点击显示 收起
【摘要】 目的 探讨米非司酮治疗子宫内膜异位症的免疫学机制。方法 以传统药物丹那唑为对照，通过酶联免疫竞争法检测用药前后血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）与白细胞介素6（IL-6）的水平。结果 用药3个月后，米非司酮组血清中TNF-α与IL-6的水平均明显降低，差异有显著性（P<0.05）。结论 米非司酮10mg/d治疗子宫内膜异位症3个月，患者血清中TNF-α与IL-6的水平明显降低，是其治疗子宫内膜异位症的机制之一。
【关键词】 米非司酮；子宫内膜异位症；TNF-α；IL-6
Effects of mifepristone on TNF-α and IL-6 in peripheral serum in patients with endometriosis
LU Jing.
Handan Center Hospital,Handan 056001,China
【Abstract】 Objective To study the immune mechanism of mifepristone in the therapy of endometriosis.Methods Compared with danazol,serum TNF-α and IL-6 were measured before and after mifepristone treating endometriosis with the methods of enzyme-linked immunosorbent assay.Results After the 3 months treatment,there were significant difference in serum TNF-α and IL-6 before and after using mifepristone (P<0.05).Conclusion Mifepristone have been used consistently for 3 months,the descent of serum TNF-α and IL-6 is one of the mechanism in the therapy of endometriosis.
【Key words】 mifepristone;endometriosis;TNF-α;IL-6
近年来研究表明，米非司酮的细胞免疫调节作用可能为治疗子宫内膜异位症（内异症）的机制之一，本研究观察米非司酮10mg/d治疗内异症3个月患者血清中TNF-α与IL-6的变化，进一步探明其作用机制。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择2000年1月～2003年12月在我院妇产科经腹腔镜或开腹手术证实的EM患者40例为研究对象，随机分为两组。米非司酮组20例，年龄23～45岁，按美国生育协会修正的标准（R-AFS）分期，其中Ⅰ～Ⅱ期7例，Ⅲ～Ⅳ期13例。丹那唑组20例，年龄26～43岁，其中Ⅰ～Ⅱ期9例，Ⅲ～Ⅳ期11例。两组患者的年龄、不孕时间及手术检查时的月经天数差异均无显著性（P>0.05）。
1.2 方法
1.2.1 治疗方法 米非司酮组给予米非司酮10mg，口服，1次/d。丹那唑组患者给予丹那唑200mg，口服，2～3次/d。两组保留子宫的患者于术后第1个月经周期的第2天开始服药，行子宫全切术的患者于术后第7天开始服药，疗程均为3个月。
1.2.2 标本采集 用药前与治疗3个月时抽取患者外周静脉血8ml，标本以2500r/min离心10min，取上清液储存于-30°C冰箱内待测。
1.2.3 血清TNF-α与IL-6的测定 采用酶联免疫吸附试验测定血清中TNF-α与IL-6含量（试剂盒购自北京邦定生物公司）。具体操作过程如下：（1）向已包被TNF-α、IL-6单抗的酶标板微孔中加入生物素标记的抗体50μl。（2）每孔中加入稀释10倍的待测标本、倍比稀释的标准品50μl，20℃～25℃放置2h。（3）用自动洗板机洗板3次，每孔加入稀释的S-HRP酶复合物100μl。（4）酶标板加盖，20℃～25℃放置30min。(5)自动洗板3次，加入底物溶液100μl。（6）20℃～25℃避光放置30min。（7）加入终止液100μl终止反应。（8）ELISA检测仪在450nm处读取测定数值。
1.3 统计学方法 试验数值采用t检验，TNF-α与IL-6测定值与R-AFS评分做直线相关分析。
2 结果
2.1 血清中TNF-α与IL-6的水平 血清中TNF-α与IL-6的水平在内异症患者轻度（Ⅰ～Ⅱ期）与中重度（Ⅲ～Ⅳ期）之间比较，差异有显著性（P< 0.05），见表1。且内异症患者AFS评分与血清中TNF-α与IL-6的水平呈直线相关。r值分别为0.79和0.49（P均<0.05）。
表1 内异症患者血清中TNF-α与IL-6的水平比较 （略）
2.2 两组患者用药前后血清中TNF-α与IL-6水平的变化 两组患者用药后TNF-α与IL-6水平均明显降低，与用药前比较差异均有显著性（P<0.05），见表2。用药后两组间差异无显著性。
表2 两组患者用药前后血清中TNF-α与IL-6水平的变化 （略）
3 讨论
3.1 内异症患者血清TNF-α与IL-6的水平 大量研究表明，内异症患者免疫功能的异常与多种细胞因子的局部作用促进异位内膜种植与生长有关。这些细胞因子在患者血液、腹腔液中的水平明显升高，且与疾病严重程度有关［1］。本研究发现，内异症患者血清TNF-α与IL-6的水平随内异症期别的增加而升高，且与R-AFS的评分呈正相关，说明两者的水平随病情加重而升高。IL-6是多功能细胞因子，主要生物作用是诱导B细胞分化和产生抗体，刺激细胞的生长和血管的形成［2］。TNF-α是免疫活性细胞合成与分泌的一类介导炎症和免疫反应的多肽类蛋白，可同时作用于异位内膜细胞导致IL-6进一步升高［3］。TNF-α与IL-6二者协同作用可加重病变部位的炎症反应。
3.2 应用米非司酮3个月后血清TNF-α与IL-6水平的变化 米非司酮的免疫调节作用已受到人们的关注，体外试验证实米非司酮对内异症患者异位内膜细胞IL-6分泌有明显抑制作用［3］。本文研究结果，米非司酮对内异症患者血清TNF-α与IL-6起到了降调节作用。有可能与其直接抑制异位内膜细胞TNF-α与IL-6分泌有关。试验证明米非司酮组用药3个月后，雌二醇水平略高于Barbieri提出的内异症雌激素治疗窗［4］，也提示米非司酮的作用机制并非仅仅由于低雌激素造成异位内膜萎缩，还可能通过参与细胞因子的免疫调节作用达到临床治疗目的。
丹那唑是一种合成的17-α-乙炔睾酮的衍生物，主要通过抑制垂体促性腺激素的合成而抑制卵巢功能，雌激素达到绝经后水平，使异位内膜萎缩［5］，分泌细胞因子减少。同时近年来研究说明，丹那唑也直接参与内异症的免疫调节，Koumantakis等［6］发现内异症患者经丹那唑治疗后外周血细胞因子IL-6和IL-1水平明显降低。体外研究进一步证实丹那唑能明显抑制巨噬细胞分泌IL-6和TNF-α。本文研究结果也显示，丹那唑组血清TNF-α与IL-6的水平明显降低。可进一步推测，米非司酮是人工合成的19-去甲基睾酮的衍生物，与丹那唑同属睾酮的衍生物，二者相似的化学结构可能是他们治疗内异症发挥免疫调节作用的共同基础。
【参考文献】
1 Rier SE,Parsons AK,Becker JL.Altered interleukin-6 production by peritoneal leukocytes from patients with endometriosis.Fertil steril,1994,61:294-299.
2 Gorospe WC, Hugher FM,Spangelo BL.Interleukin-6 effects on and production by rate granulose cells in vitro.Endocinlolgy,1992,130:1750-1752.
3 Akoum A, Lemay A, Paradis I，et al.Secretion of interleukin-6 by human endometriotic cells and regulation by proinflammatory cytokines and sex steroids.Hum Reprod,1996,11:2269-2275.
4 Barbieri RL.Hormone treatment of endometriosis:the estrogen threshold hypothesis.Am J Obstet Gynecol,1992,166:740-745.
5 罗丽兰.生殖免疫学.武汉：湖北科学技术出版社，1998，183.
6 Koumantakis E,Mataliotakis I,Neonaki M,et al.Soluble serum interleukin-2 receptor, interleukin-6 and interleukin-1 in patients with endometriosis and in control.Arch Gynecol Obstect,1994,225:107-113.
(编辑：乔 晓)
作者单位： 056001 河北邯郸，邯郸市中心医院