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【摘要】 目的 建立菊明降压丸中大黄酚的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法测定菊明降压丸大黄酚的含量。流动相：甲醇—0.1%磷酸溶液（75：25）；流速1.0ml/min；检测波长：430nm。结果 大黄酚在1.0～10.0μg/ml浓度范围内，峰面积与浓度呈良好的线形关系（r=0.99999）；平均回收率为99.5%，RSD=0.7%（n=6）。结论 本方法操作简便、结果准确可靠、重现性好，可作为菊明降压丸的定量方法。
【关键词】 菊明降压丸；大黄酚；HLPC
【Abstract】 Objective To establish a method for the determination of chrysophenol in Jumingjiangya Pills.Methods Chrysophenol was determined by HPLC using methanol and 0.1% phosphorisacid solution （75:25） as mobile phase. The flow rate 1.0 ml/min（r=0.99999）and detectionwavelength : 430nm.Results The linear were 1.0～10.0μg/ml.The mean recovery was 99.5% and RSD was 0.7%（n=6）.Conclusion The method appeared to be simple, sensitive and accurate.
【Key words】 Jumingjiangya pills; chrysophenol; HPLC
菊明降压丸收载于《卫生部药品标准中药成方制剂》第三册，是由野菊花、决明子两味中药组成，具有降低血压之功效，主要用于高血压及其引起的头痛、目眩。原标准中仅有一项显微鉴别，无含量测定项，为了控制该制剂的质量，笔者采用HPLC法对菊明降压丸中的主要成分决明子中的大黄酚进行了测定，该方法简单、准确、重现性好，能有效地控制该制剂的质量。
1 仪器与试药
岛津LC2010高效液相色谱仪，大黄酚对照品（批号：110796—200514），购于中国药品生物制品检定所；样品和阴性对照品由盘锦恒昌隆药业有限公司提供（样品批号：050908、061101、060504），甲醇、磷酸为色谱纯，水为纯化水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱：AgilentC18（4.6mm×150mm，5μm）；流动相：甲醇—0.1%磷酸溶液（75：25）；流速1.0ml/min；检测波长：430nm；进样量：20μl。
2．2 对照品溶液的制备 取精密称取置五氧化二磷干燥器中干燥至恒重的大黄酚对照品适量，精密称定，置容量瓶中，加甲醇制成每1ml含4μg的溶液，即得。
2.3 供试品溶液的制备 取本品100粒，精密称定，研细，约取10g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，加盐酸2ml，摇匀，置水浴中加热回流1h，冷却，转移至50ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.4 阴性对照液的制备 取缺决明子的阴性样品适量，按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。
2.5 空白干扰试验 取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液按上述色谱条件测定，结果见图1。样品色谱图中与对照品溶液有相同保留时间（tR=min）的色谱峰，而阴性对照溶液在此保留时间无此峰，说明菊明降压丸中的其他成分对绿原酸的测定无干扰。
（1）对照品（2）样品（3）阴性样品2.6 线性关系考察 分别精密量取对照品储备液（每1ml含10μg）1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，按上述色谱条件测定，以峰面积Y对对照品浓度C进行线性回归，得回归方程为Y=5.812×104C－446，r=0.99999。表明，大黄酚在1～10μg/ml范围内呈良好的线性关系。
2.7 精密度考察 精密吸取上述大黄酚对照品溶液，依上述色谱条件，连续进样5次，RSD=0.4%。
2.8 重复性试验 取同一批号的菊明降压丸，分别精密量取6份，按上述供试品溶液制备方法，依上述色谱条件依法进行测定，并计算含量，RSD=0.6%。
2.9 稳定性试验 取同一供试品溶液，依上述色谱条件依法进行测定，每隔3h 1次，测得峰面积平均值为161658，其RSD=0.7%（n=6），说明样品溶液至少在24h内稳定。
2.10 加样回收率试验 采用加样回收法。精密吸取已知含量的样品（批号 061101）溶液6份，精密加入大黄酚对照品，按上述供试品溶液制备方法，依上述色谱条件依法进行测定大黄酚含量，并计算回收率，测定结果见表1。
2.11 样品测定 取3个批号的样品，按上述供试品溶液制备方法，依上述色谱条件依法进行测定大黄酚含量，结果见表2。表1 加样回收率试验结果
3 讨论
3.1 色谱条件的选择 测定大黄酚的含量，文献报道所采用的色谱条件多为药典所收载的条件甲醇—0.1%磷酸溶液，参考相关文献，试用甲醇—0.5%冰醋酸，乙腈—0.1%磷酸为流动相，结果以甲醇—0.1%磷酸溶液（75：25）为本品测定大黄酚含量的流动相，该制剂中的大黄酚与其他组分均能达到基线分离，保留时间适宜，效果较好。
3.2 检测波长的选择 从蒽醌类化合物的紫外吸收光谱来看，在254nm、280nm、430nm处均有较强的吸收，大多数文献报道采用254nm的检测波长，本实验中发现在254nm处测定，大黄酚色谱峰附近有干扰物质存在，故参考药典［1］，选择430nm为检测波长。
3．3 提取方法的选择 大黄中含有游离型和结合型蒽醌成分，含量测定是检测游离型蒽醌成分的含量，故本文采用加盐酸并水浴加热回流1h水解提取的方法，测定大黄酚的含量，选择甲醇、乙醚、氯仿作为提取溶剂进行考察，结果表明氯仿、甲醇效果都很好，考虑甲醇比较环保，故选择甲醇为提取溶剂。
【参考文献】
1 国家药典委员会.中华人民共和国药典,一部.北京：化学工业出版社，2005，335.
作者单位：1 124010 辽宁盘锦,盘锦市药品检验所 2 124010 辽宁盘锦,盘锦市计量测试所3 132500 吉林蛟河,蛟河市人民医院