高效液相色谱法测定健身药酒中阿魏酸的含量

【摘要】  目的 建立高效液相色谱法测定健身药酒中阿魏酸的含量。方法 采用反相高效液相色法,以ZORBAX RX-C18（4.6×250mm,5μm）色谱柱, 乙腈-水-乙酸（25:74:1）为流动相,流速为0.8ml/min,检测波长为324nm。结果 进样量在7.54～37.70μg/ml范围内有良好的线性关系（r=0.9999）, 样品回收率为98.46%，RSD=0.92% （n=5）。 结论 该方法简便、快速、灵敏、重现性好,适应于健身药酒中阿魏酸的含量测定。

【关键词】  阿魏酸;健身药酒;含量测定;高效液相

     【Abstract】  Objective  To establish a method for determination of ferulic acid in Jianshenyao vino.  Methods  The detecting conditions of HPLC were as follows:ZORBAX RX-C18 column（4.6×250mm,5μm）;mobile phase:acetonitrile-water-acetic acid （25:74:1）;flow rate:0.8ml/min;detecting wavelength:324nm  Results  The method was linear within the range of 7.54～37.70μg/ml,r=0.9999.The average recovery was 98.46% RSD=0.92%（n=5）.Conclusion  The method is simple,rapid,sensitive and satisfactory in repeatability,and can be applied to control the quality of Jianshenyao vino.

    【Key words】  ferulic acid; Jianshenyao vino;detemination of content; HPLC

    健身药酒是由当归、黄芪、淫羊霍等多味中药组成，具有提神补气、壮腰固肾、增强免疫的功能，其主药当归的主要成分为阿魏酸［1］，阿魏酸为补气、补血、活血的有效成分之一，现代研究表明阿魏酸具有抗氧化、抗血栓、降血脂和防癌等功能［2］，因此本

    方法测定阿魏酸含量为该产品的质量控制提供依据。

    1  仪器与试药

    LC-10AT岛津液相色谱仪、SPD-10A岛津检测器；UV-VIS8500紫外分光光度计。阿魏酸对照品（中国药品生物制品检定所），乙腈为色谱纯，水为重蒸水，乙酸为分析纯，样品由浙江一新制药股份有限公司提供。

    2  方法与结果

    2．1  色谱条件  色谱柱为ZORBAX RX-C18（4.6×250mm,5μm）；乙腈-水-乙酸（25:74:1）为流动相；检测波长324nm；柱温35℃，流速0.8ml/min。在此色谱条件下测得的色谱图如图1所示。

   2．2  溶液的制备

    2．2．1  对照品溶液的制备  精密称取减压干燥24h的阿魏酸对照品，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml含10μg的溶液，即得。

    2．2．2  供试品溶液的制备  精密量取本品10ml，置分液漏斗中，用乙醚提取3次（分别为25、20、10ml），合并提取液。置水浴上蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至5.0ml，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取滤液，即得。

    2．3  线性关系考察  分别精密量取对照品溶液（0.0754 mg/ml）1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml于10ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，分别吸取10μl注入液相色谱仪，以对照品进样量为横坐标，峰面积为纵坐标得回归方程：Y=68.01×105X－56.53×102，r=0.9999。结果表明进样量在7.54～37.70μg /ml范围内有良好的线性关系。

    2．4  精密度  精密吸取对照品溶液，按上述色谱条件，重复进样5次，测定峰面积计算RSD=0.55%。结果表明方法的精密度良好。

    2．5  稳定性  取供试品溶液，按上述色谱条件，分别在0、1、2、4、6、8h进样，测定峰面积计算RSD=0.57%。结果表明样品在 8 h内稳定。

    2．6  重现性  按上述供试品溶液制备方法及色谱条件，对同一批号样品，分别精密称定制成5份供试品溶液，依次进样测定，计算其阿魏酸含量RSD=0.98%。结果表明本方法重现性良好。

    2．7  回收率  精密称定已知含量样品5份，精密加入阿魏酸对照品适量，按上述色谱条件测定峰面积并计算含量，结果显示回收率良好,见表1。 表1  回收率试验结果 

    2．8  空白对照  取缺当归样品按供试品制备法制备，并取适量注入液相色谱仪，结果显示在阿魏酸相同保留时间处无吸收峰。

    2．9  样品测定  按上述供试品溶液制备方法及色谱条件，对3批样品中的阿魏酸含量进行测定，结果见表2。表2  样品的测定结果

    3  讨论

    测定波长的选择:取阿魏酸适量，加甲醇溶解制成对照品溶液，置紫外分光光度计下记录紫外吸收光谱，结果显示，阿魏酸在324nm波长处有最大吸收，故选324nm为测定波长。

    健身药酒的原质量标准中无含量测定项，本文对该制剂中当归的有效成分阿魏酸进行了含量测定，这为提高产品的质量标准提供了依据。实验证明，该含量测定方法精密度、重现性、稳定性、回收率均较好，可作为该制剂的质量控制方法。

【参考文献】
  1 徐礼焱，沙世炎.中草药有效成分分析法（下册）.北京：人民卫生出版社，1984,126.

2 欧仕益．阿魏酸的功能和应用.广州食品工业科技，2002，18（4）：50-53.

作者单位：321100 浙江兰溪 ，浙江一新制药股份有限公司