剂中剂量、卡托普利混悬液灌胃，各组大鼠所给药液体积相同，每日1次，连续给药28天，至检查前24 h停药。出仓后各组大鼠在温度、湿度相同的房间喂养。
1.4 观察指标血流动力学指标 按鲁亚南等报道右心导管法［5］，经右侧颈外静脉插入右心导管连接多导生理记录仪测定肺动脉压，包括肺动脉收缩压（PASP）、舒张压（PADP）、肺动脉平均压（mPAP），用放射免疫非平衡法测定血浆ANP、CNP水平。
1.5 统计学分析 所得数据以均数±标准差（x±s）表示，采用SPSS 11.5统计软件包进行处理，多样本均数比较采用单因素方差分析，两两比较采用student-Newman-Keulsg检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 血流动力学和右心室肥厚指标 见表1。检测结果显示模型组的mPAP、PASP及PADP和RVHI均明显高于空白对照组（P<0.01），表明低氧性肺动脉高压模型复制成功。与模型组比较，中药三拗芎葶合剂各剂量组及卡托普利组的肺动脉压，右室肥厚指数皆显著降低（P<0.05，或P<0.01），但各治疗组与空白对照组相比，未到正常组水平，表明该药有防治作用。
2.2 三拗芎葶合剂对各组大鼠血浆ANP、CNP 的影响 见表2。实验结果显示模型鼠血浆ANP、CNP水平明显升高；三拗芎葶合剂与卡托普利均能降低ANP、CNP水平，见表2。
2.3 肺组织重量 各组大鼠肺组织重量比较见表3。可以看出造模大鼠的肺湿重（wW）及肺渗出指数（wW／BW）分别比空白对照组平均增加29％和88％。与模型组比较，三拗芎葶合剂各剂量组均明显减轻wW和wW／BW（P<0.05）；卡托普利组也降低了wW／BW（P<0.05），但各剂量治疗组与空白对照组相比，值仍较高（P<0.05）。 表1 各组大鼠肺血流动力学状态和右室肥厚指数对比注：RV为右心室自由壁，LV+S为左心室及室间隔。与空白对照组比较，*P<0.01，△P<0.05；与模型组比较，#P<0.01，▲P<0.05表2 各组大鼠血浆ANP、CNP水平比较注：与空白对照组比较，▲P<0.05，*P<0.01；与模型组比较，△P<0.05，#P<0.01表3 各组大鼠wW、肺渗出指数（wW/BW）比较 注：wW为肺湿重，BW为体重。与空白对照组比较，*P>0.05，△P<0.01；与模型组比较，▲P<0.05
3 讨论
3.1 中医对低氧性肺动脉高压的认识 历代中医著作中对本病从病因病机到治疗均有详细的论述。如《灵枢·胀论》曰：“肺胀者，虚满而喘咳”。《诸病源候论·咳逆短气候》在论述肺胀成因时说“肺虚为微寒所伤则咳嗽，嗽则气还于肺间则肺胀，肺胀则气逆，而肺本虚，气为不足，复为邪所乘，用壅塞不能宣畅。故咳逆短乏气也”。《丹溪心法·咳嗽》则认识到“肺胀而咳，或左或右不得眠，此痰夹瘀血碍气而病”。均认识到本病病因主要是久病肺虚，痰瘀潴留，每因复感外邪诱发。其病理因素不但有气逆、痰饮，而且气滞可致血瘀，引起痰（饮）、气、瘀互结阻肺而病变不易痊愈。
3.2 组方立法依据 本病的特点是肺、脾、肾正虚的基础上复感外邪，致痰浊壅肺，气滞血瘀，气道不利，肺失宣降为基本病理机制。治疗当以宣肺祛邪、降气化痰、活血化瘀为法。三拗芎葶合剂由麻黄、杏仁、葶苈子、川芎等药组成，麻黄辛温宣肺，散寒利水；杏仁味苦宣降，止咳平喘；川芎辛散温通，活血行气；葶苈子下气行水，涤痰平喘。四药配伍，共奏宣肺利水、降气平喘、活血化瘀之功。现代药理研究证实，麻黄所含成分具有松弛平滑肌、解热、抗病毒、利尿、增加心输出量、抗过敏、抗氧化的作用［6，7］；杏仁具有止咳平喘、润肠通便、抗炎镇痛、抗肿瘤等作用［8］；川芎嗪可抑制钙离子内流而扩张血管，增加心输出量及改善肺功能［9］，对低氧性肺动脉高压具有治疗作用［10］；葶苈子能缓解平滑肌痉挛可止咳平喘，且含强心苷可增加心输出量，以及抗菌、抗癌、调血脂等作用［11］。综上所述，三拗芎葶合剂全方具有松弛平滑肌、抗菌消炎、降低肺血管阻力、降低血液黏度、正性肌力和利尿等作用。符合中医辨证施治原则，又寓现代医学治法之意于其中。
3.3 三拗芎葶合剂作用机制探讨 （1）三拗芎葶合剂对HPH的影响：HPH是肺心病发生、发展的病理生理学基础，中重度COPD和肺心病，都表现为肺血管阻力增加，导致肺动脉高压。本实验结果表明，模型组的PASP、PADP、mPAP均较空白对照组明显升高（P<0.01），三拗芎葶合剂及卡托普利治疗后肺动脉压力皆显著降低，表明三拗芎葶合剂确能部分降低HPH大鼠的肺动脉高压，防止其损害程度进行性加重。（2）三拗芎葶合剂对模型大鼠心肺组织重量的影响：模型大鼠的肺湿重及肺渗出指数均显著高于空白对照组，同时右心室壁显著增厚，表明伴有肺局部水肿的肺动脉高压动物模型复制成功。三拗芎葶合剂各剂量治疗组及卡托普利组均可减轻模型大鼠的肺炎性渗出，部分逆转右心室肥厚。表明三拗芎葶合剂可能通过保护血管内皮细胞，减轻肺组织的炎性渗出，延缓心肺组织的病变，从而起到对肺心病的治疗作用。（3）三拗芎葶合剂对ANP、CNP的影响：心房利钠肽（ANP）是由心房肌细胞分泌的含有28个氨基酸（Aa）的多肽，具有排钠利尿、松弛血管平滑肌及抑制醛固酮分泌等作用［12］。C型利钠肽是由于ANP结构同源的含有22个Aa组成，它由血管内皮细胞合成，是一种新型的血管活动调节肽，并以自分泌或旁分泌的方式作用于血管平滑肌，具有抑制平滑肌细胞增殖作用及扩血管作用［13］。在低氧性肺动脉高压病理状态时，机体可以通过自分泌和旁分泌ANP和CNP，而产生内源性保护［14］。通过本次实验研究，表明三拗芎葶合剂可以舒张肺动脉，改善氧合，从而反馈性抑制了血浆ANP和CNP分泌，调节血管活性因子，对HPH具有防治作用。
缺氧作为一种启动因素，造成肺血管收缩及结构重塑，引起肺动脉高压，而中药复方制剂三拗芎葶合剂可以降低肺心病模型大鼠的肺动脉高压，部分逆转肺血管结构重建，改善右心功能，反馈性抑制HPH大鼠血浆C型利钠肽和心钠肽分泌。研究表明肺血管的重塑有一定的可逆性，提示应该发挥中医药防治低氧性肺动脉高压的优势，将各种血管活性因子调整在平衡状态，以此作为防治的靶点进行深入研究。
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（编辑：乔 雨）
作者单位：1 610072 四川成都，成都中医药大学附属医院2 610075 四川成都，成都中医药大学（在读硕士）