点击显示 收起
【摘要】 目的 研究植物提取物对高脂高糖+链脲佐菌素（STZ）造模大鼠的生化指标及胰腺组织的影响。方法 通过对大鼠采用高脂高糖饲养30天后，一次性腹腔注射低剂量STZ（30mg/kg），继以植物提取物治疗30天后，进行各组生化指标及胰腺组织病理检查，以观察植物提取物的作用。结果 （1）利用高脂高糖+STZ所建立的模型相对更接近于人类2型糖尿病。（2）植物提取物能显著降低血糖和血脂。各剂量组与模型组比较有不同程度的统计意义。（3）胰腺病理组织检查显示低、中、高剂量均可显著改善STZ造模大鼠胰腺组织结构功能。结论 植物提取物在调节血糖、血脂、糖化血清蛋白、胰岛素方面有不同程度的改善机体组织细胞的功能。
【关键词】 植物提取物；链脲佐菌素；大鼠
本课题是与日方合作共同研究开发新药的研究。植物提取物由日方提供，其目的是从中草药中寻找降脂、降糖的新药，通过动物实验为临床研究提供可行的依据。
1 材料与方法
1.1 材料 动物：健康清洁级雄性Wistar大鼠，由军事医学科学院实验动物中心提供。许可证号：SCXK-（军）2002-001。体重150~180g。药品：植物提取物由日方提供。链脲佐菌素（STZ）：Sigma产品；测定血糖、血脂试剂盒：由中生北控生物科技股份有限公司提供；测定糖化血清蛋白（GSP）、丙二醛（MDA）试剂盒由南京建成生物工程研究所提供；胰岛素（INS）放免试剂盒由北京美迪科生物技术有限公司提供。
1.2 方法 实验性高脂高糖动物模型建立：高脂高糖饲料的配制：1.5%胆固醇、0.25%胆酸钠、10%猪油、5%蔗糖、83.25%基础饲料。由北京科澳协力饲料有限公司加工制作。除正常组对照组（4只）外，其余大鼠预先给予高脂高糖饲料30天后，继以低剂量STZ 30mg/kg一次性腹腔注射，其后自由饮水、进普通饲料，于第2天禁食24h，取血测定血糖、血脂含量。血糖＞10mmol/L的大鼠为造模成功鼠，随机分为四组：高脂高糖模型组、植物提取物低剂量组、中剂量组、高剂量组。各组继续给予高脂高糖饲料外，模型组给予灌胃等量生理盐水，植物提取物低、中、高剂量组给予灌胃植物提取物液，剂量依次为48mg/（kg·d）、143mg/（kg·d）、480mg/（kg·d）。连续给药30天。
2 结果
2.1 植物提取物对高脂高糖大鼠给药前后血糖含量影响的比较 大鼠给予高脂高糖饲料30天后，一次性低剂量腹腔注射STZ（30mg/kg），于24h后测定空腹血糖含量。继以灌胃植物提取物连续30天，再次测定血糖含量。结果见表1。
表1 植物提取物对高脂高糖大鼠血糖含量影响的比较 （略）
实验结果表明，三种剂量植物提取物对STZ所致的大鼠血糖均有显著性降糖作用，高剂量效果相对更好些（P＜0.001）。
2.2 植物提取物对高脂高糖大鼠血脂含量影响的比较 大鼠给予高脂高糖饲料30天后，一次性低剂量腹腔注射STZ（30mg/kg），于24h后测定空腹血脂含量。继以灌胃植物提取物连续30天，再次测定血脂含量。结果见表2。
表2 植物提取物对高脂高糖大鼠血脂含量影响的比较 （略）
实验结果显示：植物提取物对高脂大鼠的TG、TC有不同程度的影响，三种剂量比较以低剂量更为明显。与模型组比较，低剂量降低TC有显著性差异（P＜0.01），低、中剂量降低TG有统计学意义（P＜0.05）。
2.3 植物提取物对高脂高糖大鼠给药后MDA、GSP、INS水平的影响 大鼠给予高脂高糖饲料30天后，一次性低剂量腹腔注射STZ（30mg/kg），继以灌胃植物提取物连续30天，空腹取血测定血清中的MDA、GSP、INS的含量，其结果见表3。
表3 植物提取物对高脂高糖大鼠MDA、GSP、INS水平的影响 （略）
实验结果显示，植物提取物对高脂高糖+STZ造模的大鼠血清中的丙二醛（MDA）影响不大，各组之间没有差异。但模型组与正常组比较P＜0.05，说明高脂高糖+STZ可使动物体内脂质过氧化的物质MDA下降，从而引起细胞的损伤，植物提取物没有缓解动物体内自由基攻击细胞后的修复作用。植物提取物在低剂量组中糖化血清蛋白GSP下降显著，与模型组比较P＜0.05。植物提取物对高脂高糖+STZ造模的大鼠血清中胰岛素（INS）水平影响有显著性差异（P＜0.01或＜0.001），且随剂量增加有不同程度的增加。
2.4 胰腺病理组织检查 正常组胰岛着色浅呈圆形或椭圆形，胰岛内的细胞排列呈团索状，境界清晰，各细胞核呈椭圆形，胞浆丰富，细胞间可见毛细血管，胰岛数量及岛内细胞数均较多，视野中平均15个胰岛/例；模型组胰岛萎缩，数目减少，有的胰岛内细胞排列不整齐，细胞核模糊，胰岛周围和胰岛内细胞内可见大的间隙和结缔组织，未见淀粉样变。植物提取物低、中、高三个剂量组胰岛内也可见萎缩的胰岛，低剂量组有的胰岛内细胞排列紊乱，中剂量组胰岛萎缩数量较少，高剂量组胰岛内的结构基本同正常组。
3 讨论
本研究结果显示，首先给予高脂高糖饲料诱发大鼠产生高脂血症，大鼠经高脂高糖饮食30天后，腹腔注射30mg/kg的STZ诱发的动物模型，其空腹血糖＞10mmol/L，TG和TC高于正常值，较正常对照组有显著性差异（P＜0.001~0.05），表明该方法所诱导的模型是成功的，其模型类似于人类的2型糖尿病。
植物提取物对STZ所致的大鼠高血糖有显著性降低作用。三种剂量均有非常显著性差异，高剂量效果更好（P＜0.001）。植物提取物对高脂大鼠的TG、TC有不同程度的影响，三种剂量比较以低剂量更为明显（P＜0.01）。低、中剂量降低TG有统计学意义（P＜0.05）。植物提取物对高脂高糖+STZ造模的大鼠血清中的丙二醛（MDA）影响不大，各组之间没有差异。但模型组与正常组比较P＜0.05，说明高脂高糖+STZ可使动物体内脂质过氧化的物质MDA下降，从而引起细胞的损伤，植物提取物没有缓解动物体内自由基攻击细胞后的修复作用。植物提取物在低剂量组中糖化血清蛋白下降显著，与模型组比较P＜0.05。植物提取物对高脂高糖+STZ造模的大鼠血清中胰岛素水平影响有显著性差异，低、中、高三种剂量分别为P＜0.01和P＜0.001，随剂量增加有不同程度的增加。植物提取物低、中、高三个剂量组胰岛内也可见萎缩的胰岛，低剂量组有的胰岛内细胞排列紊乱，中剂量组胰岛萎缩数量较少，高剂量组胰岛内的结构基本同正常组。
总之，植物提取物在调节血糖、血脂、糖化血清蛋白、胰岛素方面均有不同程度的改善机体组织细胞的功能。有些指标没有表现出差异性，原因可能是动物例数太少。另一方面也反映了植物提取物对胰腺组织有较强的特异性，从而表现出降糖作用显著，也许是植物提取物增强了胰腺细胞DNA修复酶系列的表达，或使胰岛素含量和活性增加，有待进一步研究。
【参考文献】
1 王继贵.临床生化检验.长沙：湖南科学技术出版社，1996，316.
2 陈奇.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993，493.
作者单位： 1 100000 北京，北京中医药大学基础医学院
2 北京，日中医学交流中心
（编辑：陆 淼）