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以前我站献血者Rh血型的筛查采用手工操作。每天用手工处理数以百计的标本,时间长,耗材成本高,操作过程易造成加样错误。为解决上述问题,我站于2001年开始用全自动样本处理系统对Rh血型进行筛查,具体应用如下。
1 对象与方法
1.1 检测对象 我站2003年12月~2005年12月的献血者全血样本66733份。
1.2 试剂与仪器 RhD检测试剂(加拿大);STAR全自动加样器(瑞士Hamilton公司);Z-380型平板离心机(德国);Anthos Ts孵育振荡器(奥地利);Anthos HTⅢ多功能酶标仪(奥地利);96孔硬质U型板(浙江黄岩塑料医用制品厂)。
1.3 对样本做红细胞稀释处理 血标本为抗凝血,以便吸取底层RBC做D抗原的检测。首先自动加样仪对被检血样自动读取条码识别,然后取空白U型板1块,用自动加样仪上的8根加样针快速分配0.9%NaCl液(200μl/孔),稀释RhD定型所需的待检红细胞;用8根加样针分别从待检样本中同时吸取8份抗凝红细胞各20μl到预稀释板的反应孔中(加样顺序从A1~H1),并将针头插入液面以下吸取100μl,反复混匀2次待用。
1.4 RhD定型 (1)取1块空白96孔U型板作为RhD定型反应板,用加样仪上的8根加样针同时快速从预稀释板上吸取15μl稀释好的待检红细胞(吸样顺序A1~H1到A12~H12)对应加到反应板中(注样顺序A1~H1到A12~H12),依次完成待检样本后,仪器自动冲洗管道及加样针。(2)用加样针快速分配抗-D试剂15μl到反应板中(顺序从A1~H1到A12~H12),仪器自动冲洗管道及加样针后,再分配0.9%NaCl液30μl到反应板中(顺序从A1~H1到A12~H12)。(3)将反应板放入平板离心机(1000r/min)离心1min,再将其放入Anthos Ts孵育振荡器(300r/min)振荡2min。取出置于Anthos HTⅢ多功能酶标仪上判读结果。
2 结果
从66733份样本中,共筛查RhD阴性241例。再用试管法做确证试验,其中阴性227例,阳性14例,符合率达94.2%。
3 讨论
本站利用全自动样本处理系统,对大批量献血者样本进行Rh阴性血型的筛查,比以前的手工操作缩短了时间,节约了试剂,有效排除了人为误差,使检测过程程序化,判读标准化,结果数据化,既安全准确又提高了工作效率,并且符合我站遵守的ISO9001国际标准质量管理体系的要求。用本法常规筛查大批量样本,可及时检出RhD阴性者,并将筛查结果保存在计算机中,通过网络传输便于查询。
【参考文献】
1 曾劲峰,张红.全自动样本处理仪在血型检测中的应用.中国输血杂志,2005,18(2):132.
(编辑:宋 青)
作者单位: 264003 山东烟台,烟台市中心血站