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2 方法与结果
2.1 鲜马奶对小鼠免疫器官重量的影响及T淋巴细胞转化率的影响 取小鼠40只,体重(18±2)g,雌雄各半,随机分为4组,对照组、高剂量组、中剂量组、小剂量组各10只。各组小鼠均用相同饲料饲养,其中对照组小鼠饮用自来水,低剂量组按每天每只小鼠每克体重饮用鲜马奶0.021ml,中剂量组按每天每只小鼠每克体重饮用鲜马奶0.042ml,高剂量组按每天每只小鼠每克体重饮用鲜马奶0.084ml。
饲养30天后,各组小鼠肌注植物血凝素5mg/kg,7天时再以5mg/kg的植物血凝素攻击性给药,饲养40天时尾尖采血,推血片,用姬-瑞氏染液染色1min,用磷酸盐缓冲液洗血片,油镜下计数200个淋巴细胞,并计数淋巴细胞转化率。处死动物剖取胸腺和脾脏称重,并计算胸腺指数和腺脏指数。
淋巴细胞转化率=转化的淋巴细胞数 转化的淋巴细胞数+未转化的淋巴细胞数×100%胸腺(脾脏)指数=胸腺(脾脏)重量(g)小鼠体重(g)×10 -3
鲜马奶能显著增加T淋巴细胞转化率及胸腺指数、脾脏指数,见表1及表2。
表1 鲜马奶对小鼠T淋巴细胞转化率的影响 (略)
注:与对照组比较,行t检验, * P<0.05, ** P<0.01
表2 鲜马奶对小鼠胸腺指数、脾脏指数的影响 (略)
注:与对照组比较,行t检验, * P<0.05, ** P<0.01
2.2 鲜马奶对小鼠血清溶血素含量的影响 取小鼠40只,体重(18±2)g,雌雄各半,随机分为4组,对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组各10只。各组小鼠均用相同饲料饲养,其中对照组小鼠饮用自来水,其余实验组饮用鲜马奶,剂量见方法2.1。
饲养30天后,各组小鼠腹腔注射2%SRBC悬液0.2ml/鼠,7天时再腹腔注射2%SRBC悬液0.2ml/鼠,饲养40天时断头取血并分离血清备用。用生理盐水将血清倍比稀释成1:20、1:40、1:80、1:160、1:320、1:640、1:1280、1:2560,在每管中加入2%SRBC1ml,混匀后置37℃温育,24h测量抗体效价。
结果表明,鲜马奶可显著提高小鼠血清溶血素的含量,详见表3。
表3 鲜马奶对小鼠血清溶血素含量的影响(略)
注:与对照组比较,行t检验, * P<0.05, ** P<0.01
2.3 鲜马奶对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 取小鼠40只,体重(18±2)g,雌雄各半,随机分为4组,对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组各10只。各组小鼠均用相同的饮料饲养,其中对照组小鼠饮用自来水,其余实验组饮用鲜马奶,剂量见方法2.1。
饲养30天后,每只小鼠腹腔注射5%鸡红细胞悬液0.5ml,18h后处死动物,腹壁消毒后剪开皮肤,注射2.5ml Hank's液冲洗腹腔,吸取腹腔冲洗液0.2ml,滴于载玻片上,37℃温孵30min,用生理盐水冲去未贴壁的细胞,晾干后用甲醇固定5min,再用姬-瑞氏混合液染色1~2min,用蒸馏水冲去染色液。干燥后在油镜下计数200个巨噬细胞吞噬鸡红细胞数,并计算吞噬百分率与吞噬指数。
吞噬百分率=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数200个巨噬细胞 ×100%
吞噬指数=被吞噬的鸡红细胞总数200个巨噬细胞
结果表明,鲜马奶可显著提高巨噬细胞的吞噬功能。详见表4。
表4 鲜马奶对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 (略)
注:与对照组比较,行t检验, * P<0.05, ** P<0.01
3 讨论
胸腺和脾脏是机体重要的免疫器官,与机体的体液及细胞免疫功能密切相关。巨噬细胞的吞噬功能是反映机体非特异性免疫功能的常用指标之一。血清溶血素含量是衡量机体体液免疫功能的重要指标。T淋巴细胞转化率则是检测机体细胞免疫功能的重要指标。实验结果表明,鲜马奶能增加小鼠免疫器官重量、促进巨噬细胞吞噬功能、增加血清溶血素含量并可提高T淋巴细胞转化率。这对于马奶的进一步开发、利用提供了实验依据。
参考文献
1 刘洪元,高昆.马奶及酸马奶(马奶酒)的营养价值和医疗作用.中国食物与营养,2003,(4):45.
2 庞文贞.妇女营养学.北京:人民卫生出版社,1996,74-78.
3 周愠珍.妇幼营养学.北京:科学出版社,1997,108.
4 刘洪元,高昆,张丽萍,等.舍养马匹马奶的营养成分分析.营养学报,2003,25(2):183.
* 基金项目:内蒙古教育厅科技计划项目(批准号:JN2098)
作者单位:014010内蒙古科技大学基础医学部免疫学教研室,内蒙古科技大学公共卫生学院