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Home医源资料库在线期刊中华中西医杂志2005年第6卷第22期

BD PHOENIXTM System凤凰全自动细菌鉴定药敏仪的使用及其注意事项

来源:中华中西医杂志
摘要:BDPHOENIXTMMSystem凤凰全自动微生物鉴定/药敏系统是专业设计应用于临床微生物实验室进行快速细菌鉴定及药物敏感试验的全自动设备。仪器自动化程度高,工作流程简便,维护简单。本文就该系统的组成、检测原理、使用及其注意事项作一简要介绍,以供同行参考。1仪器组成及检测原理仪器由硬件及软件两部分组成,硬件包括......

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  BD PHOENIXTMM System凤凰全自动微生物鉴定/药敏系统是专业设计应用于临床微生物实验室进行快速细菌鉴定及药物敏感试验的全自动设备。先进的检测原理与尖端的数据分析软件的共同作用,使凤凰号实现了高准确度与高重复性的完美结合。仪器自动化程度高,工作流程简便,维护简单。本文就该系统的组成、检测原理、使用及其注意事项作一简要介绍,以供同行参考。

  1  仪器组成及检测原理
  
  仪器由硬件及软件两部分组成,硬件包括PHOENIXTM 主机及Crystal Spec 比浊仪,软件包括BD XPert TM微生物学专家系统和BD EpiCenter TM微生物实验室专业数据管理系统。主机可同时检测100份鉴定标本及100份药敏标本,可鉴定革兰阳性菌112种,革兰阴性菌158种,药敏试验可根据用户需要灵活配伍,可提供98种抗生素选择;使用配套提供的独立无菌分装鉴定肉汤和药敏肉汤及比浊仪;鉴定肉汤和药敏肉汤,每根试管采用螺旋管盖设计,防止标本被外界杂菌污染,保护实验室工作环境,又防止配制和接种过程含菌气雾侵害实验室工作人员,配套比浊仪可迅速判断菌液浊度; 微生物专家系统支持样本的取放、监测凤凰号主机的工作状态,处理主机反馈结果、根据BDMS丰富的微生物检测及药敏试验的规则和随机采用的NCCLS行业标准以及用户根据自身经验确定的特殊标准对鉴定/药敏结果进行专业性分析判断并为临床提供相关诊断背景知识及多层次抗生素治疗参考方案。PHOENIXTM 系统可直接与用户实验室中央数据库(LIS)、BD BACTECTM EpiCenterTM 专家数据管理系统或打印机联网,进行数据交换及结果分析打印。
  
  仪器原理为先进的荧光增强与传统方法的结晶。鉴定试验采用BD专利荧光增强原理与传统酶、底物生化呈色反应结合的原理,根据BD微生物产品部(BDMS)长达70年的微生物鉴定专家数据库信息设计鉴定反应最佳组合,使鉴定试验更加快速、灵敏、准确;药敏试验采用传统比浊法(Turbidity)和BD专利呈色(Chromogenic)反应双重标准进行药敏试验结果判断,使药敏报告更加准确快速。鉴定/药敏板采用鉴定板、药敏板或鉴定/药敏复合板三种选择,经济适用,可满足用户的各种需要。每个鉴定药敏复合板有51孔用于鉴定试验,85孔用于药敏试验,可同时进行17种抗生素5种浓度或28种抗生素3种浓度的MIC药敏试验;配套密封盖锁死设计彻底将菌液与外界隔绝,确保实验过程无污染菌干扰及生物安全性。系统连续监测,试验完成后可立即得出结果;革兰阳性菌鉴定时间仅需4h,准确度为95%;革兰阴性菌鉴定时间仅需3h,准确度为95%,细菌的药敏时间为4~6h,准确度为95%。采用BD专利斜面倾倒法,利用地球引力及封闭轨道设计使菌液快速均匀地自动充满测试孔,彻底避免气泡生成干扰试验,可同时保证安全、无污染、均匀加样。

  2  仪器的使用及其注意事项

  2.1  标本的分离培养  根据所使用的鉴定药敏板条,选择合适的菌种培养基分离培养标本。如使用鉴定药敏复合板,可使用TSA 5%sheep blood,Columbia 5% sheep blood,Columbia 5% horse blood,Chocolate Agar,Eosin Methylene Blue Agar,MacConkey Agar ;如光使用鉴定板条,则除上述培养基外,还可使用TSA w/o blood,Hektoen Enteric Agar,XLD Agar,Columbia CAN Agar,Phenylethanol Agar。

  2.2  标本的加样  首先将鉴定药敏板启封后放在加样盘上,同时粘贴Accession条形码或标本信息;然后将 broth 试管放置在加样盘上,ID broth 放在左边,AST broth 放在右边;使用无菌棉签挑取菌落至ID broth,混匀5s,等待10s使气泡消失,CrystalSpec 比浊仪调整菌液浓度至0.5~0.6McFarland为佳;加一滴AST indicator solution 至AST broth 中,然后从ID broth 中转移25码菌悬液至AST broth,颠倒混匀(避免振荡)后,将ID broth 和 AST broth 分别倾倒入鉴定药敏板,密封条封好,检查每一个反应孔是否充满菌液。标本的加样过程中应注意:鉴定药敏板启封后应在2h内使用;在标记鉴定药敏板时,使用无荧光的标记材料,避免影响到ID/AST检测孔;配置菌悬液时,勿使用金属接种环,以免ID broth肉汤管有划痕影响光密度值(最好在0.5~0.6之间),配置好的菌悬液必须在60min内完成加样;AST indicator solution 需平衡至室温时使用,其加样量过多或过少,需另取一支AST broth 重新滴加,加过AST indicator solution的AST broth 需在2h内使用或在避光的室温环境中保持8h;鉴定药敏板加样时的角度非常重要,板条必须放在加样盘上;密封条封闭鉴定药敏板时,四角必须封死,以免在放入主机内脱落而损坏机器;加样完成后,鉴定药敏板必须在30min内放入仪器中检测,在转移鉴定药敏板时,应使用鉴定药敏板转移容器确保鉴定药敏板保持直立状态,避免鉴定药敏板掉落在地板上,导致反应孔交叉污染。所使用的broth 肉汤管及鉴定药敏板必须在其有效期内。

  2.3  鉴定药敏板的信息输入  按信息输入键添加鉴定药敏板信息,使用条码扫描器扫描鉴定药敏板的条形码,使仪器能识别鉴定药敏板的类别,键盘上人工键入标本编号,输入isolate数目,仪器默认值为1。若使用单独的AST板,屏幕上必须输入细菌名称,否则仪器只报告MIC值,并且提示是需要注意的板条,在用户输入细菌名称后,专家系统BDXpert才能解释MIC结果。之后,使用存盘键存盘。输入鉴定药敏板信息后,必须在30min内将板条放入主机内。

  2.4  鉴定药敏板的上机和取出  按仪器屏幕旁板条放入键,等待屏幕上出现已打开的小锁图标后,打开仪器门,仪器停止转动,此时可将鉴定药敏板放入仪器的空位置。检测完成后,按仪器屏幕旁的板条取出键,等待屏幕上出现已打开的小锁图标后,打开仪器门,仪器停止转动,取出检测完成的鉴定药敏板。仪器门锁由软件控制,在已打开的小锁图标还未出现时,不要强行开门;开门后,不可人工转动孵育架,如果孵育架没有停止转动,应立即与BD公司联系。

  2.5  鉴定药敏板的孵育和检测  鉴定药敏板条放入仪器后,仪器可自动进行孵育和检测,结果出来后,仪器可自动报警。鉴定药敏板在孵育和检测过程中若持续停电达或超过半小时,仪器便会自动放弃检测,不能完成鉴定和药敏实验。因此,最好配备UPS。

  2.6  数据接收及报告的发出  检测完成后,与主机相连的电脑可接收到相应的数据。输入标本的相应信息并审核后便可打印并发出报告。仪器专家系统会对药敏结果给出提示,对提示者应进行复查或用K-B法重复实验。

  2.7  质量控制  对每批新到的鉴定药敏板必须做质量控制(QC)。可按以下步骤进行:按信息输入键,然后在输入界面按QC键,进入QC输入界面,分别输入或扫描Sequence、Accession、Isolate值,然后按选择键,选择ID和(或)AST,并同时选择细菌名称后,分别输入Tech ID,Panel Lot,Panel Exp,ID Broth Lot,ID Broth Exp,AST Broth Lot,AST Broth Exp,AST Indicator Lot,AST Exp。按存盘键存盘后,将QC板放入仪器检测。对失控者,要找出原因。

  (编辑:悦  铭)

  作者单位: 650032 云南昆明,成都军区昆明总医院检验

作者: 林明辉, 王惠萱, 李云, 郑勤 2006-7-19
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