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随着麻醉技术的不断发展，控制性降压已成为一项重要的麻醉技术，而目前已有关于控制性降压后急性肾功能损伤的研究文献。本研究通过复制大鼠控制性降压模型，研究控制性降压后肾功能的变化及肾组织显微结构的改变，探讨控制性降压对二者的影响。
1 对象与方法
1.1 样本选择及分组 选择成年雄性Wistar大鼠40只（武汉大学医学部实验动物中心提供），体重250～350g。实验前禁食12h，可自由饮水。随机分为降压组（A组）20只，假性对照组（B组）每组20只。
1.2 实验方法 动物经7%水合氯醛(50mg/kg)腹腔注射麻醉，物理方法保温。气管切开并插管，由电动动物呼吸机给纯氧控制呼吸，并调节呼吸参数使PetCO2维持在35～45mmHg。经右股动脉和左右股静脉分别插入充盈肝素的22号静脉套管针，股动脉插管经三通管接美国HPM3型多功能监护仪连续监测平均动脉血压（MAP）、心率（HR）并用作取动脉血样。左侧股静脉插管用作微量泵输注降压药的途径。右侧股静脉插管接微量泵用作输液的通道［2～4］，用平衡盐水5～6ml/(kg·h)持续输注，分离膀胱并置管，收集尿液。保持肛温38℃。完成上述操作并待MAP、HR稳定20min时，A组泵控输注用生理盐水配制的0.02%硝普钠（SNP）20μg/(kg·min)，当MAP降至50mmHg时减少SNP输注量，以维持此血压水平120min。B组不做降压处理，以等容积生理盐水作对照。分别于降压前10min(T-10)、降压60min后(T60)和降压120min后(T120) 经膀胱和股动脉采集尿液和动脉血2ml，测尿NAG，β2-微球蛋白、血BUN、血Cr，A组、B组均在取血后缓慢输注2ml的6%贺斯补充丢失量以维持血流动力学的稳定。并于降压120min后(T120)做肾蒂动静脉结扎后取大鼠左肾观察肾显微结构。最后停用降压药物，使A组动物的血压自行回升。
1.3 检测方法 尿NAG活性测定使用比色法，试剂盒由上海太阳生物技术有限公司提供。血β2-微球蛋白测定使用放射免疫法测定。血肾功能测定：血肌酐、尿素氮检查。（尿液-20℃冻存，静脉血离心后-20℃冻存。）
1.4 病理学检查 取左肾组织做HE染色肾病理切片。光镜下观察肾小球及肾小管形态。
1.5 统计学处理 各指标以x±s表示，组间各指标比较采用t检验分析，组内比较采用方差分析及q检验，P<0.05认为差异有显著性。
2 结果
2.1 肾功能测定结果 A组T60、T120血BUN、血Cr及尿NAG较T-10显著升高，P<0.05，β2-微球蛋白T120比较T-10差异有显著性，P<0.05。A组与B组比较T60、T120血BUN、血Cr、尿NAG及β2-微球蛋白差异有显著性，P<0.05。见表1。
表1 AB组各时点血BUN、血Cr、尿NAG及β2-微球蛋白的比较 （略）
注：A组组内T60、T120与T-10比较*P<0.05；T60与T120比较＃P<0.05，与B组比较△P<0.05
2.2 病理学改变 可见肾小球内血管明显扩张，毛细血管内皮细胞肿胀。近曲小管上皮细胞有中度的颗粒变性。远曲小管上皮细胞损伤不明显。
3 讨论
BUN是体内蛋白氮代谢终产物，Cr是肌酸代谢终产物，二者主要通过肾脏排泄。血BUN和Cr的含量主要用来评价肾功能，但是BUN和Cr不是肾功能受损的早期敏感指标。
尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶是一种高分子溶酶体酶，存在于肾、脑、肝、脾等脏器中，在肾小管上皮细胞中含量最高。缺血再灌注损伤使NAG自肾小管上皮细胞排泄到尿中，因此，NAG是肾小管受损的标志物。由于肾小管对缺血、缺氧敏感，在肾功能受损的早期即可检出，因而NAG是肾功能受损的早期敏感指标。
血中β2-MG为体内有核细胞产生的一种小分子球蛋白，正常情况下β2-MG的合成速率和从细胞膜上释放的量相当恒定，并唯一通过肾小球滤过排泄且可自由通过肾小球，其中99.9%以上由近曲小管细胞重吸收并降解为氨基酸，不再返回入血，所以测定β2-MG时反映肾小球滤过功能的一个极好的指标［4］，普遍认为血浆β2-MG放免测定是估计肾小球功能的敏感指标，它比血肌酐更敏感反映肾小球滤过的变化，能早期发现肾功能损伤［5～6］。
控制性降压肾损伤的发病机制复杂，目前部分学者认为控制性降压所致肾损伤属于缺血再灌注损伤。降压期肾脏缺血缺氧，导致能量代谢耗竭，细胞坏死;并且由于钙超载以及其他炎症介质释放，白细胞浸润，进一步产生各种损害［7］。其中，氧自由基在肾脏缺血再灌注损伤的病理生理中有重要的作用：降低膜流动性，破坏蛋白质，引起线粒体、内质网、溶酶体和细胞管架系统及其功能的破坏，过多的自由基也可直接损伤肾小球毛细血管内皮细胞，使肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞变性、坏死，最终肾小球滤过率下降导致肾功能衰竭［8］。也有学者认为控制性降压所致肾损伤与全身炎性反应综合征有关。
本研究中，控制性降压后尿NAG及β2-MG、血BUN、血Cr均升高，说明肾功能已有损伤且光镜结果可见近曲小管上皮细胞有中度的颗粒变性。证实控制性降压可致肾功能损伤并且其损伤程度可随控制性降压时间的延长而加重。
我们将在今后的研究中对控制性降压肾损伤的机制及防治做进一步探讨。
【参考文献】
1 Drexler H，Hoing S，Faude F，et al.Central，and，regional，vascular，hemodynamics，following，intravenous，milrinone，in，the，conscious，rat：comparison，with，dobutamine.J Cardio-vasc，Pharmacol，1987，9(01)：563.
2 Malik AB，Kaphan JE，Sada TM.Reference sample method for cardiacoutput and regional blood flow determination sn rat.J Appl Physiol，1979，40(09)：47.
3 Matsumot N，Rorie OK，Van Dyde RA.Hepatic oxygen supply and consumption in rat sex posed to thiopental，halothane，enflurane，and isofluane in the presence ofhy-poxia.Anesthesiology，1987，66(07)：337.
4 王自正.现代医学标记免疫学.北京：人民军医出版社，2000，248.
5 罗南辉，黄献章，侯晓平，等.急性呼吸道感染血清肝胆酸、β2微球蛋白含量变化与肝肾功能损伤.中国急救医学杂志，1997，17(12)：10-11．
6 夏成云，邓隆银，周京国.β2微球蛋白在强制性脊柱炎肾损伤早期诊断中的临床评价.中国现代医学杂志，2001，11(2)：56-57．
7 吴其夏，余应年，卢建.新编病理生理学.北京：中国协和医科大学出版社，1999，191-209.
8 苏泽轩.现代移植学.北京：人民卫生出版社，1998，266-277.
(编辑：齐 永)
作者单位： 430060 湖北武汉，武汉大学人民医院麻醉科