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【摘要】 目的 探讨抑癌基因p27和转化生长因子β1（TGFβ1）在宫颈腺癌中的表达及两者的相关性。方法 采用SP免疫组化法检测63例宫颈腺癌组织中p27、TGFβ1的表达。 结果 p27、TGFβ1在宫颈腺癌中阳性表达率分别为63.5%（40/63）、76.2%（48/63），p27在高、中分化腺癌的表达明显高于低分化腺癌（P<0.05），不同分化程度的癌组织中TGFβ1的表达差异无显著性。p27与TGFβ1在宫颈腺癌中的表达无显著相关性（P>0.05）。 结论 p27蛋白表达与宫颈腺癌分化程度有关，p27在宫颈腺癌发展中可能起着重要作用;宫颈腺癌中p27表达与TGFβ1表达无相关性，可能是由于癌细胞耐受TGFβ1介导的生长抑制。
关键词 宫颈腺癌 p27 TGFβ1 免疫组化法
Expression of p27and TGFβ1 in cervical adenocarcinoma
Liu Zhihong，Hu Jun，Yang Jianfeng，et al.
Department of Pathology，Hunan Provincial Cancer Hospital，Changsha410006.
【Abstract】 Objective The aim of this study is to detect the aberrant expression and coexpression of p27and TGFβ1in cervical adenocarcinomas.Methods The expression of p27and TGFβ1were studied by S-P immunohis-tochemical staining in63cases of cervical adenocarcinomas.Results The positive rates of p27，TGFβ1expression in63cases of cervical adenocarcinomas were63.5%（40/63），76.2%（48/63），respectively.The positive expression rates of p27in well and moderately differentiated cells significantly higher than poorly differentiated cells（P<0.05）.However，there was no significant difference between well，moderately and poorly differentiated cells of TGFβ1expres-sion.The expression of p27was no related to the expression of TGFβ1in cervical adenocarcinomas（P>0.05）.Con-clusion p27might play an important role in the development of cervical adenocarcinoma.There was no significant correlation between the expression of p27and that of TGFβ1in cervical adenocarcinomas，which may be caused by carcinoma cells tolerate signals of growth suppression via TGFβ1.
Key words cervical adenocarcinomas p27 TGFβ1 immunohistochemistry
转化生长因子β1（transforming growth factor beta-1，TGFβ1）是一类多功能的多肽类生长因子，对细胞的增殖与分化、细胞外基质的产生、血管的生成、细胞凋亡及机体免疫系统起着重要的作用。p27是新近发现的抑癌基因，对细胞周期的进展起负调节作用。笔者利用免疫组化方法检测宫颈腺癌中p27、TGFβ1的表达，探讨其表达的临床意义及两者表达的相关性。
1 材料与方法
1.1 材料选择 收集湖南省肿瘤医院1996年5月～2001年2月门诊宫颈腺癌活检标本63例，经10%福尔马林固定，石蜡包埋，HE染色确诊。患者年龄27～77岁，中位年龄50岁。其中高分化腺癌19例，中分化腺癌36例，低分化腺癌8例。
1.2 试剂与方法 鼠抗人p27单克隆抗体、兔抗人TGFβ1多克隆抗体、SP免疫组化试剂盒及DAB显色剂均购自福州迈新公司。SP免疫组化染色按试剂盒说明书进行。抗原修复采用常规柠檬酸缓冲液微波修复。用0.01M PBS液代替一抗做阴性对照，已知p27、TGFβ1阳性宫颈腺癌做阳性对照。
1.3 结果判断 p27染色定位于细胞核，在高倍镜下观察至少10个高倍视野，肿瘤细胞中有10%以上阳性细胞判定方法为p27表达阳性 ［1］ 。TGFβ1染色定位于细胞质，阳性细胞细胞质呈棕黄色颗粒染色，阳性细胞<5%（-）;阳性细胞5%～25%（+）;阳性细胞25%～50%（++）;阳性细胞>50%（+++） ［2］ 。
1.4 统计学方法 应用χ 2 检验、Spear相关分析进行统计学处理。
2 结果
2.1 宫颈腺癌中p27、TGFβ1的表达 宫颈腺癌中p27、TGFβ1的阳性表达率分别为63.5%（40/63）、76.2%（48/63）。p27的阳性表达率在高、中、低分化腺癌中分别为73.7%（14/19）、69.4%（25/36）、12.5%（1/8）;TGFβ1的阳性表达率在高、中、低分化癌中分别为68.4%（13/19）、80.6%（29/36）、75.0%（6/8）。p27在高、中分化腺癌中的表达明显高于低分化腺癌（P<0.05），TGFβ1的表达与分化程度无关，见表1。
表1 p27、TGFβ1的表达与分化程度的关系 （略）
2.2 宫颈腺癌中p27、TGFβ1表达的相关性 p27阳性病例组中，80%（32/40）病例TGFβ1阳性;p27阴性病例组中，69.6%（16/23）TGFβ1阳性，宫颈腺癌中p27的表达与TGFβ1的表达无显著相关性（P>0.05）。见表2。
表2 p27表达与TGFβ1表达的相关性 （略）
3 讨论
细胞无限制性生长是肿瘤的特征。肿瘤细胞周期移行受一系列细胞周期调节因子的控制，包括细胞周期素（cy-clins）、细胞周期素依赖性激酶（cyclins-dependent kinases，CDKs）、细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白（cyclins-dependent kinases inhibor，CDKI）。p27是CDKI家族成员之一，是细胞周期中负性调节因子，主要抑制G1期cyclin E-CDK2复合物及cyclin D-CDK4复合物的活性，使细胞周期停滞于G1期。Farley等 ［3］研究表明，p27在正常宫颈腺体向宫颈腺癌转化过程中表达下降，p27蛋白参与子宫颈腺癌的发生。本研究显示，31.7%（20/63）宫颈腺癌失表达，且阳性中以弱表达为主。p27在高、中分化腺癌中的表达明显高于低分化腺癌，提示p27改变是宫颈腺癌发生、发展的重要分子事件。
TGFβ1是人体多种上皮起源细胞的生长调节因子，通过与细胞表面的TGFβ1受体（TGFβ1R）结合调节细胞生理活动。TGFβ1在细胞周期调节中具有重要作用。在TGFβ1处理的细胞系中，诱导p27蛋白表达量增加，使细胞周期停滞在G1期，细胞生长停止 ［4］ 。但本研究显示，76.2%（48/63）宫颈腺癌TGFβ1表达阳性。低分化癌组中也出现高表达75%（6/8）。TGFβ1表达与p27表达无显著相关性。有报道宫颈腺癌过表达TGFβ1，其分子机制尚不清楚 ［3］ 。但TGFβ1在宫颈腺癌高表达为何没有诱导p27表达而抑制细胞生长?肿瘤细胞耐受TGFβ1介导的生长抑制信号是其可能的原因。已有研究表明TGFβ1R、TGFβ1下游信号Smads的突变、水平降低或功能丧失都可造成肿瘤细胞耐受，致使TGFβ1对肿瘤细胞无增殖抑制作用 ［5］ 。而肿瘤细胞产生的TGFβ1又能增加瘤细胞与基质相互作用，抑制免疫系统，增加血管形成，促进癌细胞的侵袭及转移。
参考文献
1 Sakurai K，Hata S，Amano S，et al.Immunohistochemical study of p53，p27and PCNA expression in esophageal cancer.GanTo Kagaku Ryoho，1998，25（9）:1269-1272.
2 马颖，李冠群.大肠癌组织中TGF-α，TGFβ1的表达及意义.中国医科大学学报，2003，32（6）:239-241.
3 Farley J，Gray K，Nycum L，et al.Endocervical cancer is associated with an increase in the ligands and receptors for transforming growth factor-beta and a contrasting decrease in p27（Kip1）.Gynecol Oncol，2000，78（2）:113-122.
4 Peng D，Fan Z，Lu Y，et al.Anti-epidexmal growth factor receptor monoclonal antibody225up-regulates p27Kipl and induces G1arrest in prostatic cancer cell line DU1451.Cancer Res，1996，56:3666-3669.
5 李洪燕，陈晓光.转化生长因子β与肿瘤研究进展.国外医学·肿瘤学分册，2002，29（1）:17-20.
（编辑川 夏）
作者单位:410006长沙湖南省肿瘤医院病理科
410006长沙湖南师范大学医学院