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【摘要】 目的 探讨粪便β-葡萄糖醛酸苷酶（β-GD）预测母乳性黄疸的临床意义。方法 采用酶学比色法对47例母乳性黄疸患儿及60例正常新生儿粪便中的β-GD活性浓度进行测定，并分析母乳性黄疸患儿β-GD活性浓度与胆红素浓度的相关性。结果 母乳性黄疸患儿粪便β-GD活性浓度为（1.07±0.30）u/L，较正常新生儿［（0.50±0.28）u/L］明显增高，二者之间差异非常显著性。患儿粪便β-GD活性浓度与血胆红素浓度呈明显正相关。黄疸消退期粪便β-GD活性浓度［(0.72±0.26)u/L］较高峰期［(1.07±0.10)u/L］明显降低，二者之间差异有非常显著性。结论 粪便β-GD活性浓度增高不仅与母乳性黄疸的发生有关，而且与其严重程度及演变过程密切相关，检测粪便β-GD对预测母乳性黄疸有非常显著的临床意义。
【关键词】 黄疸；新生儿；葡萄糖醛酸苷酶
母乳性黄疸是新生儿黄疸中较常见的一种疾病，其发生率欧美国家为0.5%～2.6%，日本为10%～15%，我国青岛报告为19.9%［1］。其病因至今尚无定论，多数学者认为与母乳中3α-20β-孕二醇、脂肪酸对肝脏二磷酸尿苷葡萄糖醛酸转移酶（UDPGT）的抑制作用，以及胆红素的肠-肝循环增加有关，后者是目前公认的最有可能的病因［2］。而β-葡萄糖醛酸苷酶（β-glucuronidase,β-GD)在增加胆红素肠-肝循环方面起重要作用［3］。为探讨β-GD的检测在预测母乳性黄疸的临床意义，本研究对正常新生儿和母乳性黄疸患儿粪便中的β-GD活性浓度进行测定，现将结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
1.1.1 黄疸组
均系我院儿科门诊病房2003年6月～2005年6月所收治的迟发性母乳性黄疸患儿，共47例。其中男28例，女19例，日龄7～47天，平均（16.8±7.7）天，胎龄37～41周，平均（38.7±1.27）周，出生体重2300～3900g，平均（2986±396）g；无产伤及窒息史。诊断标准：（1）完全母乳喂养，在出生后1周末出现黄疸或生理性黄疸持续不退，或生理性黄疸消退后复现；（2）血清胆红素以未结合胆红素升高为主；（3）发育正常，精神食欲好；（4）排除感染、溶血、缺氧、头颅血肿、肝功能障碍及遗传代谢性疾病等所致的黄疸；（5）停止母乳喂养后黄疸迅速减轻或消退。
1.1.2 对照组
均系我院产科同时期出生的足月正常新生儿60例。其中男28例，女32例；日龄为2～30天，平均（9.1±8.3）天；胎龄37～41周，平均（9.1±1.0）周；出生体重2500～4200g，平均（3182±375）g；无产伤及窒息史；生后母乳喂养。
1.2 方法
1.2.1 标本的收集与处理
收集患儿及正常新生儿粪便1g左右于试管中，加入2ml蒸馏水搅匀，1500r/min离心10min，吸取中层澄清液于标本瓶中，-20℃保存。同时抽取静脉血2ml检测血清胆红素浓度。
1.2.2 β-GD活性浓度测定
（1）测定方法：按Fishman等［4］报道的测定方法，略加修改，主要步骤为：①取标本0.1ml加磷酸盐缓冲液0.8ml，分别置于对照管和测定管中，后者加基质液0.1ml；②混匀后置37℃水溶液中18h，取出流水冷却5min后，在对照管加入基质液0.1ml；③两管中分别加入甘氨酸氢氧化钠缓冲液3ml及75%乙醇1ml；④以对照管调零，波长为550nm，用723分光光度计读取测定管光密度，查标准曲线即得0.1ml标本中该酶活性浓度。（2）酶活性单位的定义及其计算［5］；酶活性单位定义为在实验规定条件下，每分钟催化1μmol底物所需的量。β-GD活性浓度通常用每分钟稀释出的酚酞量来表示，即u/L。
1.3 统计学方法
各组测定结果采用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较用t检验。对β-GD与血胆红素的关系应用相关分析法。
2 结果
2.1 正常新生儿粪便中β-GD活性浓度
对60例正常新生儿粪中β-GD进行测定，其结果为：（0.5±0.28）u/L。并对不同日龄儿的粪便β-GD活性浓度进行比较，结果显示不同日龄婴儿粪便β-GD活性浓度差异无显著性（见表1）。表1 不同日龄正常新生儿粪便β-GD活性浓度（略）
2.2 两组粪便中β-GD活性浓度与血胆红素浓度
母乳性黄疸组患儿粪便β-GD活性浓度较正常新生儿组明显增高，二者之间差异有非常显著性（P＜0.001）。在粪便β-GD活性浓度测定同时，对新生儿血清胆红素浓度进行测定。对照组血胆红素浓度为（100±36）μmol/L，黄疸组为（243±56）μmol/L，二者差异有非常显著性（P＜0.001），见表2。表2 两组粪便β-GD活性浓度及血胆红素浓度比较（略）
2.3 母乳性黄疸患儿粪便β-GD活性浓度与血清胆红素浓度的关系
对47例黄疸组新生儿粪便β-GD活性浓度与血胆红素浓度进行相关分析，其相关系数（r）为0.449，说明母乳性黄疸新生儿粪便β-GD活性浓度与血清胆红数性浓度呈正相关（t=3.371，P＜0.001）。
2.4 母乳性黄疸高峰期与消退期β-GD活性浓度
母乳性黄疸消退期粪便β-GD活性浓度及血胆红素浓度较高峰期明显降低，且消退期与高峰期的测定值差异有统计学意义（均P＜0.001），见表3。表3 母乳性黄疸不同时期粪便β-GD活性浓度与血胆红素浓度变化（略）
3 讨论
自1960年Arias等首次报道母乳喂养与新生儿黄疸的关系以来，国内外对母乳性黄疸的研究逐渐增多。但迄今为止，其病因及发病机制尚不明确，目前多认为与胆红素的肠-肝循环增加关系较为密切。在新生儿小肠内β-GD含量丰富，其来源包括：（1）母乳β-GD；（2）新生儿自身产生；（3）新生儿肠道正常菌群建立后产生细菌性β-GD。新生儿期β-GD主要来自母乳，后二者产量较少［6］。β-GD能分解胆红素-葡萄糖醛酸酯的酯链，使肠道的直接胆红素转化为未结合胆红素，后者是一种脂溶性的非极性物质，易在小肠重吸收进入肠-肝循环。Gourley等［7］报道，母乳β-GD含量较牛奶及配方奶明显增高，而且母乳喂养新生儿血胆红素浓度与母乳及新生儿粪便中的β-GD含量呈正相关。上海瑞金医院对11例母乳性黄疸患儿和13例人工喂养儿粪便β-GD进行检测，结果母乳性黄疸患儿粪便β-GD均高于人工喂养儿，说明新生儿的粪便β-GD与母乳性黄疸存在相关性［6］。
本研究结果显示，尽管正常组和黄疸组均为母乳喂养，但母乳性黄疸组患儿粪便β-GD活性浓度较正常组新生儿明显增高，二者之间差异有非常显著性（P＜0.001）。在母乳性黄疸消退期，患儿粪便β-GD活性浓度明显降低，与黄疸高峰期相比差异具有非常显著性（P＜0.001）。均说明β-GD在母乳性黄疸发病中起主要作用。对母乳性黄疸患儿粪便β-GD活性浓度与血清胆红素浓度相关性分析显示，二者呈明显正相关（P＜0.001），与文献报道一致［6，7］。粪便β-GD活性浓度不仅与母乳性黄疸发生有关，而且与其严重程度及疾病演变密切相关，进一步证实了β-GD是母乳性黄疸主要病因之一。由于母乳β-GD是新生儿小肠β-GD的主要来源，在母乳性黄疸新生儿中，母乳β-GD活性浓度较高，喂哺母乳后患儿肠道β-GD含量增加或活性增加，β-GD可很快使结合胆红素分解为未结合胆红素，迅速从肠道吸收，增加肠-肝循环，从而产生母乳性黄疸。所以检测粪便β-GD的活性浓度对预测母乳性黄疸的发生、发展及严重程度有极显著的临床意义。目前临床上尚缺乏单一检测手段以确诊母乳性黄疸，只能排除各种常见病因后做出诊断，耗时长、耗费高，而检测粪便β-GD可从某程度预测母乳性黄疸，且标本来源方便，检测简便，耗费低，值得临床推广。
【参考文献】
1 姜红，方淑霞，魏书珍，等.121例母乳性黄疸综合征临床分析，中国实用儿科杂志，1997，12：252.
2 李佩红.母乳性黄疸研究进展.实用儿科临床杂志，1994，9：109-110.
3 余春莉，徐景蓁.母乳性黄疸.新生儿科杂志，1996，11：88-90.
4 Fishman WH, Kato K, Anatiss CL, et al. Human Serum β-glucuronidase:its measurement and some of its properties. Clin Chim Acta,1967,15:435-447.
5 中华医学检验学会.酶活性浓度测定的推荐方法：测定人血清（血浆）中酶活性浓度方法总则（草案）.中华医学检验杂志，1994，17：121-123.
6 金汉珍，黄德珉，官希吉.实用新生儿科，第2版.北京：人民卫生出版社，1997，219-221.
7 Gourley GR, Arend RA. β-Glucuronidase and hyperbilirubinaemia in breast-fed babies. Lancet,1986,1:644-647.
作者单位： 511300 广东增城，增城市妇幼保健院儿科
（编辑：黄鉴一）
（收稿日期：2005-12-21）