点击显示 收起
【摘要】 光学显微镜的出现，把生物医学研究从宏观的大体形态水平发展为微观水平，人们利用光镜虽可看到动植物细胞和许多微生物等，但因受其自然光线波长的限制，使其分辨率很难满足人们揭示超微观结构奥秘的需要。有学者通过对电镜应用，研究了大多数有关疾病的超微病理结构，并积累许多相关资料，为将电镜用于各种临床疾病的病理诊断打下了良好的基础，使病理学的水平提高到了一个新的水平。目前电子显微镜病理诊断已广泛应用于临床病理诊断中，特别在传统的临床诊断手段中，无法确诊的病例，电子显微镜就能发挥其重大的作用。
【关键词】 电子显微镜;临床病理;鉴别诊断
Application electron microscopy in clinical diagnosis of pathology
FAN Xiao-jun，CHEN Ming-xia，LIU Yan-sheng，et al.Department of Electron Microscopy,Xi'an Jiaotong University Medical School,Xi'an 710061,China
The emergence of optical microscopy，make biomedical research from the macro level of the general form to the development of micro-level，the use of light microscopy can be seen in many animal and plant cells and micro-organisms and so on，but its natural light wave length is limited,so it is very difficult to meet the people's resolution to reveal the mystery of ultra-micro-structure needs.It is through the application of electron microscopy to study the disease and the majority of ultra-structural pathological structures，and accumulate a lot of pertinent information for a variety of electron microscopy for the pathological diagnosis of clinical disease with a good foundation，improue the level of pathology to a new level.At present，electron microscopy has been widely used in pathological diagnosis of clinical pathology，especially in the traditional means of clinical diagnosis，not confirmed cases，electron microscopy will be able to play its important role.
[Key words] electron microscopy;clinical pathology;differential diagnosis
电子显微镜在病理学中的应用较为广泛，并不断开拓着病理学的新领域。主要表现在从细胞、亚细胞的形态结构上阐明疾病的发生、发展及转归规律，丰富了传统病理学的知识;通过对亚细胞结构和病原体的观察，可诊断肿瘤疾病、肾小球疾病与其他一些细菌、病毒和寄生虫疾病。近几十年来分子生物学和免疫组织化学的迅速发展，为疾病的诊断提供了许多新的手段。但随着电镜技术的不断改良及与其他技术的紧密结合(如免疫组织化学、免疫荧光等)，使电镜的诊断水平又提高到一个新的水平。目前的电镜种类很多，有透射电镜(TEM)、扫描电镜(SEM)、扫描隧道电镜、原子力电镜等，但应用于临床病理诊断中的主要是透射电镜和扫描电镜[1]。临床病理诊断为最终诊断，所以在疾病的诊断和鉴别诊断中，电子显微镜起着举足轻重的作用。
1 在病毒、细菌性疾病诊断中的应用
传统的病毒、细菌性疾病的诊断方法主要应用免疫学方面的手段，超薄切片可供观察感染细胞内病毒的大小、形态、排列的形态特征。依据电镜下病毒形态结构特征，再结合病毒的核酸和蛋白分子生物学和免疫学特性，可以对致病病毒、细菌进行诊断和鉴别诊断。透射电镜负染色技术是一种快速简便的操作程序，是病毒性致病因子电镜诊断常用的方法。如通过此方法在秋季腹泻排泄物中能够在短时间内检出轮状病毒。在新病毒的发现中做出了重要贡献(如SARS病毒的发现)[2]。免疫电镜技术的应用更提高了病毒快速诊断的敏感性和特异性。扫描电子显微镜可以对具有特殊外表形态的致病细菌进行观察和鉴别。因此，电子显微镜是确定各种病毒、细菌形态结构最有用的手段。
2 在穿刺活检方面的应用
电子显微镜在慢性肾病、肝脏代谢性疾病诊断中的作用也是值得肯定的，用得最多的是肾脏活检的诊断。我室近年来为临床肾穿诊断数百例，为疾病的诊断提供了可靠的证据。由于肾脏疾病的种类繁多，病因及发病机制复杂，许多肾脏疾病的临床表现与肾脏的组织学改变并不完全一致。肾小球病是临床上常见的疾病，可分为原发性和继发性两大类，为了明确肾小球病的病理诊断，临床上进行肾穿刺活检。电镜除了能精确区分肾小球内各种细胞及组织成分外，还可观察到光镜所不能见到的这些成分的超微结构病变，特别是上皮细胞、系膜、基膜细胞和间质的改变，确定有无电子致密物的沉积及其沉积部位，对肾病的分型提供了坚实的形态学支持。但单一的电镜技术有较大的局限性，要使肾活检在病理诊断上起到更好作用，还必须将光镜、免疫荧光镜和免疫电镜检查密切结合起来，发挥其更重要的作用[3，4]。可以说，肾脏穿刺电镜病理检查的开展是肾脏病临床诊断发展过程中一个质的飞跃。所以了解肾脏组织超微结构形态学的改变对临床医生判断病情、决定治疗方案和估计预后方面提供了重要的依据。近年来肝脏穿刺也得到了普遍开展。
3 在肿瘤诊断中的应用
在肿瘤病理诊断中，电子显微镜对肿瘤的诊断和鉴别诊断得到了广泛的应用;主要通过对超微结构的观察以及寻找各类组织特有的细胞分化标记，从而确诊和鉴别相应的肿瘤类型。近来细胞凋亡的研究取得了突飞猛进的进展，越来越多的资料表明，细胞凋亡与肿瘤有着密切关系，而电镜在细胞凋亡研究中也起着不可或缺的作用。因此，利用电镜观察细胞的超微结构病理变化和细胞凋亡情况，为肿瘤的临床诊断和治疗提供了重要科学依据。因此，提高电镜对肿瘤的诊断技术，有利于深入地认识肿瘤的生物学特性、发病机制及其进展和预后。
4 血液系统疾病诊断中的应用
透射电镜、扫描电镜以及酶细胞化学和免疫电镜等技术的应用，在血液系统疾病分型及疑难病例诊断中发挥了重要作用。因为在电子显微镜下可观察到毛细胞白血病瘤细胞有其特殊结构和形态特点的超微结构，所以用电镜观察，结构准确，形态清晰，是诊断毛细胞白血病的主要依据，这是光学显微镜无法达到的。尤其是临床表现不典型时，再结合扫描电镜(表面微绒毛)更加有其诊断价值。在贫血的鉴别诊断中，可以利用透射电镜加扫描电镜方便地鉴别出各种类型的贫血，如缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血、再生障碍性贫血、溶血性贫血等。
5 电镜在肌肉活检中的应用
一般的肌肉疾病可通过肌肉组织化学染色，基本可以满足各种神经肌肉病、遗传性肌病的诊断与鉴别诊断。但是，对于一些少见、罕见的神经肌肉疾病，还需要进一步行肌肉超微结构或免疫电镜检查，尤其是各种代谢性肌病、线粒体肌病和各种先天性肌病等;电镜对这些主要类型肌病的诊断有不可替代的作用。此外，对于某些临床疑难疾病，仅靠常规超微结构形态病理资料难以做出最终诊断[5]，这就要求我们综合运用多种电镜技术(如电镜酶细胞化学技术、免疫电镜技术等)对临床疑难肌病进行诊断，这样才能得出明确诊断结论。
6 小结
电镜在临床病理诊断中的广泛应用，不断完善和丰富了病理学的内容，更加为临床疑难疾病的诊断和鉴别诊断提供了更可靠的科学依据。随着科学技术的迅猛发展，在临床病理诊断中常规电镜技术虽大量使用，但它也存在较大的局限性(观察范围小)。因此，在积极使用电镜技术的同时，应积极与其他技术(如超微结构的形态定量和图像分析技术、免疫组化等)相结合，不断改良电镜技术，从而开拓电子显微镜临床应用的新领域。我们有理由相信，随着电子显微镜性能的不断提高和各种相关实验技术的应用，电子显微镜将在临床疾病的研究和诊断中发挥重要作用。
【参考文献】
1 纪小龙，申明识，李维华，等.电镜在诊断病理中的应用——2183例分析.临床与试验病理学杂志，1994，10(1)：49-51.
2 张丽洁，赵振军.细胞凋亡与肿瘤发生及治疗新策略.临川荟萃，2003，18(7)：416-417.
3 王盛兰，钟延丰，管增伟，等.电镜和荧光显微技术在细胞凋亡研究中的应用.北京大学学报(医学版)，2003，35(1)：91-93.
4 朱雄增.新技术在病理学中的应用.浙江肿瘤，1997，3(2)：70-72.
5 樊小军，陈明霞，等.红细胞扫描电镜样品的快速制作法.电子显微学报，2005，4(4)：438.
(本文编辑：陆 华)
作者单位：710061 陕西，西安交通大学医学院电镜室