病理科常用试剂简便经济新配方

　　医学技术的迅猛发展，带动了病理技术的推广和提高，尤其是一些基层医院，病理科的重要性也日渐显著。病理技术中最基本的就是HE染色，其中虽然苏木精、伊红的配置方法很多，但绝大多数医院采用的是哈瑞氏苏木精染液，此种染液优点甚多，多年来被广泛应用，其缺点也非常显著就是配置麻烦，对于不熟练的病理技师，配置过程加入氧化汞时如稍快则可能造成液体喷出，伤及操作者，至使配置失败，或者氧化时间掌握不好，致使染液稀薄，染色效果不佳，或染液形成沉淀有结晶析出，极大缩短染液的寿命，造成浪费。随着免疫组织化学技术的推广应用，常规AF液固定的标本，抗原丢失严重，常规病理技术中已逐渐用中性缓冲福尔马林固定液、多聚甲醛固定液代替AF液，以利于接下来的免疫组化检测，及各种分子生物学检测，为临床病理诊断及各种课题研究打下良好基础。

    1 材料与方法

    1.1 苏木精配置

    1.1.1 材料 苏木精2g，无水乙醇250ml，硫酸铝10g，蒸馏水750ml，碘酸钠0.5g，柠檬酸1g。

    1.1.2 方法 将苏木精溶于无水乙醇，将硫酸铝溶于水，两液混合置于电炉上加热至沸腾2min，加入碘酸钠及柠檬酸溶解。从电炉上移开，室温放置，即配即用，不用过滤。

    1.2 伊红的配置

    1.2.1 材料 水溶伊红0.8g，重络酸钾0.5g，蒸馏水90ml，苦味酸饱和水溶液10ml。

    1.2.2 方法 将重铬酸钾溶于水中，搅拌使其溶解，然后加入伊红，搅拌至完全溶解，最后加入苦味酸饱和水溶液混匀。

    1.3 多聚甲醛的配置

    1.3.1 材料 蒸馏水1000ml，多聚甲醛100g，氢氧化钠2.5g。

    1.3.2 方法 将氢氧化钠倒入蒸馏水中，在电炉上加热至50℃，加入多聚甲醛，将容器口封住，震荡，放置一边，半小时之内即可溶解，若急用，容器口封好，反复震荡，直至溶解。

    2 结果

    经比较此种配方的染液，苏木精经久耐用，染色保持时间长，染色效果好;伊红染液稳定性好，染色时间短，只需1s，染色力持久，胞浆亚结构显示良好。多聚甲醛固定的标本，组织软硬适中，易于切片，抗体保存良好，极适于临床及科研固定标本之用。

    3 讨论

    此方法1g苏木精配置的染液是哈瑞氏苏木精的两倍，经济效益显而易见，用硫酸铝代替钾明矾染液久用不产生沉淀、结晶及氧化膜，染色力保持时间长。染色效果好，染色时间4～8min细胞核结构显示清晰，推荐一些染色技巧，与大家共享。配置酸酒精分化液时，浓度稍低为宜，一般控制在0.8%～0.9%，分化时间不低于15s，掌握在15～30s之间，而且用pH值=7.2～7.4的PBS代替1%的氨水返蓝，效果极好，既可使得染色深浅适度，又纠正了氨水返蓝易脱片的缺点。苏木精染液配置方法简单，易操作，极易掌握。伊红染液因加入苦味酸饱和水溶液，折光性好，易观察到胞浆细微结构，便于诊断。染液稳定性好，持久耐用。重要的一点，伊红用量缩小了一倍，经济效果明显，染色效果极好，酒精脱水时脱色不显著，伊红着色鲜艳，染色结果不易退色。

    多聚甲醛作为固定剂，可以避免使用因长期存放已变成酸性的甲醛溶液而影响试验结果。酸性福尔马林固定时间久的标本，特别是含血液多的肝、脾、血栓及发生溶血的组织中易产生黑色、黑褐色的色素沉淀。多聚甲醛配置过程中，加入氢氧化钠，既中和了甲醛的酸性又使固定液保持长时间稳定，我科几年来实验结果表明，多聚甲醛固定的标本，各种抗原及其各项指标保存良好。

    作者单位:050011河北医科大学第四医院病理科
    石家庄市第四医院病理科