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【摘要】 目的 建立了一种流动注射化学发光测定间苯二酚的新方法。方法 在碱性条件下，间苯二酚对luminol-KIO4的化学发光反应有强烈的抑制作用，且化学发光强度的减小值和间苯二酚浓度的对数成正比。结果 测定间苯二酚的线性范围为1.0～104pg／ml；检出限为0.3pg／ml(3σ)，RSD＜3%(n=5)。结论 该法灵敏度高，检出限低，采用标准加入法，成功的测定了药物和人体血清样品中间苯二酚的含量，回收率为85.8%～113.8%。
【关键词】 化学发光；间苯二酚；流动注射
Determination of resorcinol using reversed flow injection chemiluminescence
QIU Xiao-xiang，LIU Yan-hong，SONG Zheng-hua.Department of Chemistry，Weinan Teachers College，Weinan 714000，China
【Abstract】 Objective A new chemiluminescence method for determination of resorcinol with flow injection technique is developed.Methods It was found that resorcinol could inhibit sensitively the CL generated from luminol-potassium periodate system in alkaline medium.The decrement of CL intensity was proportional to the concentration of resorcinol. Results The decrement of CL intensity was linear over the concentration of resorcinol ranging from 1.0 to 104 pg／ml. The detection limit was 0.3 pg/ml with a relative standard deviation of less than 2.0% in 5 repeated measurements. This proposed method has been applied for the determination of resorcinol in pharmaceutical preparations and human serum. Conclusion The proposed method offers advantages of simplicity high sensitivity for the determination of resorcinol.
【Key words】 resorcinol； chemiluminescence； flow injection
间苯二酚是一种重要的有机化工原料，广泛用于农业、染料、医药等领域。已报道的测定间苯二酚的方法主要有毛细管电泳法［1］、高效液相色谱法［2］、离子色谱法［3］和化学发光法［4］等。本文发现，间苯二酚明显地抑制 luminol-KIO4化学发光反应，基于这个现象，结合流动注射分析技术，建立了测定间苯二酚的新方法，并成功用于人体血清和药物中痕量间苯二酚的测定。此法具有灵敏度高，检出限低，仪器简单等优点。
1 实验部分
1.1 试剂及仪器 luminol储备液2.5×10-2mol/L，KIO4储备液0.01mol/L，间苯二酚储备液3.1mg/ml，实验试剂均为分析纯；实验中选用NaOH为优级纯；实验中使用水为用Millipore Milli-Q Plus装置纯化二次蒸馏水得到的高纯水。ND-15蠕动泵（上海仪表电机厂）； GD-1型光度测量仪（西北有色地质研究所）；六通阀；光电倍增管；混合管。所选泵管均为聚四氟乙烯管PTFE（id.2.0 mm）实验中采用泵速为2.0ml/min。
1.2 实验装置与操作步骤 FI-CL体系有四道平行管路分别是：如图1所示流动注射分析流路，KIO4溶液作为载液与luminol进入混合管，在碱性条件下，间苯二酚溶液通过
图1 流动注射-化学发光测定间苯二酚示意图 略
六通阀与KIO4和luminol的混合溶液混合，在发光池内产生化学发光。发光强度用R-456光电倍增管接收，放大后用XWT-206型记录仪记录化学发光强度值（Is），同法做一空白（I0）。从而，发光信号的减小值ΔI=I0-Is，这儿Is、I0分别是样品存在和不存在时测得值，ΔI与间苯二酚浓度的对数成正比。
2 结果与讨论
2.1 化学发光动力学曲线 在流动体系中对luminol-KIO4及间苯二酚化学发光体系的动力学曲线进行了研究。当间苯二酚不存在时，化学发光值在luminol和KIO4混合后12s达到最大值，在25s内降为零。当间苯二酚进入混合溶液，化学发光被减弱，且最大化学发光值随间苯二酚浓度的增大而减小。
2.2 luminol、KIO4和NaOH浓度对化学发光强度的影响 分别测定一系列浓度的luminol、KIO4和NaOH溶液的发光强度，当luminol、KIO4和NaOH浓度分别为1.0×10-5mol/L、1.0×10-5mol/L、0.05mol/L时，化学发光减小值ΔI最大。实验选择以上浓度为最佳浓度。
2.3 流速和混合管长度对化学发光强度的影响 以提高信噪比为目的，选择最佳流速。实验得出，流速在2.0ml/min时效果最好。混合管长度从3.0到8.0cm进行试验，得出5.0cm为最佳管长。
2.4 线性范围和检出限 在优化实验条件下，测定间苯二酚的线性范围：1.0～104pg／ml，工作曲线回归方程为ΔICL=13.826LnCx+203.99，线性回归系数r=0.9988，检出限为0.3 pg/ml(3σ)，对10.0、20.0、30.0pg/ml间苯二酚的标准溶液分别进行5次平行测定，对应的相对标准偏差分别为2.35%、1.78%、1.23%。
2.5 干扰实验 10.0pg/ml间苯二酚存在时，用标准加入法对外来物质进行测定（引起的误差＜3.0%）。实验结果表明：5×105倍的NO3-、Ac-、PO43-、Br-、Cr2O72-、SO32-无干扰；2×105倍的NH4+、Mg2+、Ba2+、Zn2+、Mn2+、Ni2+和Ca2+无干扰；1.5×105倍的CH3OH、CH3CH2OH、CO(NH2)2无干扰；5×104倍的Fe3+、Fe2+等无干扰。
2.6 样品测定 移取血清样品(来自西北大学医院)0.1ml，并加入0.1ml的1μg/ml间苯二酚标液，用二次重蒸水定容到10.0ml，制成模拟样品试液。移取两种含间苯二酚的脂溢酊针剂（来自西京医院）0.01ml，用水定容至10.0ml，得到其试液。各试液经适当倍数稀释后，按实验操作在最佳实验条件下进行测定，实验结果见表1。
表1 人体血清和脂溢酊针剂中间苯二酚含量的测定结果 （略）
【参考文献】
1 María R，Roberto AO，Luis D，et al. Simultaneous determination of cloramphenicol，salicylic acid and resorcinol by capillary zone electrophoresis and its application to pharmaceutical dosage forms. Talanta，2003，61: 233-238.
2 曾红，孙国祥，岑立济. 反相高效液相色谱测定皲裂平酊剂中水杨酸、间苯二酚、氯霉素的含量. 色谱，2001，19(4): 370-371.
3 Kubán P，Flowers H. On-line preconcentration for the ion chromatographic determination of chlorophenolic and phenolic compounds in environmental samples using electrochemical detection. Analytica Chimica Acta，2001，437(1): 115-122.
4 Zhenghua S，Lin W. Resorcinol chemosensor based on detection of chemiluminescence with immobilized reagents. Microchemical Journal，2001，68: 47-52.
基金项目：陕西省自然科学基金资助项目(编号：2003B15)
作者单位：1 714000 陕西渭南，渭南师范学院化学系(西北大学在读硕士)
2 710069 陕西西安，西北大学化学系(Δ通讯作者)
(编辑：张 彦)