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［关键词］ 姬松茸颗粒;多糖;含量测定
姬松茸（Agaricus Blazei Murill）又名巴西蘑菇，是一种珍贵的兼具食药价值的真菌，具有提高免疫力、抗癌、抗凝血、降血脂、安神等功效［1］ 。姬松茸多糖是姬松茸中非常重要的一类有效成份［2］ ，姬松茸颗粒剂是由姬松茸提取物经加工而制成。本文主要介绍采用苯酚一硫酸法测定姬松茸多糖中多糖的含量，其方法简单，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
VU-210紫外-分光光度计（日本岛津），葡萄糖对照品（分析纯），浓硫酸、苯酚（均为分析纯），姬松茸颗粒自制。
1.2 方法
1.2.1 对照品和供试品的制备
①对照品溶液:精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖4.16mg，置于100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。②供试品溶液:精密称取本品0.1g，加水2ml，超声处理5min使溶解，加入无水乙醇6ml，放置10min，离心弃去上清液，沉淀加水溶解，用SephadexG-200柱（2.5cm×17cm）层析［2］ ，先用0.1mol.L NaCl溶液洗至无糖检出，再用3.9mol.L NaCl溶液洗脱，收集洗脱液，适当浓缩，置于1000ml容量瓶中摇匀作供试品溶液。
1.2.2 标准曲线的绘制
精密量取葡萄糖对照品溶液0.25ml、0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml，另取2.0ml水作空白，分别置于10ml具塞试管中各加水至2.0ml，加入新配制的6%苯酚溶液1.0ml，置冷水中迅速滴加硫酸5.0ml，并于冷水中放置5min摇匀，再于沸水中加热15min，再次置于冷水浴中5min取出，于490nm处测定吸光度。以葡萄糖用量（浓度）为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。葡萄糖0.0013～0.0104mg.ml范围内线性良好，r=0.9993。
1.2.3 精密度试验
取上述标准溶液0.0013mg.ml、0.0052mg.ml、0.0104mg.ml分别检测5次，得RDS分别为0.52%、0.82%、0.74%。
1.2.4 稳定性试验
取上述品溶液0.0013mg.ml、0.0052mg.ml、0.0104mg.ml间隔一定时间测吸收度。结果表明，供试品液在显色后5h内吸光度基本稳定，RSD分别为0.58%、1.23%、0.96%。
1.2.5 回收率试验
取供试品溶液6份，每份1.0ml，分别加入无水葡萄糖对照品溶液0.5ml，按标准曲线项下的含量测定方法，测吸光度，计算回收率，平均回收率为99.32%，RSD=1.37（n=6）。
2 结果
取不同批号的姬松茸颗粒3批按上述供试品溶液制备，分别取供试品溶液1.0ml，另取水2.0ml作空白，分别至于10ml具塞试管中，加水至2.0ml，然后按标准曲线下测定方法测定，结果见表1。表1 样品测定结果（略）
3 讨论
本品中含有较多的多糖，同时辅料对多糖的测定产生了干扰，采用SephadexG-200柱分离后检测，虽然不能代表颗粒中总多糖的含量，却代表了其中的特征成份蛋白多糖［3］ 。滴加硫酸时，由于放热反应剧烈，为控制反应速度将试管置于冷水中冷却，测得的结果较稳定，重现性好。由于分离提纯相应的多糖标准品较困难，因此本实验采用葡萄糖作对照品，测得结果是以多糖的水解产物单糖来表示多糖的含量。
［参考文献］
［1］沈爱英，谷文英.姬松茸子实体水溶性多糖提取工艺的研究［J］.中国食用菌，2002，21（1）:15-17.
［2］水野卓，川合正允.きのこの化学、生物化学［M］.学会出版社，1992.223-228.
［3］陈石良，谷文英.水溶性蛋白聚糖AP-1的分离纯化和鉴定［J］.无锡轻工大学学报，2000，19（1）:50-53.
（佳木斯大学附属第一医院血液科，黑龙江佳木斯154002）
（编辑:雷 艳）