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【关键词】 复发性口疮
复发性口疮（RAU）是口腔黏膜常见病。近年来，RAU与幽门螺杆菌（Hp）的关系已成为广泛关注的课题，并有人指出RAU的发病与Hp感染有关。为此，我们对89例RAU患者病损表面刮取物用PCR方法检测Hp-DNA，以探讨Hp与RAU之间的关系。
1 资料与方法
1.1 研究对象 RAU患者89例，其中无明确胃病史者47例，男14例，女33例，年龄17～68岁。有明确胃溃疡、慢性活动性胃炎者42例，男15例，女27例，年龄30～68岁。创伤性溃疡患者23例，男12例，女11例，年龄42～62岁，均无明确胃溃疡、慢性活动性胃炎史。健康对照组50例，男16例，女34例，年龄18～65岁，均无明确胃溃疡、慢性活动性胃炎史。胃病对照组50例，为我院住院治疗并经胃镜检查后确诊的胃溃疡、慢性活动性胃炎患者，其中男21例，女29例，年龄32～66岁。以上患者均符合以下要求：（1）无其他系统性疾病；（2）牙周情况基本正常，无明显牙龈炎；（3）健康对照组及胃病对照组口腔黏膜均正常，无溃疡面及其他黏膜损害；（4）所有患者受检时均未经抗Hp治疗。
1.2 RAU的诊断 诊断标准见《口腔内科学》［1］。
1.3 方法 明确诊断后，用蒸馏水清洗溃疡面，去除食物残渣等表面附着物，20g/L的卡因表面麻醉后用经消毒的清洁挖匙在患者溃疡表面刮取少量假膜及上皮组织，立即浸入装有蒸馏水的离心管中，稍晃动将挖匙上的刮取物洗入管中，立即送检。健康对照组及胃病对照组采取黏膜完整、无明显充血、肿胀、破溃等的舌腹黏膜棉签拭子送检。
1.4 步骤 将样本交实验室，以京海生物工程公司提供的幽门螺旋杆菌PCR试剂盒处理样本。步骤如下。
1.4.1 样本处理 （1）活检组织用蛋白酶K消化；（2）取200μl样本悬液转入0.5ml离心管中，加6滴裂解液，用漩涡振荡器混匀，置室温作用10min；（3）8000r/min离心10min，倒出上清液并将管口置卫生纸上尽量吸去残留液体；（4）加2滴沉淀液，充分混匀令沉淀物彻底悬浮，照步骤（3）离心、去上清；（5）加2滴溶解液，同样令沉淀物彻底悬浮，置55℃水浴10min；（6）照步骤（3）离心15s，取上清液待检。
1.4.2 PCR操作 （1）向0.5ml离心管中加入3μl反应液，26μl所置备的上清液，1UTasp酶，再加1滴石蜡油后上机；（2）先置95℃预变性3min，而后按照：94℃/60s,58℃/30s,72℃/60s的条件，反复扩增35个循环，最后于72℃延伸5min。
1.4.3 扩增结束后 取5ml所得产品加入3μl电泳指示剂，行15g/L琼脂糖凝胶，TBE缓冲液，100～120V 15～30min电泳，在紫外灯下观察结果。
2 结果
见表1。
表1 PCR检测结果 RAU组与创伤性溃疡及对照组之间差异无显著性（P>0.05）。胃病RAU组与无胃病RAU组、健康对照组与胃病对照组间差异有显著性（P<0.01）。
3 讨论
在本实验中，从结果分析，RAU患者溃疡面刮取物中Hp阳性率与对照组相比差异无显著性，且阳性率不高。因此，还不能得出Hp与RAU发生有关的结论。也就是说试图以Hp感染这一单一因素来解释RAU的发病，目前还缺少证据。从口腔内的环境来看，口腔温度平均35℃～37℃,且在牙菌斑内细菌产酸可使pH值降低，是Hp的理想生长环境，而我们也在少量RAU患者的检测标本中确实检出了Hp的存在，那么，即便Hp还不能被认为是RAU的病因，但它对RAU的转归和发展是否有影响，有什么样的影响，值得进一步研究。
徐慧高等［2］曾报道RAU患者口腔Hp检测结果显著高于对照组，但缺乏更多文献支持。在本实验中也未能得到证实，因此RAU与Hp之间的关系尚有待更多实验结果的验证。
【参考文献】
1 岳松龄.口腔内科学，第2版.北京：人民卫生出版社，1987，359-360.
2 徐慧高，王隆香.幽门螺旋杆菌与复发性口腔溃疡相关性研究.口腔医学，2001，21（1）：29.
作者单位：130062 吉林长春，吉林大学农学部和平校区门诊部