四种精子上泳液之比较

　　精子的上泳试验，是检测精子功能的一项重要指标，也是对精子活动率、活动度低下以及畸形精子症之不育者，分离高活力精子，实施人工授精（A1）之处理的重要环节。上泳液的选择，则是此试验之关键。综合复习有关文献，所报道的上泳液的配方有多种 ［1～5］ ，我们选择其中四种常用培养液作为精子上泳液，在相同条件下进行比较试验，回收不同上泳液上泳后之精子的活动率，活动度及畸形率都有明显的差异。

    1 材料与方法

    1.1 材料 （1）四种上泳液（改良Ham's F 10 溶液 ［1］ 、改良Tyrode溶液 ［2］ 、改良Earles溶液 ［2］ 、改良Whitten溶液 ［2］ ）参照文献中配方配制。所不同的是最后各溶液在使用前再分别加入人血清白蛋白lg/L。（2）上泳管采用Φ13mm× 100mm刻度玻璃试管或5ml尖底刻度玻璃离心管。

    1.2 方法 20例少精症、弱精症之男性不育患者均系来自本院不育门诊。嘱其禁欲5天后手淫法取精。待精液液化后分别吸1ml于4只上泳管内，各分别加入上泳液2ml，用吸管分别轻缓吸打洗涤，500×g离心7min后弃上清，如此重复2次，最后一次留下0.5ml，将沉淀物（精子）混匀，然后在此精子悬液上分别小心加入1ml上泳液，切勿摇动。将试管置于36.5℃孵育30min，取上层上泳液0.8ml进行分析。活动率采用体外活体染色技术 ［3］ ，活动度采用WHO推荐的四级分类标准 ［3］ ，畸形率采用WHO推荐的精子改良巴氏染色法 ［3］ 分析。A1按文献 ［4］ 操作。

    2 结果

    结果见表1。

    表1 四种上泳液结果比较 （略）

    3 讨论

    3.1 方法评价 上泳试验，一方面能检测精子的泳动功能，是诊断男性不育症的重要参考指标;另一方面是分离高活力精子的一种方法，在上泳的同时为精子的获能提供了能源。该法是用于少、弱、畸精子症不育患者的人工授精治疗的重要一环。而上泳液的选择是至关重要的。尽管目前有许多种上泳液（精子短期孵育液）配方见诸报道，但从我们选择的四种溶液作为上泳液的比较结果可看出，改良Ham's F 10 上泳管之各项指标，均优于其它三管。此结果提示，使用改良Ham's F 10 上泳液是首选的上泳液。我们采用改良Ham's F 10 溶液作为精子的洗涤液和上泳液，已大量应用于临床上的少精症、弱精症之夫精人工授精（A1H）治疗男性不育症。追踪随访我院A1H所出生的婴儿，均发育正常、健康。

    3.2 上泳液配制后应注意 测定其渗透压和pH渗透压应在300～320毫渗量范围、pH应调至7.4最宜。

    3.3 关于上泳时的温度 笔者发现37.0℃不如36.0℃好，但还缺乏足够的比较数据。

    3.4 如此试验用于人工授精前的精子准备 每步操作均需采用无菌操作法。

    参考文献

    1 徐崇.男性学实验手册.重庆:科学技术出版社重庆分社，1989，31.

    2 刘斌.体外授精与胚胎移植.北京:人民卫生出版社，1990，50-80.

    3 World Health Organization:Laboratory Manual For the Examination of Human Semen and Semen Cervical Mucus Interaction.Singapore，1987，1-30.

    4 罗建华.不孕症实验诊断技术.上海:学林出版社，1994，7，238-241.

    5 Quinn P，et al.Improved pregnancy rate in human in vitro fertilization with the use of a medium based on the composition of human tubal fluid.Fertile.Sferil，1985，44（4）:493-498. 

    作者单位:200086上海申虹泌尿外科医院妇科
    200003上海长征医院妇产科