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【摘要】 目的 探讨亚健康人群外周血T淋巴细胞Ag-NORs活性表达特点与其发生发展的关系。 方法 应用KL型免疫图像分析系统及其配套试剂和方法，分析亚健康人群外周血T淋巴细胞Ag-NORs的表达，并与对照组比较，以T淋巴细胞核仁/细胞核（I/S）银染面积之比表示。 结果 亚健康组Ag-NORs活性为I/S（7.36±0.77）%，非常显著地低于对照组（7.74±0.65）%，P<0.01。在Ag-NORs高活性表达中，亚健康组明显低于对照组，分别为18%（14/78）与45%（21/47），P<0.01;而Ag-NORs低活性表达中，亚健康组为10.26%（8/78），对照组则无一例低活性（P<0.05）。 结论 亚健康人群T淋巴细胞Ag-NORs活性明显降低，细胞免疫水平低下，是临床亚健康发生发展的重要因素。
关键词 T淋巴细胞 嗜银蛋白 亚健康
核仁形成区（NORs）主要由核糖体RNA基因（rDNA）组成，在RNA聚合酶I作用下转录核糖体RNA（rRNA）。Ag-NORs（Argyrophilic nucleolar organizer region proteins）是被硝酸银染色的NORs区。1984年Ochs等 ［1］ 利用双向凝胶电泳法，发现可被硝酸银染色的物质是rDNA区域周围的酸性非组蛋白（A32蛋白，B23蛋白），其参与和调控核糖体前RNA的转录、加工和装配。亚健康人群外周血淋巴细胞Ag-NORs的特点未见报道。笔者观察了临床诊断为亚健康的体检人员78例的Ag-NORs活性表达，并与47例健康成人比较，获得了有意义的结果。
1 资料与方法
1.1 一般资料 亚健康组:挑选2003年3～6月在我院住院体检的在职及离退休干部最后总检诊断为亚健康者88例，男女各半，年龄30～75岁，（以下简称亚健康组）。对照组:挑选年龄30～50岁的健康成人（肝肾功能正常，排除心脑血管疾病及其它慢性病，且无亚健康临床症状的干部、工人）68例，男女各半为对照组。
1.2 仪器和试剂 KL型免疫图像分析系统及其1640培养液、固定液等配套试剂由北京健尔康医疗设备有限公司提供。
1.3 方法 测定方法同参考文献 ［2］ ，图像分析采用KL型免疫图像分析系统，分别计数30个T淋巴细胞核仁与细胞核银染面积之比值（I/S），以百分数表示。
1.4 统计学方法 采用两组样本计量的t检验公式计算。
2 结果
2.1 T淋巴细胞Ag-NORs活性表达 亚健康组I/S（7.36±0.77）%，非常显著地低于对照组（7.74±0.65）%，P<0.01，见表1。
表1 亚健康人群T淋巴细胞Ag-NORs活性表达 组别 例数 I/S（略）
2.2 T淋巴细胞Ag-NORs高活性与低活性表达分析 笔者以I/S>8.00%与<6.00%分别为Ag-NORs高活性与低活性表达标准。结果:亚健康组高活性仅为14例（18%），明显低于对照组21例（45%），P<0.01;而低活性表达中亚健康组却有8例（10.26%），对照组则无一例低活性，P<0.05，见表2。
表2 亚健康人群T淋巴细胞Ag-NORs高活性与低活性表达 例（略）
3 讨论
T淋巴细胞Ag-NORs是一种酸性非组蛋白，它调控着rDNA转录成rRNA的过程，是反映rDNA转录活性的重要指标。当某些外因或内因所致血清中出现的抑制细胞因子会不同程度地抑制细胞的rDNA转录，使Ag-NORs含量降低。因此，Ag-NORs转录活性，是细胞免疫功能的重要标志 ［2］ 。本文资料证明，亚健康组T淋巴细胞Ag-NORs I/S非常显著的低于对照组（P<0.01），见表1;在对Ag-NORs高活性与低活性表达的分析中，对照组高活性为45%，几乎半数为高活性表达，而亚健康组仅为18%，非常显著的低于对照组（P<0.01）;而低活性表达则亚健康组显著高于对照组（P<0.05），见表2。有文献报道:老年人有功能的T淋巴细胞仅为青年人的50%～80% ［3］ 。本文结果提示亚健康人群的免疫状态与老年人基本一致。上述实验证明，亚健康人群不仅免疫活性细胞的数量减少，比例失调，而且免疫功能明显降低，是亚健康发生发展及向疾病转化的重要原因。有实验证明将年轻小鼠的骨髓和胸腺移植到老年小鼠体内，能使老年小鼠恢复青春，并能延长生命 ［3］ 。因此激发免疫细胞的活性，提高免疫功能， 将成为调整和纠正亚健康状态、延缓衰老的重要手段。
参考文献
1 Ochs RL，Busch H.Further evidence that phosphoprote in C23is the nucleloar silver staining protein.Exp Cell Res，1984，152:260.
2 林其焯，陈立奇，吴工，等.外周淋巴细胞脱氧核糖核酸蛋白体转录活性分析.中华医学检验杂志，1996，19（4）:220-222.
3 郭玉红，梁辉.衰老与延缓衰老的研究进展.中国老年学杂志，2002，22:84-85.
（编辑深 蓝）
作者单位:100073北京电力医院