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【摘要】 目的探讨MxA蛋白与过敏性紫癜(HSP)发病的相关性。方法对29例HSP患儿及14例正常儿童用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞MxA蛋白，ELISA法检测血清IFN|α及柯萨奇B组病毒（CBV）-IgM、EB病毒（EBV）-IgM、腺病毒（ADV）-IgM。结果①HSP组MxA蛋白阳性率与对照组比较差异有高度统计意义（P<0.01）；②HSP组IFN|α阳性率与对照组比较差异有统计意义（P<0.05）；③HSP组CBV|IgM、EBV|IgM、ADV|IgM阳性率与对照组比较差异无统计意义（P>0.05）；④HSP组MxA蛋白与IFN|α阳性率比较差异有统计意义（P<0.05）。结论病毒感染可能是过敏性紫癜发病的重要诱因；MxA蛋白可以作为检测病毒感染较理想的指标。
【关键词】 过敏性紫癜 病毒感染 MxA蛋白
过敏性紫癜(HSP)是儿科常见的系统性血管炎，可累及心、脑、肾等重要器官。近年来其发病率呈增高趋势[1]，病毒感染可能是其发病的重要诱因[2]。国内主要通过检测IFN|α及病毒抗原抗体来探讨其与过敏性紫癜的关系。目前有研究发现，MxA蛋白与病毒感染具有密切关系[3]。本文拟通过检测HSP患儿以及正常对照组儿童淋巴细胞MxA蛋白，血清IFN|α及柯萨奇B组病毒（CBV）-IgM、EB病毒（EBV）-IgM、腺病毒（ADV）-IgM来探讨它们与HSP发病的关系。
1 资料与方法
1.1 一般资料
HSP组29例，为2007年11月至2008年4月在兰州大学第一医院儿科门诊及住院的HSP患儿，男13例，女16例；年龄3～14岁（平均8.3岁）；入院时病程1～7 d。均符合1990年美国风湿病协会HSP诊断标准[4]。29例均有典型皮疹，其中合并关节症状16例，合并胃肠症状12例，合并肾损7例，合并神经系统症状1例。对照组14例，为同期门诊正常体检儿童，男6例，女8例；年龄2～13岁（平均7.5岁）。2组性别、年龄比较差异无统计意义（P>0.05）。2组均于首次就诊次晨分别采集EDTA抗凝血0.5 mL，检测MxA蛋白；自然凝集血2 mL，保留血清，检测IFN|α和CBV|IgM、EBV|IgM、ADV|IgM。
1.2 方法
1.2.1 流式细胞计数法检测淋巴细胞中MxA蛋白含量[5]
EDTA抗凝血100 μL入FACS管，固定破膜剂（购自杭州联科生物技术有限公司）A100 μL固定15 min，洗涤，固定破膜剂B100 μL破膜20 min，加入小鼠抗人MxA蛋白IgG2（M143,试剂由德国弗莱堡大学George Kochs教授惠赠），避光孵育20 min，洗涤，加入FITC标记的兔抗小鼠IgG（购自上海史瑞可生物科技有限公司），避光孵育20 min。洗涤后上流式细胞仪检测MxA蛋白含量，结果以计数资料表示，正常上限为对照组MxA蛋白平均荧光阳性细胞率的均数+标准差×3。
1.2.2 ELISA法检测血清CBV|IgM、EBV|IgM、ADV|IgM和IFN|α
IFN|α、CBV|IgM酶标免疫试剂盒购自美国ADL公司，CBV|IgM、EBV|IgM、ADV|IgM酶标免疫试剂盒购自上海贝西生物科技有限公司。实验步骤及结果判定按说明书进行。
1.3 统计学处理
采用SPSS 15.0软件包进行统计学分析，2组别之间的比较采用Fisher精确概率法。以P<0.05为差异有统计意义。
2 结果
结果见表1、表2。表12组MxA蛋白和IFN|α阳性率比较注：与对照组比较＃P<0.05，＃＃P<0.01；与同组IFN|α指标比较▼P<0.05 表22组CBV|IgM、EBV|IgM及ADV|IgM阳性率比较CBV|IgM、EBV|IgM及ADV|IgM阳性率比较，差异均无统计意义，P>0.05。
3 讨论
HSP是儿科常见的全身小血管变态反应性疾病，涉及多个系统和脏器，以皮肤、关节、胃肠和肾损害常见。HSP的病因尚不明确[6]。有关各种病毒，如CBV、EBV、ADV、细小病毒B19等在HSP中的研究很多，但对于其发病与HSP的相关性，各地报道不甚一致[7]。
本文通过检测29例HSP患儿以及14例正常儿童的MxA蛋白、IFN|α以及CBV|IgM、 EBV|IgM、ADV|IgM，结果发现，HSP组MxA蛋白及IFN|α的阳性率明显高于对照组（P=0.005和P=0.018），而HSP组与对照组的CBV|IgM、 EBV|IgM、ADV|IgM阳性率差异无统计意义。并且还发现HSP组MxA蛋白与IFN|α的阳性率比较，差异具有统计意义。
MxA蛋白是一种由IFN|α/β特异诱导的胞浆动态蛋白样GTP酶，分子量78 kD，具有广谱抗病毒活性。多种病毒如麻疹病毒、巨细胞病毒、ADV和EBV感染人体后，检测证实有MxA蛋白高表达[8]。目前国外研究表明，MxA蛋白在儿童急性哮喘中可作为病毒感染理想的指标[5]。但其与HSP发病的相关性却鲜有报道。作为检测病毒感染的指标，MxA蛋白的敏感性和特异性均很高；且半衰期较长，易于检测；比其他干扰素诱导蛋白如2’,5’-寡腺苷酸合成酶以及IFN|α更可靠；在病毒感染后至少10 d内MxA蛋白仍维持较高的表达水平[3]。目前研究的所有有核细胞均可表达MxA蛋白，在外周血单个核细胞中MxA蛋白的诱导含量很高，且存在剂量依赖性。国外的研究表明MxA蛋白在多种疾病中均可作为病毒感染的检测指标，且可能仅在真性病毒感染情况下表达升高[9]。IFN|α为人体感染病毒后机体广谱的抗病毒蛋白，并且是病毒感染的指标。但由于半衰期较短，使其临床应用受到限制[10]。由于HSP发病可能与多种病毒感染有关，因此仅通过检测CBV|IgM、 EBV|IgM、ADV|IgM可能阳性率较低，不能全面反映病毒感染与该种疾病的关系。本文结果表明：HSP与病毒感染具有相关性，且MxA蛋白可作为探讨HSP与病毒感染较好的指标。
【参考文献】
[1]李晔，郑华玲.儿童过敏性紫癜108例临床分析[J].陕西医学杂志,2004，33（10）：895-896，899.
[2]郝文，方琪玮，吴宝铮.过敏性紫癜及紫癜肾与病毒感染关系探讨[J].山西医科大学学报，2002，33（5）：429-430.
[3]贡海蓉，徐仑.MxA蛋白研究进展及其在儿科的应用[J].国外医学·儿科学分册，1999，26（5）：239-242.
[4]Mills J A, Michel B A, Bloch D A, et al. The American College of Rheumatology 1990 criteria for the classification of Henoch|Schnlein purpura[J]. Arthritis Rheum, 1990，33(8):1114-1121.
[5]Itazawa T, Adachi Y, Nakabayashi M, et al.Theophylline metabolism in acute asthma with MxA|indicated viral infection[J]. Pediatr Int, 2006，48(1):54-57.
[6]张交生，宋丽君.过敏性紫癜病因及发病机制的最新研究进展[J].国际儿科学杂志，2006，33（4）：264-266.
[7]Yang Y H, Chuang Y H, Wang L C, et al.The immunobiology of Henoch|Schnlein purpura[J].Autoimmun Rev, 2008，7(3):179-184.
[8]Porter B F, Ambrus A, Storts R W. Immunohistochemical evaluation of MxA protein expression in canine encephalitides[J]. Vet Pathol, 2006，43(6):981-987.
[9]Rump J A, Jakschiess D, Walker U, et al.Common variable immunodeficiency (CVID) and MxA|protein expression in blood leucocytes[J]. Clin Exp Immunol, 1995，101(1):89-93.
作者单位：兰州大学第一医院，甘肃兰州730000