糖化血红蛋白及临床应用

   糖尿病是一种常见的内分泌代谢障碍性疾病。随着我国生活水平的不断提高，人群中患病率逐年增多。过去单根据症状、尿糖及空腹血糖、餐后血糖的测定是不够充分的。糖化血红蛋白是血红蛋白与糖非酶结合产物。体内葡萄糖缓慢而不断地与其结合，并随着血糖浓度的变化而变化，因此糖化血红蛋白的水平可以反映红细胞生命120天内平均血糖水平。通过测定糖化血红蛋白，可以了解糖尿病患者的血糖控制情况。若血糖控制不良，则会并发神经性病变、视网膜病变、肾性病变、动脉粥样硬化等。

    1 测定原理

    用阳离子交换树脂层析，可将糖化血红蛋白分离出来，通过测定洗脱液中糖化血红蛋白的吸光度，再计算出其占总血红蛋白的百分率。

    2 测定方法

    2.1 操作方法 （1）收集静脉血、加入EDTA抗凝。（2）根据样品数取试管若干，分别吸取400μl溶血剂加入各试管中。（3）分别吸取80μl标准或样本放入上述各试管中，混合均匀。（4）放置5～10min，则制成了血红蛋白样本A3。

    2.2 糖化血红蛋白的制备及测定 （1）根据样品的数量，取干净的试管若干，分别吸取3.0ml阳离子树脂，放入各管中。（2）向上述试管中分别加入已预备的100μl血红蛋白样本（A3）。将层析柱插入试管中，使得橡皮塞高于液面至少1cm。（3）充分摇荡试管混合5～10min（最好使用涡旋摇荡器，如果没有则需剧烈摇荡20min。（4）然后慢慢推动层析柱进入试管，直到糖化血红蛋白提取完全。（5）上清液倒入另一支试管或直接倒入比色杯进行比色。（6）以蒸馏水作空白在415nm调零。（7）读取并记录标准，样品吸光度值。

    2.3 总血红蛋白测定 （1）根据样品数量取试管若干，分别加入5.0ml蒸馏水。（2）加入20μl血红蛋白样本（A3）。混合均匀。（3）以蒸馏水作空白在415nm调零。（4）读取并记录各管吸光度值。

    计算:糖化血红蛋白吸光度 总血红蛋白吸光度×10=糖化血红蛋白%（正常值范围6.0%～8%）。

    3 临床试验

    3.1 标本来源 我院门诊及住院糖尿病患者。

    3.2 GHb与空腹血糖的关系 （1）空腹血糖>5.6mmol/L患者共30例，其中GHb>8.0%为24例;GHb<8.0%为6例。符合率为93.3%。（2）空腹血糖>5.6mmol/L，<7.8mmol/L，其中GHb的符合率为86%;>7.8mmol/L的GHb符合率为100%，可以看出，空腹血糖与GHb值呈明显正相关，随着血糖增高GHb相应增高。

    4 讨论

    4.1 糖化血红蛋白（GHb）的形成过程是一种缓慢连续，不可逆，没有酶参与的血红蛋白与糖的缩合反应，可持续于整个细胞的生命期，其含量的高低与红细胞接触的血糖水平，持续时间与细胞寿命的长短呈正相关。

    4.2 GHb作为糖尿病人长期控制的监测指标，还随血糖和胰岛素短时间内的波动而变化，不受血糖浓度暂时影响，空腹血糖只能反映短时间的血糖高低，24h尿糖定量代表当天，它虽能反映糖尿病的控制程度，但受肾阈变化等因素的影响，给糖尿病的治疗带来一定的困难，而GHb的测定弥补了以上不足。

    4.3 葡萄糖耐量试验（OGTT）虽然是临床上常用的糖尿病的直接诊断和监测指标，但它在方法学上有些不足，多次采血，病人不易接受。通过试验，GHb与OGTT符合率很高。因此GHb的测定可作为了解糖尿病患者近2～3个月内血糖的控制情况及治疗的有效指标。

    4.4 采用餐后2hGHb和血糖的联合测定，可用作糖尿病，特别是2型“隐型”糖尿病人的早期发现和诊断指标。

    4.5 可用作孕妇围产期的常规检查项目，早期发现孕妇的糖尿病。

    4.6 可列为糖尿病的普查和健康体检项目。

    4.7 对GHb特别增高者，应警惕糖尿病酸中毒等急性并发症的发生。

    4.8 可用于糖尿病慢性综合征的研究 总之，糖尿病对人类的健康与生命有较大的威胁。因此GHb对于糖尿病的早期诊断，控制、治疗及观察其疗效具有重要的临床应用价值。

    作者单位:017000内蒙古鄂尔多斯市中心医院检验科