加替沙星对氨茶碱在家兔体内药动学的影响

　　【摘要】  目的  研究加替沙星对氨茶碱在家兔体内药动学的影响。方法 采用自身对照法，静脉注射给药，HPLC法测定单用及与加替沙星合用后家兔体内氨茶碱的浓度，数据用3P97药动学软件处理，计算参数。结果　氨茶碱在家兔内的药动学过程呈双室模型，单用氨茶碱与合用加替沙星的药动学参数为t1/2a（0.91±0.76）h和（0.73±0.71）h；t1/2β/h（3.47±2.01）h和（4.59±3.58）h；AUC为（46.19±18.2）μg/(h·ml)和（29.27±6.54）μg/(h·ml)；CL为（0.02±0.01）F(s)/(L·h)和（0.03±0.01）F(s)/ (L·h)。参数经双侧t检验，差异无显著性（P＞0.05）。结论　静注合用加替沙星对家兔体内氨茶碱药动学无影响。
   
　　【关键词】  氨茶碱；加替沙星；药物动力学；联合用药；高效液相色谱法
   
　　Effect of gatifloxacin on pharmacokinetics of aminophylline in rabbits

　　CHEN Rong,DENG Li-dong, DENG Jun-gang.　

　　Guangxi Medicine College,Pharmaceutical Factory, Nanning 530027,China

　　【Abstract】  Objective  To study the influence of pharmacokinetics of aminophylline when used in combination with gatifloxacin in rabbits. Methods   In self-control design with rabbits, the drugs were given by intravenous, the plasma concentration of aminophylline was determined by HPLC, and data were processd by 3P97 program to get pharmacokinetics.Results  The harmacokinetics of aminophylline used alone and combination with gatifloxacin were fit to two -compartment model. The mean parameters as follows: t1/2a  was（0.91±0.76）hand（0.73±0.71）h；t1/2β/h（3.47±2.01）h and（4.59±3.58）h；AUC　was（46.19±18.2）μg/(h·ml) and（29.27±6.54）μg/(h·ml);CL　was（0.02±0.01）F(s)/ (L·h)  and（0.03±0.01）F(s)/(L·h).All parameters　between using nophylline alone and the combination aminophylline with gatifloxacin indicated no significant difference(P＞0.05）. Conclusion Gatifloxacin can not effect the elimination of aminophylline in rabbits.
There was no influence of gatifloxacin on pharmacokinetics of aminophylline in rabbits.

　　【Key words】  aminophylline; gatifloxacin; pharmacokinetics; combined with
administration；HPLC
 
　　氨茶碱临床主要用于支气管哮喘和哮喘型支气管炎的治疗，尽管其治疗窗窄，有效治疗浓度与中毒浓度很接近，但由于疗效确切，目前仍是广泛应用的平喘药［1］，其药动学受年龄、性别、吸烟、疾病状态及合用药物等多种因素的影响，临床用药时，需要根据病人的药动学差异确定个体化的给药方案［2］。氟喹诺酮类药物由于具有抗菌谱广、高效、低毒，药动学与药效学特性优良特点，在临床上常与氨茶碱联合应用治疗呼吸系统感染。大多数氟喹诺酮类药物能延缓氨茶碱在体内的代谢，同时使用能导致氨茶碱血药浓度显著升高［4，5］。本研究采用自身对照法研究家兔单用及与加替沙星合用后氨茶碱的血药浓度及药物动力学的变化情况，以期为临床合理用药提供参考。

　　1  实验材料与试药
  
　　加替沙星注射液（华夏药业有限公司，批号：H20030067）；氨茶碱注射液（常州兰陵制药有限公司，浓度：0.25g/10ml，批号：H32025188）；氨茶碱对照品（中国药品生物制品检定所提供）；安定对照品（中国药品生物制品检定所提供）；甲醇、乙醚均为色谱纯；水为重蒸水。  Agilent 1100 型高效液相色谱仪，包括Agilent 1100 系列单元泵、柱温箱及可变波长检测器（安捷伦科技有限公司）；威玛通用多媒体色谱工作站；GL-88B旋涡混合器（江苏海门麒麟医用仪器厂）；LDZ4-0.8低速自动平衡微型离心机（北京医用离心机厂）；SD：3200超声仪（上海Branson）；FA2004电子天平（上海精科天平厂）。健康家兔8只，♀♂各半，体重（2.2±0.2）kg（桂林医学院实验中心提供），喂养普通食料，随意饮水。

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件   

　　色谱柱SinochromOSD-AP柱(4.6mm×250mm)；流动相：甲醇-水（78：22，V/V），用前过滤并超声脱气10min。流速：0.8ml/ml；柱温：35℃；检测波长：276nm。

　　2.2  血样处理 

　　取家兔样品血清0.1ml于10ml离心管中，加入10μl安定内标工作液，加乙醚4ml混合，漩涡振荡05min，1500r/min离心5min，将乙醚层（上层）转移至小试管中，40℃水浴氮气吹干，加入100μl甲醇溶解，漩涡振荡1min，取20μl进样。

　　2.3  方法的专属性 

　　用上述血样处理方法和检测条件分析了空白血清样品和含药样品，结果表明，氨茶碱与内标有较好的分离度，血浆中的杂质不干扰样品的测定。氨茶碱和内标的保留时间分别为见图1。

　　2.4  线性关系   

　　取兔空白血清0.1ml于10ml离心管中，加入氨茶碱使其浓度分别为0.5、1、2、5、10、15、20、30、40μg/ml，按“2.2血样处理”及色谱条件进行测定，分别以安定与氨茶碱的峰面积比值（Y）对浓度（X）进行直线回归计算，求出直线回归方程。实验结果表明，氨茶碱在0.5～40μg/ml浓度范围内线形关系良好，所得标准曲线方程为Y=0812X+0.0792（r=0.9994）。以信噪比S/N≥3计，最低检测限为0.01mg。图1  氨茶碱高效液相色谱图A-空白血浆；B-空白血浆+茶碱+内标；C-样品；1-氨茶碱；2-内标

　　2.5  精密度试验 

　　取家兔空白血清0.1ml于10ml离心管中，精密量取氨茶碱标准贮备液,使其稀释成三个浓度（05、20、40μg/ml）各5份，按“2.2血样处理”及色谱条件进行测定。日内精密度试验，低、中、高3个浓度的供试品同一天进样，计算日内RSD。日间实验，每天重新配制低、中、高3个浓度的供试品连续3天分别进样，计算日间RSD，精密度结果见表1。

　　表1  日内及日间精密度  （略）

　　2.6  回收率试验 

　　取0.2ml甲醇于小试管中，加入安定内标工作液20μl，精密量取氨茶碱标准贮备液，使其稀释至05、20、40μg/ml三个浓度各3份，漩涡振荡1min，取20μl进样。回收率结果见表2。

　　表2  回收率测定结果  (略)

　　2.7  实验方案及样品血样的收集 

　　8只家兔禁食24h后，静脉注射氨茶碱10mg/kg，给药后0.17h、0.33h、0.5h、1h、15h、2h、4h、6h、8h、10h、12h取耳缘静脉血。饲养3天后，第4、5、6天连续3天静脉注射加替沙星10μg/kg，第7天空腹静注加替沙星10μg/kg，随即给予氨茶碱10mg/kg后,于上述相同时间点取耳缘静脉血。离心取血清，-20℃冷冻保存。

　　2.8  数据处理 

　　8只家兔单用与合用加替沙星后氨茶碱的药-时曲线见图2，血药浓度数据用3P97程序处理，计算药动学参数，参数进行t检验，经统计学分析，药动学参数见表3，结果显示合用前后氨茶碱在家兔体内呈二室模型，合用药前后药动学参数差异无显著性（P＞0.05）。

　　图2  合用加替沙星前后氨茶碱的药-时曲线（略）

　　表3  家兔单用氨茶碱与合用加替沙星（略）

　　3  讨论
  
　　喹诺酮类药物是临床常用的一大类抗菌药物，有关这类药物与氨茶碱的药动学相互作用，人们进行了广泛的研究。氨茶碱的氧化及脱甲基化代谢途径一般都要受到这类药物的影响，主要是肝脏的混合功能氧化酶系统受到了专属性的抑制，依诺沙星是氨茶碱代谢作用最强的抑制剂，其次是环丙沙星［5］。但有些喹诺酮类药物对茶碱代谢没有影响，如诺氟沙星对茶碱代谢没有影响［6］。本实验采用多剂量给药方案，达稳态后在一个给药间隔观察药时曲线的变化，与临床每天一次，第3天达稳态的用药情况更为符合。结果显示单用氨茶碱与加替沙星合并静注给药后，主要的药动学参数AUC、t1/2β、V(c)等均无明显改变（P＞0.05），与报道的加替沙星和左旋氧氟沙星一样，均不改变茶碱的代谢过程结果一致［7］。但从实验数据来看，合用加替沙星后2h的氨茶碱血药浓度下降较快（P＜0.05），提示可能加替沙星影响氨茶碱的体内消除过程。
 
　　本实验是通过静注给药研究加替沙星与氨茶碱联合用药，结果显示加替沙星对氨茶碱药动学无显著性影响。有报道家兔口服联合两者给药显示加替沙星可提高氨茶碱生物利用度［4］，给药途径的不同加替沙星是否影响氨茶碱的药动学行为需做进一步研究。本实验是动物实验的初步结果，只能作为临床用药时的参考，在临床合并用药时，建议要结合氨茶碱血药浓度监测进行进一步的研究。

　　【参考文献】

　　1  陈新谦，金有豫.新编药物学，第13版.北京:人民卫生出版社,1992，280-281.

　　2  余自成，时国朝，屈愉双.托氟沙星对茶碱药物动力学的影响.上海第二医科大学学报，2003,Vol.23 No.5:474-476.

    3  杨继红,郑志昌. 喹诺酮类药物对氨茶碱血药浓度的影响.     中国药学会学术年会论文集(下册)，2002，1149.

    4  夏曙辉,游亮,谈恒山,等.稳态时加替沙星对茶碱在家兔体内药动学的影响.中国医院药学杂志，       2004,24(11):670-672.

    5  Sarkar M,Polk RE,Guzellan PS,et al. In vitro effect of fluoroquinoloneson theophylline metabilism in human liver microsomes.Antimicrob Agents     Chemother，1990,34:594-597.

    6  Bomles SK, Popouski Zrybak MJ,et al.Effect of norfloxacin on theophylline pharmacokinetics at steady state.Antimicrob Angents Chemother,1988,32:510-514.

　　7  邓立东，蒋学华，周静，等.氟喹诺酮类新药-加替沙星.中国临床药学杂志，2002，4(11)：206-210.

    作者单位： 1 530027 广西南宁，广西医科大学制药厂

               2 541001 广西桂林，桂林医学院附属医院

　　(编辑：罗  彬)