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为了监测造血干细胞移植后效果利用复合扩增微卫星DNA结合毛细管电泳技术对3例外周造血干细胞移植进行了监测。
1 资料与方法
1.1 一般资料 临床确诊白血病患者3例，供、受者血样采用PCR-SSP方法检测HLA-A、B、DR位点，其中病例1为半相合；病例2和病例3为全相合。采集供者和受者在术前、术后28天～3个月间ACD抗凝静脉血3.0ml，-20℃保存。
1.2 方法 采用Gentra试剂盒提取DNA。PCR反应总体积25μl，按照95℃11min预变性，94℃ 1min→59℃ 1min→72℃ 1min，28个循环，60℃延伸60min进行PCR扩增。利用ABI 3100遗传分析仪进行电泳，收集数据分析各位点基因型。
2 结果
见表1。
表1 患者和供者均具有不同的STR分型图（略）
3 讨论
微卫星（microsatellite analysis）即短串联重复序列(short tandem repeat，STR)，它是由2～6bp重复单位构成的DNA序列，通常多态性片段长度在100～300bp。目前STR分析已广泛应用于遗传制图、连锁性分析、亲子鉴定、疾病基因定位和物种多态性研究等诸多领域。STR是迄今为止唯一能从微量（ng水平）DNA进行遗传学分析的方法，可以敏感的显示出骨髓移植物的植入状态［1,2］。本实验结果显示病例1为HLA半相合，虽然临床上有缓解症状，但是移植后第28天利用复合扩增微卫星DNA技术没有检测到供者基因植入的迹象。病例2和病例3为HLA全相合，移植后呈全植入状态，患者移植后造血重建，为完全供者型，受者自身血细胞的基因消失。
综上所述，复合扩增微卫星DNA技术是精确识别移植物植入状态的金标准，可以作为骨髓移植后早期识别移植物植入、检测残留白血病细胞、预测移植效果的有效方法，根据临床表现和其他实验室检查结果，在移植后多次采血送检，进行动态的监测，为临床制定治疗方案提供可靠依据。
【参考文献】
1肖露露，郭坤元，陈烘涛，等.荧光标记复合扩增短串联重复序列基因分析骨髓移植物的植入.中华血液学杂志，2001，22（8）：418-422.
2 邹红岩，李桢，邓志辉，等.混合脐血成人移植定量监测植入状态的实验研究.中国实验血液学杂志，2004，12（2）：179-184.
(编辑：李 令)
作者单位： 266071 山东青岛，青岛市中心血站输血研究所