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免疫组化在疾病的诊断和鉴别诊断以及治疗中起着非常重要的作用，是病理诊断和某些疾病治疗方案选择的重要依据。某些特染又能很快帮助鉴别疾病的发展过程，病变程度［１］。怎样将这两种方法很好的结合起来是快速诊断疾病及时提供治疗方案的前提。我们在实践中摸索一种将特染与免疫组化结合在一起的方法现介绍给大家。
1 材料与方法
1.1 材料 选自广东省中医院病理科20例冰冻及石蜡标本，网状纤维染色试剂，福州迈新公司一抗(EF，PR)，S-P试剂盒，DAB显色剂。
1.2 方法 (1)20例乳腺癌标本(5例冰冻)4μm切片，裱于硅化玻片上。(2)石蜡切片脱蜡至水。(3)冰冻和石蜡切片加0.25%酸化高锰酸钾5min。(4)水洗。(5)2%草酸1～２min。(6)水洗。(7)硫酸铁胺5min。(8)蒸馏水洗。(9)银胺液1min。(10)蒸馏水洗。(11)10%中性甲醛。(12)蒸馏水洗。(13)双氧化1.5min(置微波低档)。(14)蒸馏水洗。(15)一抗孵育45min。(16)PBS 3×３’。(17)二抗10min。(18)PBS 3×３’。(19)“三抗”10min。(20)PBS 3×３’。(21)DAB显色。
2 结果
乳腺癌组织呈巢状，细胞核棕黄色，定位准确，背景干净。癌巢周围是黑色的网状纤维，有的地方网状纤维断裂(图1，图2)。
3 讨论
网状纤维常穿行于细胞体和突起之间构成网状支架及上皮基底膜，用银氨溶液浸染能将纤维变成黑色即嗜银纤维。使我们能清楚看见组织结构，细胞之间关系，如癌组织呈团巢状排列。巢之间围以网状纤维。乳腺导管上皮基底膜就可通过网状纤维清楚的再现，基底膜的崩解或断裂可通过网状纤维染色表现出来，乳腺癌的进展情况，是否由导管内发展到浸润癌也就很容易判断。从而影响到手术方式，范围以及治疗方案的选择以及预后的判断。而现在常用的激素检测又为治疗提供依据［２～4］。如果能短时间在一张切片上将癌组织的浸润程度及癌组织激素表达水平同时表现出来就对疾病的诊断及治疗方案的确定提供很大帮助，同时也为病人赢得了宝贵的时间。本方法将免疫组化与特染结合起来在一张切片上将网状纤维与激素受体同时表现出来，尤其用冰冻切片只需一个半小时，大大缩短了时间，真正起到了辅助诊断的作用。本方法简单易行值得推广。在操作中应注意用血清封闭及双氧水的时间不要太长以免影响已显色的网状纤维。(本文图片见封三)
【参考文献】
1 凌启波.实用病理特殊染色和组化技术.广州：广东高等教育出版社，1989，70.
2 李彦博.ER阳性乳癌病人全身辅助治疗的研究.中国肿瘤临床与康复，2001，8(1)：27-29.
3 蔡丽生.乳腺癌ER、PR及C-erbB-2癌基因蛋白表达与腋窝淋巴结转移的相关性研究.福建医药杂志，2002，24(6)：128-130.
4 张晶，王泰玲，王明屹，等.免疫组化与特殊染色在显示肝脏细胞外间质成分的作用.中华病理学杂志，1997，26(4)：238-237.
作者单位：510120 广东广州，广东省中医院病理科
(编辑：李 木)