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【摘要】 目的 在南昌地区建立一套能鉴定出血型特异性抗体的红细胞谱。方法 从无偿献血的人群中挑选O型健康献血员的红细胞，应用血型系统特异性的相关抗血清，先在瓷板上进行血型抗原分型初筛试验，挑选出符合要求的抗原，然后再用试管法做抗原确认试验。结果 筛选出20名献血员为谱细胞成员，组成每套为10份的谱细胞，包含C、c、D、E、e、M、N、S、s、Mur、P1、JKa、JKb、Fya、Fyb、K、k等20余种抗原，可鉴定Rh、MN、P、Lewis、Kidd等8个与输血相关的血型系统的20余种抗体。将谱细胞应用于临床研究，鉴定出血型特异性抗体26例。结论 本实验室研究的红细胞谱抗原符合血型抗原分布频率，能有效鉴定出抗体的特异性，可用于血清中不规则抗体筛选及特异性鉴定，并且通过红细胞的冰冻保存技术，完成谱细胞的保存工作。
【关键词】 血型系统；谱细胞；抗体鉴定；保存；输血疗法
随着临床输血医学的不断发展，血液被广泛地应用于临床，但同时也带来了一系列由于红细胞抗原抗体反应引起的免疫学问题，其中与临床输血安全相关的血型抗体达20余种［1，2］。输血、妊娠是产生免疫性血型抗体的主要途径，这些抗体严重地威胁输血安全，是产生溶血性输血反应的主要原因。2003年底，我实验室为了改变多年来谱细胞一直依赖从上海血液中心购买的历史，也为了更加适应服务临床检测的需求，经过3年的实验积累，对O型健康献血员进行了大量的筛选和鉴定，建立了南昌地区的红细胞谱，并将其应用于临床抗体鉴定中。现将有关课题研究执行情况汇报如下。
1 材料与方法
1.1 红细胞标本来源 南昌地区无偿献血人员中健康的O型献血员，年龄18～45岁，性别不限。
1.2 实验用血清来源 -A、-B、-C、-c、-D、-E、-e、-M、-N等为上海血液医药生物技术有限公司提供；-S、-s、-P1、-K、-k、-Jka、-JKb、-Lea、-Leb、-Fya、-Fyb 等为安徽晨光天一生物技术研究所提供。
1.3 血型抗原鉴定方法 按试剂操作说明书提供的方法进行凝集试验，采用瓷板法进行初筛检测，确证试验和稀有抗原检测采用试管法。
1.4 红细胞谱的建立 谱细胞的配组需符合以下原则：（1）细胞谱的抗原分布合理，用最少份数的谱细胞筛出绝大多数有临床意义的抗体；（2）献血员容易联络。
1.5 抗体鉴定 运用常规的血型血清学方法进行。
2 结果
从7519名健康献血员中筛选出20名献血员为谱细胞成员，组成每套为10份的谱细胞，包含C、c、D、E、e、M、N、Mur、S、s、P1、Lea、Leb、Jka、JKb、Fya、Fyb、K、k等抗原，可鉴定出Rh、MN、P、Lewis、Kidd等8个常见血型系统20余种抗体，建立的谱细胞抗原分布情况见表1。 表1 红细胞谱细胞抗原分布格局
2.1 红细胞谱的制备和保存 将采集的全血离心得压积红细胞200 ml，分为10 ml×20袋，采用复方甘油冷冻保存液（广州华南医疗用品有限公司提供），在-70℃低温冰箱中保存（保存期10年）。需使用时将冰冻保存的谱细胞解冻、洗涤后用试剂红细胞保存液（广州血液中心提供）悬浮成5%的红细胞悬液，备用，4℃～8 ℃可保存90天左右。
2.2 红细胞谱的临床应用 应用于需要交叉配血的患者、HDN产前检查的孕妇、迟发性溶血性输血反应的鉴定共计552例次，共检出特异性血型不规则抗体26例。检出抗体的分布情况：健康献血员8例（30.77%）；自身免疫溶血性贫血2例（7.69%）；新生儿溶血病（HDN）4例（15.38%）；溶血性输血反应12例（46.15%）。其中检出的血型抗体中Rh系统抗体17例，占65.38%；MN系统抗体5例，占19.23%；其他血型系统抗体4例，占15.38%。检出的26例不规则抗体分别用上海血液中心和广州血液中心的谱红细胞进行对照实验，符合率100%。26例血型抗体特异性分布见表2。表2 谱细胞检出的血型抗体特异性分布
3 讨论
抗体筛选及鉴定依赖特异性配组的谱红细胞，而谱细胞鉴定抗体特异性的原理是基于排除原则。鉴定抗体的能力取决于配组细胞包括的抗原数目和这些抗原在配组中的分布信息。本实验室建立的这套谱细胞是由8个血型系统，20多个抗原，10份不同来源的细胞组成，因为考虑到某些抗体有剂量效应，如抗-c+E、-M等，配组细胞中增加了纯合子细胞，以便能检出弱抗体。
本实验室建立的谱细胞经过临床应用，鉴定出了20余例不规则抗体，并及时提供了相合血液输注，避免盲目输血，有效地防止了溶血性输血反应的发生。同种抗体在群体中检出频率约为0.3%～2%，一般通过妊娠、输血等免疫途径的刺激而产生。不规则抗体的存在是引起溶血性输血反应的主要原因。因此笔者认为，为了保证临床输血质量和安全，有必要在输血前对输血患者使用筛选细胞或谱细胞筛查不规则抗体。
【参考文献】
1 罗广平，肖露露.红细胞谱细胞的建立及临床应用.实用医学杂志，2002，18（12）：1324-1325.
2 罗广平，汪传喜，肖露露.GZB试剂红细胞4度保存液的研究及其临床应用.实用医学杂志，1995，11（3）:154.
作者单位：330008 江西南昌，南昌市血站