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前列腺特异性抗原（Prostate specific antigen，PSA）被认为是前列腺疾病的重要诊断指标。前列腺癌（PC）是男性常见肿瘤之一，PSA已成为PC的早期诊断、治疗监测和预后判断最有价值的肿瘤标志物，远胜于其他任何包括泌尿系统在内的肿瘤学意义上的标志物。随着检测免疫方法学和自动化技术的发展，PSA的测定已经能够准确、灵敏、快速的被检测，本单位应用ACCASS全自动微粒子化学发光酶免疫分析仪开展PSA测定并应用于临床数年，现将结果报告如下。
1 资料和方法
1.1 资料 病人组2001年6月～2003年10月本院门诊、住院前列腺癌（PC）患者53例，前列腺增生（BPH）患者69例，均经临床诊断和病理诊断证实。健康人组:健康体检者300例，经直肠指诊和B超检查均正常排除泌尿系统疾病，年龄25～82岁。
1.2 实验仪器和试剂 仪器为美国BECKMAN-COULTER公司ACCASS全自动微粒子化学发光酶免疫分析仪。PSA测定试剂均为原装进口配套试剂，包括试剂R1a:固相，系包被了鼠抗CEA抗体（MAb）;R1b:磷酸盐缓冲液;R1c:结合液，结合了碱性磷酸酶的Mab;R2:Dioxetane磷酸酯发光剂（AMPPD）。以及质控液:3ng/ml和95ng/ml高低两个水平。定标液:包括0.48ng/ml，2.08ng/ml，9.7ng/ml，73.1ng/ml，150.2ng/ml。样品稀释液:基质液。
1.3 检测方法 化学发光技术检测PSA是应用双位点（三明治夹心）酶联免疫测定法。标本加入反应试管后，样品中的PSA与包被在磁微粒子表面的鼠抗CEA单克隆抗PSA，碱磷酶结合的单克隆抗PSA结合，37℃孵育10min，复合物在磁场下分离并洗去未结合的部分，加入化学发光基质AMPPD，发光计检测反应物产生的光，光量子与标本中PSA含量成比例，标本中PSA含量通过储存的多点定标曲线测定。
1.4 统计学处理 用直线回归与相关和t检验。
2 结果
2.1 精密度试验 高低2份自配PSA含量分别为3.67ng/ml和89.32ng/ml的混合血清，同批测定20份，结果为均值3.66ng/ml，标准差0.15ng/ml，批内变异系数4.09%;均值90.03ng/ml，标准差2.58ng/ml，批内变异系数2.87%。同样两个水平血清连续20批测定，每批测定各1份，结果分别为均值3.67ng/ml，标准差0.18ng/ml，批间变异系数4.90%，和均值89.48ng/ml，标准差2.84ng/ml，批间变异系数3.17%。
2.2 回收试验 高低2份自配PSA含量分别为3.67ng/ml和89.32ng/ml的混合血清，用定标液2.08ng/ml，9.7ng/ml，73.1ng/ml，150.2ng/ml，做回收试验，回收率98.4%～105.6%。
2.3 体检人员结果 结果显示，按年龄分成50岁以下、50～59岁、60～69岁、70岁以上，PSA含量与年龄显著相关（P<0.01），各组间差异有显著性（P<0.05）。见表1。
表1 300例不同年龄组正常男性体PSA测定结果统计 年龄（略）
2.4 病人组PSA测定结果 53例前列腺癌（PC）患者的PSA测定结果39.61±48.7ng/ml，69例前列腺增生（BPH）病人的PSA测定结果5.84±4.37ng/ml。两者检测结果差异有显著性（P<0.01）。
3 讨论
PSA是1971年Hara等从人精液中提取到的，1979年Wang等又从前列腺组织中提纯后确定并命名。它是精液中含量最多的三种蛋白之一，浓度约0.3～3mg/ml。PSA由位于前列腺泡和导管的上皮细胞分泌具有类胰凝乳蛋白酶活性的血清蛋白酶 ［1］ ，具有较高的组织特异性。正常情况下，在前列腺泡和导管腔内与血液系统之间存在组织屏障，血清中PSA含量极低，仅是精液含量的1/106，血清中含量可能与年龄有关 ［2］ ;我们在各年龄组的检测结果差异证明了这一点。当患有PC时，肿瘤细胞的异常生长破坏组织屏障，PSA直接进入血液，加上癌细胞的蛋白水解酶活性升高促使细胞间隙的PSA进入血中，从而造成血清PSA的大幅增高 ［3］ 。病人组PC和BPH组的结果与文献报道相一致。PSA的检测方法。20世纪60年代发展的放射免疫分析法（RIA）因标记物放射性污染，半衰期短影响试剂的稳定性，分离技术时间冗长无法实现自动化等缺陷，已经逐渐被淘汰。ELISA方法因操作较为复杂，人为影响因素多，重复性差。发光免疫技术具有明显的优越性:（1）敏感度高，超过放射免疫分析法（RIA）;（2）精密度和准确性均可与RIA相比;（3）试剂稳定无毒害;（4）测定耗时短;（5）自动化程度高 ［4］ 。ACCESS应用经典的免疫学原理双抗体夹心法，采用单克隆抗体试剂，用AMPPD高灵敏稳定的发光剂，彻底改变了传统发光标记物不可避免的发光不稳定等缺点 ［5］ ，用<7μ磁微粒作为固相载体来包被抗体，扩大了表面积，测定所须样品极少（10μl），温育时间短，测定时间短（30min出结果），且交叉污染概率低。我们的ACCESS的精密度试验批内变异系数<5%，批间变异系数<5%，体现了较好的重复性，回收试验的回收率98.4%～105.6%体现了较好的准确性。ACCESS检测PSA结果准确、可靠、快速。PSA的正常参考范围及其应用。Christensson等发现PSA以多种分子形式存在，大量的临床资料显示0～4ng/ml进行PC的筛选，结果不能令人满意，原因是PSA仅是前列腺上皮细胞的标志而不是PC癌细胞的标志。研究也发现PSA低于10ng/ml时，无法有效地鉴别良性的或恶性的前列腺疾病。所以常常以“灰区”来定义PSA浓度区间，如4.0～20.0，4.0～10.0，4.0～6.0，2.0～6.0ng/ml等 ［6］ 。PSA临床应用的主要影响因素包括:（1）年龄。Partin报道PSA水平与年龄正相关 ［6］ ，我们的健康人组结果也证实了这一点。（2）前列腺检查操作，如直肠指检、膀胱镜及前列腺穿刺活检可引起PSA增加。Lecheallier认为直肠指检应在PSA检查之后 ［7］ 。（3）BPH治疗药物的影响，如服用保列治6个月可下降50%。有人建议:PSA浓度常规分0～4ng/ml、4～10ng/ml、>10ng/ml;PSA浓度0～4ng/ml时被认为患PC的风险较小;PSA浓度在4～10ng/ml时，属于诊断灰区;当PSA浓度>10ng/ml时需要进行前列腺活检。
参考文献
1 McCormack RT，Rittenhouse HG，Finlay JA，et al.Molecular forms of prostate specific antigen and human kallikrein gene family;a new era.Urology，1995，45（5）:729-744.
2 周建奖，润丹.前列腺特异性抗原的随年龄变化.临床检验杂志，1999，17（1）:25-26.
3 陈昭典.前列腺癌特异性抗原在前列腺癌早期诊断的应用.实用肿瘤杂志，2002，17（4）:220-222.
4 丛玉龙，王丁.当代检验分析技术与临床，北京:中国科学技术出版社，2002，289.
5 陶义训，吴文俊.现代医学检验仪器导论，上海:上海科学技术出版社，2002，138.
6 Brawer MK（Ed）:Prostate specific antigen.New York，Marcel，Inc，2001，237.
7 Lynn NN，Collins GN，O'Reilly PH.Prostatic manipulation has a mini-mal effect on complexed prostatespecific antigen levels.BJU Int，2000，86:65-67.
（编辑黄 杰）
作者单位:213003江苏省常州市第一人民医院