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【摘要】 目的 了解东莞市妇女宫颈癌前病变（CIN）的发病情况，采取医学干预措施预防宫颈癌变。方法 对2006年1～6月东莞市自愿参加宫颈疾病普查的妇女，用细胞DNA定量分析和病理学检查方法。结果 调查东莞市妇女9277人中，用细胞DNA定量分析筛查发现异倍体细胞及其异倍体细胞峰220例，占2.37%，经病理学进一步检查确诊发现CIN 51例，患病率为0.55%。结论 用细胞DNA定量分析方法能及早发现宫颈癌前病变，及早采用医学干预手段防止癌变，用于宫颈癌及癌前病变筛查可提高宫颈病变检出率，是宫颈癌前病变筛查的有效方法。
【关键词】 细胞DNA定量分析 筛查 宫颈癌前病变
A study on application of DNA image cytometry in screening cervical dysplasia
LI Zu-hai, TANG Yi-ming, LI Zhi-gang, et al.Dongguan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Guangdong 523072,China
【Abstract】 Objective To explore the situation of cervical dysplasia in Dongguan and prevent cervical dysplasia by medical intervention measures. Methods During January to June 2006 the voluntary women in Dongguan were screened by DNA image cytometer and each doubtful case was performed with biopsy. Results A total of 9277 women were screened for cervical carcinoma in Dongguan. There were 220 DI>2.5 cases in 9277 samples （2.37%）, 51 cases were cervical dysplasia in pathological diagnosis （0.55%）. Conclusion The screening for cervical dysplasia by DNA image cytometer could be higher sensitivity and can be used in early medical intervention. It is an effective method of screening for cervical dysplasia.
【Key words】 DNA image cytometer; screening; cervical dysplasia
目前大量的研究与实践结果表明，严重危害妇女健康的宫颈癌是惟一一种经过医学干预能使发病率和死亡率下降的人类恶性肿瘤［1］，预防和控制宫颈癌的关键是早期诊断和治疗癌前病变，即宫颈上皮内瘤样变（cervical intraepithelial neoplasia, CIN）。本研究利用宫颈DNA检测联合宫颈细胞学检查，对东莞市妇女进行宫颈癌前病变筛查，并评价筛查的效果。
1 对象与方法
1.1 研究对象 2006年1～6月东莞市自愿参加宫颈疾病普查的妇女，共普查9277人，年龄最大84岁，最小19岁，平均年龄37.68±6.89 ，其中30岁1487人，31～40岁3864人，41～50岁2923人，51～60岁894人，61岁以上109人。
1.2 研究方法
1.2.1 样本采集 用宫颈刷采集宫颈细胞样本，将样本浸泡在样本收集管固定液内，旋紧管盖后震荡摇晃，贴上标签，送回实验室制片。
1.2.2 液基薄层制片及染色 将装有固定液的样本，加入0.1%DTT消化液消化、甩片，制成薄层细胞学片，用FeulgenDNA染色。
1.2.3 细胞DNA定量分析 所有福尔根（Feulgen）染色片用AcCell全自动细胞图像分析系统进行扫描处理［2，3］，该系统已达到欧洲定量细胞病理学会所制订的有关DNA定量分析图像系统的各项标准［2，3］。
1.2.4 结果判定 根据AcCell系统诊断软件所做的细胞DNA倍体分析结果：（1）正常2C细胞为主：未见异倍体细胞及异倍体细胞峰。（2）DNA指数（DNA Index，简称DI）大于2.5细胞及DNA指数1与2之间的细胞数超过被检测细胞总数的10%：建议活检。（3）出现异倍体细胞峰及大量DNA指数大于2.5细胞：建议活检。凡是有DNA指数大于2.5以上细胞的玻片，都要经过细胞技术员在显微镜下逐一对DNA指数大于2.5细胞进行核实，以排除AcCell系统将垃圾和重叠的细胞核误认为癌细胞或异常细胞。
1.2.5 阴道镜及病理学检查 凡DNA定量分析结果建议活检的［1.2.4 结果判定（2）、（3）］，均进行阴道镜检查并对宫颈可疑部位进行四点以上的组织活检。每例活检样本均送东莞市人民医院病理实验室检查并出诊断报告。
1.2.6 主要器材 （1）加拿大BC肿瘤研究所研制的全自动细胞DNA定量分析仪；（2）AcCell全自动细胞图像分析系统；（3）宫颈刷，由武汉兰丁肿瘤早期诊断检测中心提供。
2 结果
2.1 AcCell系统诊断软件所做的细胞DNA倍体分析结果 见表1。表1 DNA检测结果9277份样本中，正常2C细胞为主9057例，占97.63%；DNA指数大于2.5细胞220例，占2.37%。30岁以下样本1487份，DI>2.5细胞16份，占1.08%；31～40岁样本3864份，DI>2.5细胞88份，占2.28%；41～50岁样本2923份，DI>2.5细胞85份，占2.91%；51～60岁样本894份，DI>2.5细胞26份，占2.91%；61岁以上样本109份，DI>2.5细胞5份，占4.59%。
2.2 病理检测结果 见表2。表2 病理检测结果 9277份样本中，DNA指数大于2.5细胞220例，做活检送病理检测，共检出CIN51例，患病率为0.55%。30岁以下2例，患病率为0.13%；31～40岁23例，患病率为0.60%；41～50岁17例，患病率为0.58%；51～60岁8例，患病率为0.89%；61岁以上1例，患病率为0.92%。
2.3 宫颈癌前病变（CIN）分级构成情况 见表3。表3 宫颈癌前病变分级构成情况 9277份样本中，共发现宫颈上皮内瘤样病变（CIN）51例，其中CIN Ⅰ 8例，占15.7%，CIN Ⅱ7例，占13.7%，CIN Ⅲ 36例，占70.6%。
3 分析与讨论
本研究是以人群自愿参与普查为基础，共采集宫颈细胞DNA样本9277份，利用DNA倍体定量分析进行初步筛查，出现异倍体细胞及异倍体细胞峰再进行活检，以病理组织学诊断为金标准。DNA异倍体的出现是遗传基因变异所致的，也是染色体异常改变的标志［4～6］。本次研究用细胞DNA定量分析筛查共发现异倍体细胞及异倍体细胞峰220例，占2.37%（其中DNA倍体异常8例，占0.09%），这部分人是我们重点调查跟踪对象，对这部分人及早采取医学干预手段，防止癌变，具极其重要的临床意义。DNA-ICM通过对DNA含量测定来掌握和了解肿瘤细胞遗传基因变异过程。因此，DNA异倍体的定量分析可作为一种评估肿瘤预后的指标［6，7］。对出现异倍体细胞及异倍体细胞峰220例进一步做病理学检查发现宫颈上皮内瘤样病变（CIN）51例，CIN患病率为0.55%；年龄段方面，30岁以下2例，患病率为0.13%；31～40岁23例，患病率为0.60%；41～50岁17例，患病率为0.58%；51～60岁8例，患病率为0.89%；61岁以上1例，患病率为0.92%；年龄越大，患病率有所增加。
宫颈上皮内瘤样病变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）是指宫颈癌的癌前病变，它包括宫颈非典型增生及宫颈原位癌，两者的上皮变化性质相同，程度不同。根据细胞异型的程度将CIN分为三级，CINⅠ级相当于宫颈轻度非典型增生、CINⅡ级相当于宫颈中度非典型增生、CIN Ⅲ级相当于宫颈重度非典型增生及宫颈原位癌。CINⅠ、CINⅡ、CIN Ⅲ发展为癌的危险性分别为15%、30%、45%；甚至CINⅠ、CINⅡ可以直接发展为浸润癌，而不经过CIN Ⅲ阶段。从宫颈癌前病变到癌的演变一般10年左右，这将是重要的不可忽视的时间。所谓宫颈癌前病变是可以预防、可以治愈的疾病，其关键也在于此期的及时诊断和正确处理［8］。本次调查发现的51例CIN中，其构成比方面，CINⅠ8例（占15.7%），CINⅡ7例（占13.7%），CIN Ⅲ36例（占70.6%）。在大多数子宫颈鳞状细胞癌及HSIL（high-grade squamous intraepithelial lesion）病例中均可发现DNA倍体异常细胞［9～11］。异倍体细胞的出现象征着染色体结构和数量出现异常变化，也是细胞恶变的早期特征。有人报道在HSIL病例中如有DNA倍体异常细胞，最终可发展成致浸润性子宫颈癌。因此，这类病例要进行相应的临床处理［12，13］。据郎景和研究资料，宫颈浸润癌的好发年龄在50岁以上，符合从宫颈上皮内瘤样病变到宫颈癌大约10～20年的演变过程，这是一个可以干预或加以阻断的时期，是癌瘤早期防治的重要阶段［14］。
本次结果表明，采用细胞DNA定量分析方法能及早发现宫颈癌前病变，及早采取预防和治疗等医学干预措施，防止癌变发生。用于宫颈癌及癌前病变筛查可明显提高标本质量，提高宫颈病变检出率，且与病理组织学对照的诊断符合率高，是宫颈病变筛查的有效方法。
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作者单位：523072 广东东莞，东莞出入境检验检疫局