点击显示 收起
关键词 细菌内毒素 鲎试剂 阿莫西林钠
The researches on the feasibility for the bacterial
endotoxin inspection method of amoxicillin sodium
Wan Zhide，Fu Lan，Pei Jinlong，et al.
Shaanxi Provincial Institute For Drug Control，Xi’an710061.
【Abstract】 Objective To establish the endltoxin test method of Amoxicillin Sodium.Methods To inspect bacterial endltoxin according to the method in addenda of china pharmacopoeia（second part，2000edition）.Results The interferential test indicates that the backdrop can be avoided through diluting the preparation to2.5mg per ml.Conclusion The bacterial endotoxin inspection can be used as ordinary method to inspect the enditoxin of Amoxiˉcillin Sodium.
Key words bacterial endotoxin test limulus agent amoxicillin sodium
细菌内毒素法是近年来检测发热物质比较灵敏、准确的一种方法。本文就阿莫西林钠原料和其制剂可用细菌内毒素法控制热原的可行性进行了干扰试验研究，现报道如下。
1 材料
1.1 试药 供试品:注射用阿莫西林钠，（批号C03040320，C03040620，C03040820），规格:1g/瓶，A20030506，A20030507，A20030508，规格:原料（哈药集团制药总厂提供）。021104，021106，021107，规格:1g/瓶，030501，030502，030503，规格:原料（海南通用三洋药业有限公司提供）。鲎试剂（TAL）批号:021014灵敏度（λ）0.5EU/ml（福州新北生化工业有限公司）;批号:030308灵敏度（λ）0.5EU/ml（湛江海洋生物制品厂）。细菌内毒素工作标准品（WSE）批号:2003-6规格:160EU/支（中国药品生物制品检定所）。细菌内毒素检查用水（BET水）批号:030517规格:5ml/支（湛江海洋生物制品厂）。
2 实验方法
2.1 鲎试剂灵敏度复核试验 按《中国药典》2000年版二部附录（XI E）依法检查，鲎试剂灵敏度均在0.5～2.0λ之间，均符合规定。
2.2 干扰试验
2.2.1 供试品细菌内毒素限值的确定，参考美国及欧洲药典，根据临床用量和预试结果阿莫西林钠的限值为0.20EU/mg。
2.2.2 供试品最小有效浓度按《中国药典》2000年版二部附录（XIE）“细菌内毒素检查法”中供试品最小有效浓度计算方法，计算出鲎试剂灵敏度为0.03EU/ml时的MVC为0.15mg/ml。
2.2.3 干扰试验预试验 将没有检测到内毒素的供试品用BET水配制成12.5，6.25，4.45，3.5mg/ml的溶液。每一浓度溶液做2支供试品管、2支添加内毒素为2λ的供试品阳性对照、2支添加内毒素为λ的供试品阳性对照管和2支添加内毒素为0.25λ的供试品阳性对照。使用两个厂灵敏度为0.5EU/ml的鲎试剂与其反应，结果见表1。
表1 阿莫西林钠干扰试验预试验鲎试剂
2.2.4 干扰试验正式试验 预试结果表明，阿莫西林钠对湛江海洋生物制品厂鲎试剂的最高不干扰浓度为4.45mg/ml，对福州新北生化工业有限公司生产鲎试剂3.5mg/ml。我们用2.5mg/ml溶液做干扰试验。用BET水将12批样品分别制2.5mg/ml的溶液，用这些溶液分别将细菌内毒素工作标准品稀释成2λ、1λ、0.5λ、0.25λ系列浓度，另取细菌内 毒素工作标准品用细菌内毒素检查水将其作同样稀释。两系列溶液中各稀释度平行做4管;同时分别以供试品稀释液和细菌内毒素检查水各做2管阴性对照管。按《中国药典》2000年版二部附录（XIE）进行干扰试验。用两个厂的鲎试剂重复上述实验，结果见表2。
表2 不同厂家TAL对阿莫西林钠的干扰试验结果
2.2.5 供试品的细菌内毒素检查 取本品用BET水制成2.5mg/ml，按《中国药典》2000年版二部附录（XIE）依法检查，每1mg阿莫西林钠中含细菌内毒素的量应小于0.2EU。
3 结果
表2结果显示，细菌内毒素工作标准品在阿莫西林钠溶液中的反应终点浓度均在0.5ES～2.0ES（0.25～1.0）之间，说明该品经制备成2.5mg/ml的溶液，无干扰作用。
4 讨论
通过预试，将阿莫西林钠制备成3.5mg/ml溶液可排除干扰因素，根据平时做实验的经验，下延1个浓度，可以节约时间和鲎试剂，我们采用了2.5mg/ml的溶液，用两个厂的鲎试剂进行干扰试验，结果表明，两个药厂生产的阿莫西 林钠的6批原料和6批制剂均无干扰作用。因此，本品可用细菌内毒素法控制热原。
参考文献
1 国家药典委员会.中华人民共和国药典，北京:化学工业出版社，2000年版二部附录，86-87;204-205.
2 卫生部药典委员会编.国内外药典（制剂）对照手册.细菌内毒素检查法，北京:化学工业出版社，552-571.
3 中国药品生物制品检定所编.《中国药品检验标准操作规范》2000年版.细菌内毒素检查法，北京:中国医药科技出版社，2000，389-398.
4 中国药品生物制品检验所2005年药典“试验技术指导原则”。
作者单位:1713400陕西永寿制药有限公司2710061西安陕西省药品检验所